Publicado: 2023 | Última revisión: mayo de 2026

Guía completa sobre las mejores prácticas en el almacenamiento de células

Visión general de la gestión de cultivos celulares

La gestión eficaz de los cultivos celulares es esencial para mantener su integridad con fines de investigación y aplicaciones terapéuticas. El cultivo continuo o prolongado de líneas celulares puede dar lugar a diversas complicaciones, tales como:

• Contaminación microbiana: Los cultivos abiertos son vulnerables a diversas infecciones microbianas que pueden alterar el comportamiento y la viabilidad celular.
• Alteración de las características: Las características celulares clave, como la expresión de antígenos o la producción de anticuerpos, pueden perderse con el tiempo.
• Variación genética: Puede producirse inestabilidad genómica en líneas celulares conocidas por sus cariotipos inestables, lo que da lugar a resultados experimentales poco confiables.
• Limitación de la vida útil: Ciertos tipos de células tienen un número limitado de divisiones antes de entrar en senescencia y dejar de proliferar.
• Riesgo de contaminación cruzada: El cultivo prolongado aumenta el riesgo de que una línea celular contamine a otra, lo que da lugar a datos erróneos.
• Gran consumo de recursos: Los cultivos a largo plazo exigen más consumibles y mayor mano de obra, lo que eleva significativamente los costos.

Enfoque estratégico para el almacenamiento de líneas celulares

Un sistema de banco de células es un enfoque estratégico para mitigar los riesgos mencionados anteriormente. El sistema recomendado es el sistema de Banco de Células Maestro, que implica los siguientes pasos:

1. Cuarentena inicial: Los cultivos celulares recién adquiridos deben aislarse y tratarse bajo condiciones estrictas de cuarentena para prevenir la contaminación en el laboratorio.
2. Establecimiento de la reserva de referencia: Tras la expansión inicial del cultivo, se debe criopreservar un pequeño número de ampollas (3-5) como reserva de referencia para uso de emergencia.
3. Formación del banco maestro de células: Expandir los cultivos a partir de una ampolla del stock de reserva para establecer un banco maestro de células, que consista en un número mayor de ampollas (10 a 20 o más, según el uso proyectado).
4. Control de calidad riguroso: Un subconjunto del banco maestro de células se somete a pruebas exhaustivas de control de calidad, que incluyen la evaluación de la viabilidad celular, la confirmación de la ausencia de contaminantes microbianos y, potencialmente, la realización de pruebas virales y de autenticidad.
5. Desarrollo del banco de células de trabajo: A continuación, se utiliza una parte del banco maestro de células para crear un banco de células de trabajo, que es la fuente principal para la investigación y las aplicaciones activas.

Protocolos detallados de control de calidad

El control de calidad es una parte crucial del mantenimiento de un banco de células. Abarca:

• Pruebas de viabilidad y recuento: Asegurarse de que las células estén vivas y presentes en cantidades suficientes.
• Cribado microbiano: Pruebas periódicas para detectar bacterias, hongos y micoplasmas a fin de evitar que los cultivos celulares se vean comprometidos.
• Procedimientos de autenticación: Confirmar la identidad de las líneas celulares mediante métodos como el perfil de ADN.

Recomendaciones de almacenamiento y uso

Las condiciones adecuadas de almacenamiento son las siguientes:

• Instalaciones de almacenamiento específicas: Utilizar instalaciones diseñadas específicamente para almacenar bancos de células, como tanques de nitrógeno líquido o congeladores eléctricos, para prevenir la contaminación cruzada y garantizar la viabilidad a largo plazo.

Consistencia y garantía de calidad:

• Material celular consistente: Un sistema de bancos de células garantiza que todos los materiales utilizados en los experimentos provengan de una fuente consistente.
• Número de pases controlado: Al utilizar células dentro de un rango controlado de números de pases, se minimiza la variabilidad experimental.
• Práctica de cultivo «justo a tiempo»: Cultivar células solo cuando es necesario ayuda a preservar las características originales de la línea celular y reduce los costos asociados con el mantenimiento de cultivos continuos.