Células SiHa: arrojando luz sobre la investigación del cáncer de cuello uterino
Las células SiHa son células de cáncer de cuello uterino ampliamente utilizadas en la investigación biomédica. Son excelentes huéspedes para la transfección y, por lo tanto, son adecuadas para estudios de expresión génica. Debido a su origen humano y a su relevancia en el cáncer de cuello uterino, estas células se emplean principalmente en estudios de biología del cáncer, virología y desarrollo de fármacos.
- Medio de cultivo
- Para el crecimiento óptimo de las células SiHa se utiliza el medio mínimo esencial de Eagle (EMEM) que contiene 10 % de suero fetal bovino (FBS), 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ y la solución salina equilibrada de Earle (EBSS). El medio se reemplaza de 2 a 3 veces por semana.
- Tiempo de duplicación
- El tiempo de duplicación de las células SiHa es de aproximadamente 17 horas.
- Tipo de crecimiento
- SiHa es una línea celular adherente.
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Pedir SiHa
Características generales y origen de las células SiHa
Es fundamental comprender el origen y las características generales de una línea celular, ya que esto influye en su uso dentro de su investigación. En esta sección del artículo, aprenderá sobre el origen de la línea celular SiHa, sus características distintivas y mucho más: ¿Qué es la línea celular cancerosa SiHa? ¿Qué son las células SiHa y el VPH? ¿Cuál es el origen de la línea celular SiHa? ¿Cuál es la morfología de SiHa?
- SiHa, la línea celular de carcinoma cervical, se derivó de fragmentos de una biopsia uterina primaria de una mujer asiática (de 55 años) con cáncer de células escamosas [1].
- La línea celular SiHa presenta un cariotipo hipertriploide. La mayoría de las células tienen un número promedio de cromosomas entre 69 y 72. Sin embargo, alrededor del 24 % de las células poseen un número modal de cromosomas de 71.
- Las células SiHa son positivas para el virus del papiloma humano tipo 16. Muestran la integración de aproximadamente 1 a 2 copias del genoma del VPH por célula [2].
- Estas células de cáncer de cuello uterino presentan una morfología epitelial.
Línea celular SiHa: Información sobre el cultivo
Mantener un cultivo de una línea celular no es fácil hasta que conoces todos los puntos clave para su cultivo. Debes saber: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células SiHa? ¿Cuál es el medio de cultivo de las células SiHa? ¿Cómo se cultiva la línea celular SiHa?
Puntos clave para el cultivo de células SiHa
Tiempo de duplicación:
El tiempo de duplicación de las células SiHa es de aproximadamente 17 horas.
Adherente o en suspensión:
SiHa es una línea celular adherente.
Proporción de subcultivo:
La proporción de subcultivo para las células SiHa es de 1:2 a 1:4. Para el pasaje, las células adherentes se enjuagan con PBS 1x. Se agrega solución de Accutase y las células se incuban durante 8 a 10 minutos a temperatura ambiente. A continuación, se agrega el medio de cultivo y se centrifugan las células. Se resuspende el sedimento celular y se vierten las células en un nuevo frasco para su cultivo.
Medio de crecimiento:
Para el crecimiento óptimo de las células SiHa se utiliza el medio mínimo esencial de Eagle (EMEM) que contiene 10 % de suero fetal bovino (FBS), 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ y la solución salina equilibrada de Earle (EBSS). El medio se reemplaza de 2 a 3 veces por semana.
Condiciones de crecimiento:
Las células SiHa se mantienen en una incubadora humidificada a 37 °C con un suministro de 5 % de CO₂.
Almacenamiento:
Los viales congelados de la línea celular SiHa de cáncer de cuello uterino se almacenan a una temperatura inferior a -150 °C en un congelador eléctrico o en la fase de vapor de nitrógeno líquido para un almacenamiento a largo plazo.
Proceso de congelación y medio:
Para la congelación de las células SiHa se utiliza el medio de congelación CM-1 o CM-ACF. Las células se congelan mediante un método de congelación lenta que permite solo una disminución de 1 °C por minuto para proteger la viabilidad de las células.
Proceso de descongelación:
Las células congeladas se mantienen de 40 a 60 segundos en un baño de agua a 37 °C hasta que quede un pequeño trozo de hielo. Posteriormente, se agrega medio de cultivo fresco y las células se centrifugan para eliminar los componentes del medio de congelación. El sedimento celular se resuspende y las células se dispensan en un frasco de cultivo para su crecimiento.
Nivel de bioseguridad:
Se requiere un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 para manejar y mantener cultivos celulares de SiHa.
Ventajas y desventajas de la línea celular SiHa
Al igual que otras líneas celulares de carcinoma humano, la SiHa también posee algunas características distintivas asociadas a ciertas ventajas e inconvenientes. A continuación, analizamos algunas de las más significativas.
Ventajas de la línea celular SiHa de cáncer de cuello uterino
- Modelo de cáncer de cuello uterino
- Derivada del carcinoma escamoso de cuello uterino.
- Se utiliza para estudiar los mecanismos, el crecimiento y el desarrollo del cáncer de cuello uterino.
- Expresa los genes p53+ y pRB+, relacionados con la reparación del ADN, la regulación del ciclo celular y la supresión tumoral.
- Potencial tumorigénico
- Las células SiHa son tumorigénicas y pueden inducir tumores epidermoides de grado III poco diferenciados en ratones desnudos.
- Se utilizan para la investigación del cáncer in vivo y para probar tratamientos contra el cáncer.
Desventajas de las células SiHa
- Tasa de proliferación
- Las células SiHa se proliferan rápidamente, lo que lleva a un crecimiento excesivo.
- Requieren pases frecuentes, lo que aumenta el riesgo de inestabilidad genética, lo cual puede afectar el comportamiento celular con el tiempo.
Aplicaciones de investigación de las células SiHa
La línea celular SiHa se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer de cuello uterino. A continuación se analizan algunas aplicaciones específicas de esta línea celular.
- Estudios relacionados con el virus del papiloma humano (VPH): Las células SiHa son positivas para el VPH 16; por lo tanto, son recursos valiosos para estudiar la infección por el virus del papiloma humano, sus mecanismos moleculares y su papel en el desarrollo y la progresión del cáncer de cuello uterino. Los investigadores también utilizan estas células para investigar la replicación viral, la integración y su impacto en los procesos de la célula huésped. Un estudio realizado en 2020 utilizó la línea celular SiHa para examinar el papel de las oncoproteínas E6/E7 del VPH en el desarrollo del cáncer de cuello uterino, mediante su inhibición con tecnología CRISPR. Los resultados revelaron que la inhibición de los genes E6/E7 provocó la inhibición del crecimiento de las células SiHa y la apoptosis. Por lo tanto, estos genes virales podrían servir como dianas farmacológicas cruciales para el desarrollo de terapias contra el cáncer de cuello uterino asociado al VPH [3].
- Biología del cáncer: Las células SiHa sirven como un modelo invaluable para estudiar la biología del cáncer de cuello uterino, incluyendo su desarrollo, progresión, metástasis e invasión. Los investigadores utilizan estas células para explorar las mutaciones genéticas y las vías moleculares subyacentes que contribuyen al desarrollo y crecimiento del cáncer de cuello uterino; por ejemplo, en un estudio se utilizaron células SiHa y se descubrió que la regulación al alza de SEC61G (subunidad gamma del translocón SEC61) fomenta la proliferación de las células cancerosas del cuello uterino mediante la activación de la cascada MAPK [4].
- Cribado y pruebas de fármacos: SiHa es una línea celular de cáncer de cuello uterino ampliamente utilizada para evaluar la eficacia de posibles fármacos anticancerosos específicos para el cáncer de cuello uterino asociado al VPH. Los investigadores exploran el potencial antiproliferativo, apoptótico y antimetastático de los fármacos utilizando estas células. Por ejemplo, un estudio realizado en 2019 investigó el potencial citotóxico de los extractos de la fruta de Vatica diospyroides Symington Tipo SS en la línea celular de cáncer de cuello uterino SiHa [5].
¡Células SiHa para tu investigación!
Publicaciones de investigación en las que se utiliza la línea celular SiHa
Algunas publicaciones de investigación importantes y frecuentemente citadas se centran en la línea celular SiHa de carcinoma escamoso cervical.
Esta publicación en *OncoTargets and Therapy* (2019) propuso que el compuesto natural aloe-emodina ejerce efectos apoptóticos asociados al VPH E6/E7 y al metabolismo de la glucosa en las células de cáncer de cuello uterino SiHa.
Este artículo se publicó en la revista *Future Journal of Pharmaceutical Sciences* en 2022. Este estudio investigó las actividades antitumorales del extracto de hoja de la planta *Excoecaria agallocha (L.)* en la línea celular de cáncer de cuello uterino SiHa.
Este estudio, publicado en el Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022), propuso que la molécula de 1,10-fenantrolina, al acoplarse con nanopartículas de sulfato de zinc, ejerce efectos antiproliferativos significativos en las células SiHa.
Esta investigación se publicó en la revista Oncology Reports en 2019. El estudio reveló que el astragalósido IV, un producto natural, suprime la migración y la invasión de las células SiHa al modular las vías de señalización PI3K y MAPK mediadas por el TGF-β1.
Este estudio, publicado en Biomedicine & Pharmacotherapy (2020), reveló que IFI16 (proteína 16 inducible por interferón gamma) regula el gen PD-L1 mediante la activación de la vía STING-TBK1-NF-kB para estimular el crecimiento de las células de cáncer de cuello uterino SiHa.
Recursos para la línea celular SiHa: protocolos, videos y más
A continuación, te presentamos algunos recursos en línea sobre las células SiHa.
- Transfección de células SiHa: Este artículo de investigación contiene un protocolo para el mantenimiento de las células de cáncer de cuello uterino SiHa y para la transfección de estas células.
El siguiente enlace contiene información sobre el cultivo de las células SiHa.
- Línea celular SiHa: este sitio web contiene muchos datos valiosos sobre la línea celular SiHa. Esto incluye información sobre medios de crecimiento, condiciones de cultivo, protocolos para el subcultivo de células SiHa y el manejo de sus cultivos proliferativos y criopreservados.
Preguntas frecuentes sobre las células de carcinoma cervical SiHa
Las células SiHa son una línea celular cancerosa humana derivada del carcinoma escamoso de cuello uterino. Se utilizan ampliamente en la investigación sobre los carcinomas de cuello uterino, especialmente en estudios relacionados con el virus del papiloma humano tipo 16 (VPH-16), del que se sabe que desempeña un papel crucial en la patogénesis del cáncer de cuello uterino.
En las células SiHa, el ADN del VPH-16 suele integrarse en los cromosomas de la célula huésped. Los sitios de integración cromosómica del VPH pueden ser fundamentales para comprender la progresión y la resistencia al tratamiento del carcinoma cervical.
Sí, las células SiHa son un componente fundamental del panel de células de cáncer de cuello uterino que se utiliza para la caracterización biológica de las células tumorales, el análisis de los efectos de los fármacos quimioterapéuticos y el desarrollo de nuevos medicamentos para la investigación científica.
Por supuesto. Las células SiHa, que contienen ADN del VPH integrado, son de un valor incalculable para la hibridación in situ y otras técnicas de biología molecular destinadas a estudiar el papel del VPH en el desarrollo de las neoplasias cervicales y la posible potenciación de los efectos de la curcumina en el tratamiento del cáncer.
Las células SiHa son tumorigénicas en ratones inmunodeficientes, lo que las convierte en un modelo adecuado para estudiar la patogenicidad del carcinoma cervical y los efectos in vivo de posibles tratamientos.
Se pueden encontrar referencias sobre las células SiHa en la literatura científica, en revistas como *Cancer Research* (Cancer Res), *Biochemistry and Cell Biology*, *Journal of Cellular Physiology* y otras. Estas referencias ofrecen información detallada sobre el uso de las células SiHa en el contexto de los estudios del genoma del cáncer, el fenotipado y el análisis de las funciones génicas.
El perfil genético de las células SiHa, que incluye la expresión de varios genes y la adquisición del CDV, contribuye a una comprensión integral de la etiología del carcinoma cervical y al desarrollo de terapias dirigidas.
Las células SiHa se mantienen en cultivo celular primario, respetando condiciones específicas de crecimiento y requisitos del medio para preservar sus características y funcionalidad con fines de investigación.
Referencias
- Melzer, C., J. von der Ohe y R. Hass, «Revisión concisa: la interacción entre el estroma mesenquimal y las células de tipo stem con las células cancerosas ofrece potencial terapéutico». Stem cells, 2018. 36(7): págs. 951-968.
- Ostrowska, K.M., et al., Investigación de la influencia del virus del papiloma humano de alto riesgo en la composición bioquímica de las células de cáncer de cuello uterino mediante espectroscopia vibracional. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
- Chen, Y., et al., Inhibición del crecimiento in vitro e in vivo de células de cáncer de cuello uterino humano mediante la escisión de los ARNm de E6/E7 del virus del papiloma humano por el sistema CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
- Fan, Y., et al., SEC61G promueve la proliferación del cáncer de cuello uterino al activar la vía de señalización MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A., et al., «Potencial anticancerígeno de los extractos de fruta de Vatica diospyroides tipo Symington SS y su efecto sobre la muerte celular programada de líneas celulares de cáncer de cuello uterino». The Scientific World Journal, 2019. 2019.