Línea celular HT-29
La HT-29 es una línea celular de cáncer colorrectal humano con una amplia gama de aplicaciones en investigación oncológica y toxicológica. Por ejemplo, estas células son sensibles a los tratamientos quimioterapéuticos estándar contra el cáncer colorrectal. Además, la línea celular HT-29 es un modelo in vitro bien caracterizado para investigar la respuesta del epitelio intestinal a las infecciones bacterianas. Las células HT-29 imitan las características de las células intestinales maduras, es decir, los enterocitos, y por lo tanto son adecuadas para estudios de adhesión y mecanismos.
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- Nivel de bioseguridad
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- Cytion — Pedir HT-29
- Células HT-29: Origen e información general
- Información sobre el cultivo celular de la línea celular HT-29
- Células HT-29: ventajas y limitaciones
- Células HT-29: aplicaciones
- 5. Publicaciones de investigación sobre las células HT-29
- Recursos sobre las células HT-29: protocolos, videos y más
- Referencias
- Preguntas frecuentes
Células HT-29: Origen e información general
Antes de utilizar cualquier línea celular, es importante conocer sus características generales y su origen. Esta sección te ayudará a aprender: ¿Qué son las células HT-29? ¿Es HT-29 una línea celular de cáncer colorrectal? ¿Cuál es la morfología de las células HT-29?
¿Qué es la línea celular HT-29? La HT-29 es una línea celular de adenocarcinoma colorrectal establecida en 1964 por Trempe y Fogh. Las células se derivaron originalmente del tumor primario de una mujer caucásica (de 44 años) con adenocarcinoma colorrectal [1]. Desde su establecimiento, esta línea celular se ha utilizado para estudiar la biología de los cánceres.
Morfología de las células HT-29: La línea celular HT-29 presenta, en general, una morfología de tipo epitelial. Las células diferenciadas crecen en monocapas, forman uniones célula-célula estrechas y poseen un borde en cepillo apical. Si estas células se cultivan en un medio deficiente en glucosa o se les administran inductores como el butirato o el ácido, exhiben características similares a las de los enterocitos.
Tamaño celular: El diámetro de la línea celular HT-29 de cáncer colorrectal es de 11 μm.
Genoma y ploidía: El número modal de cromosomas de la línea celular HT-29 es 71. Puede oscilar entre 68 y 72. Además, el número cromosómico simplificado de las células HT-29 es hipertriploide, con un componente 2S que se presenta en un 2,4 %.
¿Qué es HT29 MTX? HT29 MTX es una línea celular resistente al metotrexato aislada de la línea celular original HT-29 de cáncer de colon humano mediante adaptación a 10 µM de metotrexato. Estas células presentan características de células caliciformes maduras secretoras de moco.
Información sobre el cultivo celular de la línea celular HT-29
Conocer los requisitos básicos de cultivo de una línea celular puede facilitarte el trabajo con ella. Debes saber: ¿cuál es el tiempo de duplicación de la línea celular HT-29? ¿Cuál es la densidad de siembra de las células HT-29? ¿Qué medios se utilizan para las células HT-29?
Tiempo de duplicación
El tiempo de duplicación promedio de la línea celular HT-29 es de 24 horas.
Adherente/en suspensión
La HT-29 es una línea celular adherente.
Densidad de siembra
La densidad de siembra recomendada para las células HT-29 es de 3 x 10⁴ células/cm². Las células cultivadas se lavan con PBS 1X y se desprendan tras una incubación con Accutase durante 8 a 10 minutos. Se agrega medio fresco y se centrifugan las células. Se resuspende el sedimento celular y se distribuyen las células en nuevos frascos a la densidad celular recomendada.
Medio de crecimiento
Para el cultivo óptimo de las células HT-29 se utiliza el Medio Esencial Mínimo de Eagle (EMEM) suplementado con 2,5 mM de L-glutamina y un 10 % de suero fetal bovino (FBS). El medio debe cambiarse de 2 a 3 veces por semana.
Condiciones de crecimiento
Las células HT-29 requieren una incubadora humidificada a una temperatura de 37 °C y con un suministro de 5 % de CO₂ para su crecimiento.
Almacenamiento
Estas células se almacenan en la fase de vapor de nitrógeno líquido a una temperatura inferior a -195 °C.
Medio y proceso de congelación
El medio de congelación utilizado para la línea celular HT-29 es CM-1 o CM-ACF. Las células se congelan mediante un proceso de congelación lenta que provoca una disminución de 1 °C en la temperatura y protege eficazmente la viabilidad de las células.
Proceso de descongelación
Las células HT-29 congeladas se descongelan en un baño de agua a una temperatura de 37 °C. Estas células pueden resuspenderse y dispensarse directamente en un frasco con medio de crecimiento fresco. Por el contrario, las células descongeladas pueden centrifugarse para eliminar los componentes del medio de congelación, resuspenderse en medio fresco y cultivarse en frascos.
Nivel de bioseguridad
Se utiliza el nivel de bioseguridad 1 para manipular y mantener la línea celular HT-29.
Células HT-29: ventajas y limitaciones
Cada línea celular tiene sus propias ventajas y desventajas que la distinguen de otras líneas celulares. En esta sección se abordarán las principales ventajas y limitaciones asociadas a las células HT-29.
Ventajas
Las principales ventajas de las células HT-29 son:
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Fáciles de cultivar
La línea celular HT-29 es fácil de manejar y mantener, sin requisitos complejos para su cultivo. Se cultiva ampliamente en laboratorios de investigación.
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Modelo in vitro de células intestinales
Las células HT-29 pueden diferenciarse en células intestinales maduras (enterocitos y células productoras de moco) bajo condiciones específicas de cultivo. Se utilizan como modelo celular para estudiar la digestión de los alimentos y la biodisponibilidad.
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Alta eficiencia de transfección
Las células de cáncer de colon HT-29 ofrecen una alta eficiencia de transfección, lo que las hace adecuadas para estudios de expresión y regulación génica. Se pueden realizar experimentos de transfección tanto transitoria como estable utilizando diversos métodos.
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Sensibilidad a los fármacos
Las células HT-29 son sensibles a fármacos quimioterapéuticos como el fluorouracilo y el oxaliplatino, que se utilizan comúnmente en el tratamiento del cáncer de colon. Se utilizan para estudiar la resistencia a los fármacos y para evaluar posibles fármacos terapéuticos para el carcinoma colorrectal.
Limitaciones
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Heterogeneidad
Las células HT-29, al igual que otras líneas celulares cancerosas, presentan heterogeneidad y es posible que no formen una población celular uniforme. Esto puede afectar la reproducibilidad de los resultados en ciertos ensayos y dar lugar a variaciones menores en los resultados experimentales.
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Diferenciación limitada
Las células HT-29 tienen un potencial de diferenciación limitado. No se diferencian completamente en células intestinales o de colon, sino que solo presentan algunas características distintivas. Esta limitación puede restringir su uso en el estudio de procesos biológicos más complejos.
Células HT-29: Aplicaciones
La línea celular HT-29 se cultiva ampliamente en laboratorios de investigación debido a su amplia gama de aplicaciones. En esta sección se abordarán solo algunas de las aplicaciones más significativas de las células HT-29.
Investigación del cáncer: La HT-29 es una línea celular de adenocarcinoma colorrectal, por lo que se utiliza para estudiar la progresión y el desarrollo del cáncer, así como los mecanismos moleculares subyacentes. Un estudio realizado en 2018 utilizó la línea celular HT-29 para investigar las moléculas celulares responsables de la metástasis. Este estudio observó que los genes de la vimentina y del CXCR4 regulan la metástasis celular. Por otro lado, la transfección de un mimético del microARN-193a-5p puede reducir los niveles de ARNm de estos genes y disminuir con éxito la metástasis de las células cancerosas [2].
Investigación toxicológica: La línea celular HT-29 se utiliza ampliamente en la investigación toxicológica. Estas células de carcinoma colorrectal se emplean para evaluar la toxicidad de diferentes candidatos a fármacos mediante diversos ensayos. Por ejemplo, un estudio exploró el potencial tóxico de un extracto etanólico de la planta Syzygium cumini en la línea celular HT-29. Los resultados mostraron una supresión significativa del crecimiento de las células HT-29, lo que indica las prometedoras propiedades anticancerígenas del extracto [3].
Microbiología: Las células HT-29 pueden utilizarse como sistema de células huésped para investigar la patogénesis de posibles microbios, es decir, bacterias y virus. Los investigadores pueden infectar las células HT-29 con microbios para investigar su virulencia y la respuesta del huésped. En un estudio de este tipo se utilizaron células HT-29 para explorar las propiedades probióticas de las bacterias del ácido láctico [4]. Otro estudio utilizó células HT-29 para evaluar la eficacia y la seguridad de los tratamientos con bacteriófagos [5].
5. Publicaciones de investigación sobre las células HT-29
En esta sección se presentan algunas publicaciones destacadas sobre las células HT-29 que te ayudarán a diseñar tu estudio de investigación.
Este estudio propuso el extracto etanólico de Syzygium cumini como un posible agente anticancerígeno contra la línea celular colorrectal HT-29. El extracto inhibió significativamente el crecimiento de las células cancerosas.
Esta publicación en *Bioscience Reports* evaluó la actividad anticancerígena de un compuesto, la tetrandrina, en las células HT-29. Los resultados revelaron que la tetrandrina inhibe la proliferación y el crecimiento de las células cancerosas mediante la regulación de las vías de señalización celular.
Este estudio propuso que el miARN-193a-5p podría regular la metástasis de las células HT-29 al regular los genes relacionados con la metástasis.
Este artículo se publicó en *Nature Scientific Reports* en 2018. En este estudio se utilizó la línea celular tumorigénica HT-29 como modelo celular intestinal para evaluar la eficacia del tratamiento propuesto con bacteriófagos.
En este estudio, los investigadores utilizaron células HT-29 para investigar las actividades probióticas de las bacterias del ácido láctico. Curiosamente, el estudio indicó que las bacterias lactobacilos impiden la adhesión de bacterias patógenas a las células del colon.
Recursos sobre las células HT-29: protocolos, videos y más
En esta sección se presentarán algunos recursos en línea disponibles sobre las células HT-29 que ayudarán a aprender sus protocolos de mantenimiento, cultivo y transfección.
Protocolos de cultivo celular
Los siguientes recursos te guiarán sobre el subcultivo de las células HT-29.
- Cultivo de células HT-29: Este enlace te proporcionará conocimientos básicos sobre el medio de crecimiento, la descongelación y el subcultivo de las células HT-29.
- Mantenimiento de cultivos de HT-29: Este artículo contiene toda la información útil sobre el cultivo y el mantenimiento de las células HT-29.
Protocolos de transfección
La línea celular HT-29 tiene una gran eficiencia de transfección y se utiliza con frecuencia en estudios de expresión génica. Los siguientes recursos describen los posibles protocolos de transfección para estas células.
- Transfección de HT-29: Este enlace a un sitio web contiene el protocolo detallado para la transfección de células HT-29.
- Transfección de la línea celular HT-29: Este documento describe el protocolo de transfección de la línea celular HT-29 con ADN plasmídico.
Videos relacionados con la línea celular HT-29
A continuación se presentan algunos videos sobre el cultivo y mantenimiento de esta línea celular tumorigénica.
- Pasaje de células: Este video muestra el protocolo de pasaje de células para líneas celulares adherentes.
- Transfección de células HT-29: Este video te guiará sobre el método de transfección utilizado para las células HT-29.
Esperamos que la información de este artículo le resulte valiosa y suficiente para manejar y mantener la línea celular HT-29. Si planea utilizar células HT-29 en su estudio, solicítelas con nosotros.
Referencias
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles e I. Recio, «Línea celular HT29». The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: págs. 113-124.
- Shirafkan, N., et al., «El microARN-193a-5p inhibe la migración de las células de cáncer de colon humano HT-29 mediante la supresión de la vía de metástasis». Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): págs. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean y R. Safaralizadeh, «Evaluación del efecto anticancerígeno del extracto etanólico de Syzygium cumini en la línea celular colorrectal HT-29». Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: págs. 575-581.
- Fonseca, H.C., et al., Propiedades probióticas de los lactobacilos y su capacidad para inhibir la adhesión de bacterias enteropatógenas a las células Caco-2 y HT-29. Probiotics and Antimicrobial Proteins, 2021. 13: p. 102-112.
- Shan, J., et al., «Los bacteriófagos son más virulentos contra las bacterias presentes en células humanas que en cultivos bacterianos; hallazgos a partir de células HT-29». Scientific Reports, 2018. 8(1): p. 5091.