Publicado: 17 de octubre de 2023 | Última revisión: mayo de 2026
Células A431: origen, condiciones de cultivo y aplicaciones en investigación
A431 es una línea celular de carcinoma epidermoide humano derivada de la piel de una paciente de 85 años. Es una de las líneas celulares más utilizadas en la investigación biomédica, particularmente en biología del cáncer, inmuno-oncología, dermatología y descubrimiento de fármacos. Las células A431 sobreexpresan masivamente el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) —con aproximadamente 2 a 3 millones de receptores por célula, entre 20 y 50 veces más que las células epiteliales normales—, lo que las convierte en el modelo in vitro de referencia para los estudios de señalización del EGFR y para la evaluación de terapias dirigidas contra el EGFR, como el cetuximab y el erlotinib. Las células A431 están disponibles exclusivamente a través de Cytion, su banco de células europeo independiente.
- Especie / Origen
Humana (mujer, 85 años) - Tejido
Epidermis cutánea (carcinoma epidermoide) - Morfología
Epitelial, adherente - Tiempo de duplicación
80–100 horas - Medio de cultivo
DMEM + 10 % de FBS - Nivel de bioseguridad
BSL-1 - Característica clave
Sobreexpresión de EGFR (~2–3 millones de receptores por célula) - Biomarcadores clave
EGFR (amplificado), TP53 (mutante), KRAS (tipo salvaje), PTEN (expresado) - Número de producto
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- Células A431: Características generales y origen
- Línea celular A431: Información sobre el cultivo
- Ventajas y desventajas de la línea celular A431
- Aplicaciones de investigación de las células A431
- A431 frente a otras líneas celulares de cáncer de piel
- Publicaciones de investigación que incluyen las células A431
- Recursos, protocolos y videos
- Preguntas frecuentes
Células A431: características generales y origen
Esta sección aborda las propiedades biológicas clave de la línea celular A431, incluyendo su origen, morfología, cariotipo y la sobreexpresión de EGFR que la hace excepcionalmente valiosa para la investigación.
Origen e historia de la línea celular A431
- La A431, una línea celular de cáncer de piel humano, se obtuvo de la epidermis de una paciente de 85 años con carcinoma epidermoide [1]. Fue establecida por D.J. Giard y sus colaboradores, quienes desarrollaron varias otras líneas celulares a partir de tumores sólidos.
- La línea celular ha sido ampliamente distribuida y validada por bancos de células independientes en todo el mundo, incluido Cytion, como un modelo de investigación confiable y reproducible.
Morfología y cariotipo de la A431
- Las células A-431 presentan una morfología epitelial. Se agrupan y forman racimos celulares en condiciones de cultivo estándar.
- La línea celular de cáncer de piel A431 es hipertriploide. El número modal de cromosomas es 74, presente en aproximadamente el 36 % de las células. También se observan ploidías más altas en alrededor del 1 % de la población celular.
Expresión de EGFR en las células A431
La sobreexpresión de EGFR es la característica definitoria de las células A431 y la razón principal de su uso generalizado. Las células A431 presentan una amplificación genómica del locus del gen del EGFR, lo que da como resultado aproximadamente de 2 a 3 millones de receptores de EGFR por célula —de 20 a 50 veces más que en las células epiteliales normales—. Esto convierte a la línea A431 en el control positivo de referencia para:
- La validación de anticuerpos contra el EGFR mediante Western blot, citometría de flujo e inmunofluorescencia
- Pruebas de anticuerpos monoclonales dirigidos contra el EGFR, como el cetuximab y el panitumumab
- La evaluación de inhibidores de la tirosina quinasa (TKI) del EGFR, como el erlotinib, el gefitinib y el afatinib
- El estudio de las vías de señalización posteriores, incluyendo PI3K/AKT/mTOR y RAS/MAPK/ERK
Línea celular A431: Información sobre el cultivo
Conocer los requisitos de cultivo de una línea celular facilita su manejo. En esta sección se abordan el tiempo de duplicación, el medio de cultivo, el pasaje, la criopreservación y los requisitos de bioseguridad de la línea celular A431.
Puntos clave para el cultivo de células A431
Tiempo de duplicación:
El tiempo de duplicación de la población de las células A431 oscila entre 80 y 100 horas.
Adherente o en suspensión:
La A431 es una línea celular adherente.
Densidad de siembra:
1 × 10⁴ células/cm² es lo ideal para la línea celular A431. A esta densidad, las células alcanzan la confluencia en aproximadamente 4 días. Las células adherentes se lavan con PBS (1×) y se incuban con la solución de pasaje Accutase; luego se resuspenden en medio de cultivo, se centrifugan y se distribuyen en nuevos frascos.
Medio de crecimiento:
Medio DMEM suplementado con 10 % de suero fetal bovino (FBS), 4,5 g/L de glucosa, 1,0 mM de piruvato de sodio, 1,5 g/L de NaHCO₃ y 4 mM de L-glutamina. El medio debe cambiarse cada 2–3 días.
Condiciones de cultivo:
Las células cancerosas A431 se cultivan en una incubadora humidificada con un 5 % de CO₂ a 37 °C.
Almacenamiento:
Almacenar en un congelador eléctrico o en fase de vapor de nitrógeno líquido a una temperatura inferior a −150 °C para proteger la viabilidad celular.
Proceso de congelación y medio:
CM-1 o CM-ACF son los medios de congelación recomendados para las células A431. Utilice un método de congelación lenta a velocidad controlada (−1 °C/min).
Proceso de descongelación:
Descongele rápidamente las células A431 congeladas en un baño de agua a 37 °C (40–60 segundos). Cuando quede un pequeño trozo de hielo, agregue medio de cultivo y centrifugue. Resuspender las células recolectadas y transfiéralas a frascos de cultivo.
Nivel de bioseguridad:
Se recomienda el Nivel de Bioseguridad 1 (BSL-1) para la manipulación de cultivos de A431.
Ventajas y desventajas de la línea celular A431
La línea celular A431 posee características distintivas que la hacen muy útil, pero también la limitan en ciertos contextos. A continuación, se presenta un resumen equilibrado.
Ventajas
Las principales ventajas de la línea celular cancerosa A431 son:
Sobreexpresión de EGFR
Las células A431 sobreexpresan el EGFR a un nivel de 2 a 3 millones de receptores por célula, lo que las convierte en el control positivo de referencia para los estudios de señalización del EGFR y la validación de fármacos anti-EGFR (cetuximab, erlotinib, gefitinib).
Tumorigenicidad
Las células A431 son tumorigénicas y forman tumores fácilmente en ratones inmunodeprimidos, lo que las convierte en una herramienta confiable para modelos de cáncer con xenoinjertos, a fin de estudiar la dinámica del crecimiento tumoral y evaluar nuevos tratamientos contra el cáncer in vivo.
Bien caracterizadas
Gracias a décadas de investigaciones publicadas, las células A431 están ampliamente caracterizadas a nivel genómico, proteómico y fenotípico, lo que proporciona una base científica sólida para el diseño experimental.
Formación de esferoides 3D
Las células A431 forman fácilmente esferoides 3D compactos en condiciones de adhesión ultrabaja, lo que las hace compatibles con las modernas plataformas de cribado de organoides y esferoides para estudios de penetración y eficacia de fármacos.
Desventajas
Las desventajas de las células A431 son:
Anomalías genéticas
La A431 es una línea celular cancerosa con mutaciones genéticas acumuladas y alteraciones cromosómicas (hipertriploide, número modal 74) que podrían no reproducir completamente las características originales del tumor.
Riesgo de contaminación microbiana
La línea A431 es propensa a la contaminación bacteriana. Para obtener resultados confiables, es esencial mantener una técnica aséptica estricta y realizar pruebas de rutina para detectar micoplasmas.
No es representativa de todos los tumores con EGFR
Dado que la expresión de EGFR en A431 se debe a la amplificación génica y no a una mutación (como en el cáncer de pulmón), es posible que los hallazgos no se puedan aplicar directamente a contextos tumorales con mutaciones en EGFR, como el cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC).
Aplicaciones de investigación de las células A431
La línea celular A431 se utiliza ampliamente en múltiples disciplinas de investigación. Su biología única del EGFR, su capacidad tumorigénica y su genoma bien caracterizado la convierten en una de las líneas celulares cancerosas humanas más versátiles que existen.
- Biología del cáncer: La línea A431 es una herramienta poderosa para investigar los mecanismos celulares y moleculares que impulsan el crecimiento, la metástasis y la invasión del cáncer. Los estudios han mapeado las vías de señalización PI3K/AKT/mTOR y RAS/MAPK/ERK en esta línea celular, y se ha demostrado que su inhibición induce la apoptosis en las células tumorales cutáneas A431 [2, 3].
- Pruebas de terapias dirigidas contra el EGFR: Las células A431 son el estándar de referencia para evaluar terapias anti-EGFR —anticuerpos monoclonales (cetuximab, panitumumab) e inhibidores de tirosina quinasa (TKI) de molécula pequeña (erlotinib, gefitinib, afatinib, osimertinib).
- Pruebas y evaluación de fármacos: Las células A431 se utilizan para evaluar nuevos candidatos a fármacos contra el cáncer. Un estudio de 2022 realizado por Rahim et al. demostró potentes efectos antiproliferativos de nanopartículas de plata sintetizadas biogénicamente a partir de Alstonia angustiloba en las células A431 [4].
- Modelos de xenoinjertos tumorales: Las células A431 son tumorigénicas en ratones inmunodeficientes, lo que permite el uso de modelos de xenoinjertos subcutáneos y ortotópicos para estudios de eficacia in vivo. Lim et al. utilizaron xenoinjertos derivados de A431 para evaluar los efectos radiosensibilizadores del EGF exógeno in vivo [5].
- Toxicidad cutánea e investigación dermatológica: Las células A431 son ampliamente utilizadas por empresas farmacéuticas y cosméticas para evaluar la toxicidad dérmica, la penetración cutánea y los perfiles de seguridad de compuestos aplicados por vía tópica.
- Modelos de esferoides y organoides 3D: Las células A431 forman esferoides 3D compactos en condiciones de adhesión ultrabaja o de gota suspendida, lo que permite realizar estudios de penetración y resistencia a los fármacos más relevantes desde el punto de vista fisiológico.
- Validación de anticuerpos contra el EGFR: Debido a su altísima densidad de EGFR, las células A431 son el control positivo estándar para validar anticuerpos anti-EGFR en Western blot, inmunofluorescencia, inmunohistoquímica (IHC) y citometría de flujo.
A431 frente a otras líneas celulares de cáncer de piel
La elección de la línea celular adecuada es fundamental para la validez experimental. A continuación se presenta una comparación entre la A431 y otras líneas celulares de cáncer de piel y de células escamosas de uso común:
| Característica | A431 | A375 (melanoma) | SCC-25 (Carcinoma escamoso oral) | HaCaT (queratinocito) |
|---|---|---|---|---|
| Tipo de cáncer | Carcinoma epidermoide | Melanoma maligno | Carcinoma de células escamosas oral | Queratinocito inmortalizado |
| Expresión de EGFR | +++ (~2–3 M/célula) | + (baja) | ++ (moderada) | ++ (moderada) |
| Tumorigenicidad | Sí | Sí | Sí | No |
| Morfología | Epitelial, adherente | Fusiforme, adherente | Epitelial, adherente | Epitelial, adherente |
| BSL | 1 | 1 | 1 | 1 |
| Uso principal | Investigación sobre el EGFR, pruebas de medicamentos contra el cáncer | Biología del melanoma, inhibidores de BRAF | Cáncer de cabeza y cuello, estudios de radiación | Biología de la piel, función de barrera |
Publicaciones de investigación que incluyen las células A431
A continuación se presentan algunas publicaciones importantes revisadas por pares que incluyen la línea celular de carcinoma cutáneo A431.
Publicado en *Materials Today Communications* (2020). Se evaluó el potencial anticancerígeno de las nanofibras de poli-ε-caprolactona cargadas con curcumina y de alcohol polivinílico-AuNPs contra las células cancerosas A431.
Publicado en Cellular & Molecular Biology Letters (2019). Se propuso que el microARN-221 desempeña un papel oncogénico en el carcinoma cutáneo de células escamosas al actuar sobre el gen supresor tumoral PTEN.
Publicado en BMC Complementary Medicine and Therapies (2016). Se demostró que la vincristina del hongo Eutypella spp–CrP14 induce la apoptosis en las células A431.
Publicado en Cells (2019). Se identificó a CDC42SE1 como un posible biomarcador de la progresión del cáncer de piel, ya que su regulación a la baja facilita la tumorigénesis en las células A431.
La metformina inhibe la proliferación de las células A431 al modular la vía de señalización PI3K/Akt
Publicado en Experimental and Therapeutic Medicine (2015). Se demostró que la metformina suprime la proliferación de las células A431 al regular la vía de señalización PI3K/Akt.
Recursos para la línea celular A431: protocolos, videos y más
Los siguientes recursos ofrecen orientación práctica para trabajar con células A431 en el laboratorio.
- Transfección de células A-431: una guía en video paso a paso para la transfección de células cancerosas A431.
- Línea celular cancerosa A431 — Página del producto de Cytion — Información completa sobre el cultivo celular: medio de crecimiento, densidad de siembra, pases, criopreservación y certificados de calidad.
- Protocolo de cultivo de células A431 — Un protocolo externo conciso para el cultivo de la línea celular A431 de Bio-Protocol.
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