La línea celular RAW 264.7 en la investigación sobre macrófagos e inmunología
La línea celular RAW 264.7 sirve como un modelo in vitro robusto para los macrófagos murinos, fundamental en el ámbito de la investigación inmunológica. Procedentes de un ratón BALB/c macho, estas células fueron transformadas por el virus de la leucemia murina de Abelson, lo que dio lugar a una línea celular similar a los macrófagos. Debido a su estabilidad funcional y a su capacidad inherente para realizar tanto fagocitosis como pinocitosis, las células RAW 264.7 son esenciales para el estudio de las interacciones entre el huésped y el patógeno, lo que las convierte en una piedra angular de los esfuerzos de investigación inmunológica [1,2].
- Medio de cultivo
- Consulte la página del producto
- Tiempo de duplicación
- Consulte la página del producto
- Tipo de crecimiento
- Adherente
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Pedir RAW 264.7
Características morfológicas y comportamiento de crecimiento
Al examinarlas, las células RAW 264.7 presentan un crecimiento semiadherente con tendencia a formar tanto células adherentes con forma de huso como células viables esféricas flotantes, con un diámetro celular que oscila entre 10 y 20 µm. Esta naturaleza polimórfica y su adaptabilidad a las condiciones de cultivo convierten a las células RAW 264.7 en una herramienta versátil para la manipulación y observación experimentales.
Función inmunológica y presentación de antígenos
Como células presentadoras de antígenos, las células RAW 264.7 desempeñan un papel fundamental en el sistema inmunológico. Su función va más allá del simple reconocimiento de patógenos y abarca el procesamiento y la presentación de antígenos a las células T, orquestando así una respuesta inmunológica integral. Esta dinámica facilita una comprensión más profunda de cómo el sistema inmunológico identifica y neutraliza las entidades extrañas.
Polarización de los macrófagos: el paradigma M0, M1 y M2
Las células RAW 264.7, en su estado basal como macrófagos M0, poseen la notable capacidad de polarizarse hacia el fenotipo proinflamatorio M1 o hacia el fenotipo antiinflamatorio M2. Esta capacidad de polarización brinda a los investigadores un modelo para estudiar las influencias y los efectos de diversas citocinas y factores ambientales sobre la función de los macrófagos y las respuestas inmunitarias [3,4].
Osteoclastogénesis y remodelación ósea
Aunque no son osteoclastos en sí mismas, las células RAW 264.7 han sido fundamentales para estudiar la osteoclastogénesis, es decir, el proceso de formación de los osteoclastos. Estas células facilitan la exploración de la expresión génica osteoclástica y su capacidad de respuesta a la activación de los receptores. Esta investigación tiene profundas implicaciones para comprender la fisiopatología de afecciones como la osteoporosis, en la que la desregulación de la remodelación ósea es un rasgo característico.
Información sobre el cultivo celular de RAW 264.7
Antes de comenzar tus experimentos, debes conocer algunos datos básicos sobre esta potente línea celular. ¿Sabes cuál es el tiempo de duplicación de las células RAW 264.7? ¿Cuál es la densidad de siembra de estas células? ¿Son adherentes? Además, ¿cuáles son las condiciones óptimas de crecimiento para la línea celular RAW 264.7? ¡Sigue leyendo para descubrir todas las respuestas que necesitas para trabajar con esta increíble línea celular!
Información sobre el cultivo celular
Línea celular RAW 264.7
Tiempo de duplicación de la población
De 11 a 30 horas
Adherentes o en suspensión
Principalmente adherente, con algunas poblaciones de células en suspensión
Densidad de siembra
4 x 10⁴ células/cm²
Medio de cultivo recomendado
RPMI 1640 suplementado con 10 % de suero fetal bovino y L-glutamina (2,5 mM)
Condiciones óptimas de crecimiento
Incubadora humidificada con 5 % de CO₂ y una temperatura de 37 °C
Reemplazo del medio
De 2 a 3 veces por semana
Almacenamiento
Fase de vapor de nitrógeno líquido
CM-1 o CM-ACF
Proceso de congelación
Congelación lenta
Proceso de descongelación
Agitación rápida en baño de agua a 37 °C
Nivel de bioseguridad
Se recomienda un laboratorio de nivel BSL-2
Macrófagos murinos RAW 264.7 con diferentes grados de confluencia.
Ventajas y desventajas de las celdas RAW 264.7
Ventajas
- Fácil cultivo: La línea celular RAW 264.7 es fácil de cultivar y mantener en el laboratorio sin requisitos complicados.
- Bien caracterizada: RAW 264.7 es una línea celular bien caracterizada, lo que significa que presenta características fenotípicas y funcionales estables.
- Modelo in vitro de macrófagos: Dado que las células RAW 264.7 son macrófagos, exhiben funciones esenciales propias de los macrófagos, como la fagocitosis y la pinocitosis. Por lo tanto, se utilizan con frecuencia como modelo in vitro de macrófagos.
- Diferenciación en osteoclastos: Las células RAW 264.7 pueden diferenciarse en osteoclastos mediante factores moleculares específicos. Estas células diferenciadas son capaces de llevar a cabo la remodelación ósea, de manera similar a los osteoclastos.
Desventajas
- Representación deficiente de los macrófagos primarios: Al tratarse de una línea celular transformada, es posible que la línea RAW 264.7 no represente con precisión las características de los macrófagos primarios y que presente algunas diferencias en la expresión génica, el fenotipo y la función.
- Limitaciones en el cribado de fármacos: Es posible que las células RAW 264.7 no sean adecuadas para todos los tipos de ensayos de cribado de fármacos, y sus respuestas a algunos fármacos pueden diferir de las de los macrófagos primarios.
- Fuerte adhesión celular: Las células RAW 264.7 se adhieren fuertemente a la superficie del frasco de cultivo y, en ocasiones, pueden ser difíciles de desprender.
Aplicaciones de las células RAW 264.7 en la simulación de macrófagos y en estudios inmunológicos
Modelado de respuestas inmunológicas celulares
La línea celular RAW 264.7, que refleja las funcionalidades de los macrófagos auténticos, es un modelo clave para la investigación de las respuestas celulares ante patógenos y estímulos inmunológicos. Un estudio que destaca este aspecto evaluó los efectos inmunomoduladores y antioxidantes de las bacterias del ácido láctico muertas por calor en estas células, lo que proporcionó hallazgos significativos en la regulación del sistema inmunológico [5 ].
Como complemento a esto, una investigación realizada en 2019 esclareció el impacto inmunológico de la exposición de las células RAW 264.7 a polisacáridos de la planta Polygonatum sibiricum. El estudio concluyó que estos compuestos desencadenan una respuesta inmunitaria mediante la activación de las vías de señalización NF-κB/MAPK, lo que ofrece una comprensión molecular profunda [6].
Exploración de la osteoclastogénesis
Al funcionar como un modelo sustituto para los estudios de diferenciación de osteoclastos, las células RAW 264.7 contribuyen a esclarecer el comportamiento de los osteoclastos y las vías de diferenciación. Dicha investigación amplía nuestro conocimiento sobre los mecanismos de resorción ósea y la patogénesis de la osteoporosis. A menudo se utilizan técnicas avanzadas de imagen para monitorear los cambios intracelulares y analizar el metabolismo del hemo dentro de estas células.
Obtención de conocimientos moleculares sobre la osteoclastogénesis
A pesar de su función principal como modelo de macrófagos, las células RAW 264.7 también se emplean para la investigación in vitro de la osteoclastogénesis. Al inducir características similares a las de los osteoclastos en estas células, los investigadores obtienen información sobre el proceso de diferenciación y el comportamiento de los preosteoclastos, aunque es fundamental tener en cuenta las características inherentes y el origen de la línea celular en estos estudios.
Cribado de la bioactividad de productos naturales
El cribado de la bioactividad en productos naturales es otra aplicación en la que las células RAW 264.7 se destacan. Por ejemplo, su uso en un estudio coreano que investigó las propiedades inmunoestimulantes de una mezcla de hierbas demostró la eficacia de la línea celular para identificar compuestos bioactivos en sustancias naturales [7 ].
Impulsa tu investigación con nuestras células RAW 264.7
Publicaciones de investigación que utilizan células RAW 264.7
Existen numerosas publicaciones de investigación sobre la línea celular de macrófagos de ratón RAW 264.7:
- Los polisacáridos de Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute inducen una respuesta inmunitaria en la línea celular RAW 264.7 a través de la vía NF-κB/MAPK: Este estudio propuso que los polisacáridos obtenidos de la planta Polygonatum sibiricum pueden desencadenar una respuesta inmunitaria en la línea celular de macrófagos de ratón RAW 264.7 mediante la regulación de la cascada de señalización NF-κB/MAPK.
- Efectos inmunomoduladores del extracto de Tinospora crispa y sus compuestos principales sobre las funciones inmunitarias de los macrófagos RAW 264.7: Este artículo, publicado en la revista International Immunopharmacology, describe que el extracto de la planta Tinospora crispa y sus componentes principales tienen un efecto inmunomodulador e inmunoestimulante sobre la línea celular de macrófagos RAW 264.7.
- Las bacterias del ácido láctico inactivadas por calor inhiben la producción de óxido nítrico a través de la óxido nítrico sintasa inducible y la ciclooxigenasa-2 en las células RAW 264.7: Este estudio propuso que las bacterias del ácido láctico inactivadas por calor podrían utilizarse en la síntesis de productos probióticos, ya que poseen propiedades inmunomoduladoras y antioxidantes. Los investigadores utilizaron células RAW 264.7 para estudiar estas actividades biológicas.
- Efecto de una fórmula a base de hierbas en la potenciación de la respuesta inmunitaria en macrófagos RAW 264.7: Este estudio utilizó células RAW 264.7 para analizar el efecto inmunoestimulante de una fórmula a base de hierbas denominada KM1608. El estudio sugirió que KM1608 podría ser un agente potenciador de la respuesta inmunitaria.
- Un análisis de las plantas utilizadas en la medicina tradicional colombiana reveló el potencial antiinflamatorio de los cálices de Physalis angulata: Este artículo, publicado en el Saudi Journal of Biological Sciences, investigó el potencial antiinflamatorio de 10 plantas tradicionales colombianas de uso común utilizando células RAW 264.7 estimuladas con LPS.
Células RAW 264.7: recursos, protocolos, videos y más
Las células RAW 264.7 se utilizan con frecuencia en estudios de transfección. Los siguientes recursos explican los diferentes métodos de transfección utilizados para la línea celular RAW 264.7.
- Transfección de células RAW 264.7: Este sitio web ofrece un protocolo para la transfección de macrófagos RAW 264.7 utilizando un reactivo de lipofectamina.
- Protocolo de transfección: Este artículo publicado describe un protocolo detallado para la transfección de células RAW 264.7.
- Método eficaz de transfección para las células RAW 264.7: Este documento describe otro enfoque práctico de transfección utilizando células RAW 264.7.
Videos relacionados con la línea celular RAW 264.7
- Cultivo de células RAW 264.7: Este video explica el protocolo de pases de las células RAW 264.7.
- Método de transfección: Este video trata sobre la transfección de células RAW 264.7 con un gen reportero.
Preguntas frecuentes esenciales sobre la línea celular RAW 264.7: información sobre la investigación en mimetismo de macrófagos y osteoclastogénesis
La línea celular RAW 264.7 se obtuvo a partir del ascitis de un tumor inducido por el virus de la leucemia murina de Abelson (A-MuLV) en un ratón BALB/c macho.
Las células RAW 264.7 se utilizan como modelo de macrófagos debido a su capacidad para realizar funciones clave, como la fagocitosis y la pinocitosis, que son indicativas de respuestas inmunitarias innatas.
Sí, aunque las células RAW 264.7 no son osteoclastos, pueden utilizarse para estudiar el proceso de osteoclastogénesis y la expresión génica osteoclastogénica, lo cual contribuye a nuestra comprensión de la salud ósea y de enfermedades como la osteoporosis.
Las células RAW 264.7 responden a los estímulos microbianos imitando las respuestas de los macrófagos, lo que las convierte en ideales para estudiar las interacciones entre el huésped y el patógeno, así como las respuestas celulares ante diversos sistemas biológicos.
La producción de citocinas en las células RAW 264.7 es fundamental para comprender el proceso inflamatorio y las vías de señalización celular involucradas en las respuestas inmunitarias, como las vías NF-κB/MAPK.
No, las células RAW 264.7 no son células primarias; son una línea celular inmortalizada. Las células primarias son aquellas que se extraen directamente de tejido vivo y tienen una vida útil limitada en cultivo.
Las células RAW 264.7 se cultivan en medios específicos que favorecen su crecimiento y se mantienen bajo condiciones controladas de temperatura y atmósfera para garantizar su estabilidad funcional para su uso experimental.
Las células RAW 264.7, en su estado basal (M0), pueden polarizarse para mostrar propiedades proinflamatorias similares a las de las células M1 o propiedades antiinflamatorias similares a las de las células M2, dependiendo de los estímulos a los que se expongan en el cultivo.
Sí, las células RAW 264.7 se utilizan con frecuencia para evaluar la bioactividad de los productos naturales, incluidos los compuestos de origen vegetal, en cuanto a sus posibles efectos inmunomoduladores o terapéuticos.
Entre los marcadores típicos se encuentran el F4/80 y el CD11b, que se utilizan habitualmente para confirmar el fenotipo similar al de los macrófagos de las células RAW 264.7, junto con sus marcadores funcionales, como la fosfatasa ácida resistente y la actividad fagocítica.
Referencias
- Taciak, B., et al., Evaluación de la estabilidad fenotípica y funcional de la línea celular RAW 264.7 a través de pases seriados. PloS one, 2018. 13(6): p. e0198943.
- Wang, S., et al., Los macrófagos inflamatorios interrumpen la maduración y mineralización de los osteocitos mediante la regulación de la vía de señalización Notch. Molecular Medicine, 2022. 28(1): p. 102.
- Orekhov, A.N., et al., Diferenciación de monocitos y polarización de macrófagos. Vessel Plus, 2019. 3: p. 10.
- Khabipov, A., et al., «Polarización de los macrófagos RAW 264.7 por células de cáncer de páncreas: un modelo para estudiar los macrófagos promotores de tumores». Anticancer Research, 2019. 39(6): p. 2871-2882.
- Kang, C.-H., et al., Las bacterias del ácido láctico inactivadas por calor inhiben la producción de óxido nítrico a través de la sintasa de óxido nítrico inducible y la ciclooxigenasa-2 en las células RAW 264.7. Probiotics and Antimicrobial Proteins, 2021. 13(6): p. 1530-1538.
- Zhang, J., et al., Los polisacáridos de Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute inducen una respuesta inmunitaria en la línea celular RAW264.7 a través de una vía NF-κB/MAPK. RSC Advances, 2019. 9(31): p. 17988-17994.
- Trinh, T.A., et al., Efecto de una formulación a base de hierbas en la potenciación de la respuesta inmunitaria en los macrófagos RAW 264.7. Biomolecules, 2020. 10(3): p. 424.