A375-GFP

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

USD 800.00*

Los productos se envían congelados en hielo seco dentro de criotubos. Cada criotubo suele contener 3 × 10^⁶ células en el caso de las líneas adherentes o 5 × 10^⁶ células en el caso de las líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).

Los precios no incluyen impuestos ni gastos de envío

cryovial

Número de producto: 305665

Ficha de datos de seguridad

Ficha del producto

Certificado de análisis (CoA)

Descripción	A375-GFP es una variante modificada genéticamente de la línea celular A375 de melanoma maligno humano, que expresa de manera estable la proteína fluorescente verde mejorada (eGFP). La línea celular parental A375 se deriva de un tumor de melanoma cutáneo en un paciente adulto y se utiliza ampliamente como modelo para el melanoma cutáneo, particularmente para estudios relacionados con la señalización oncogénica de BRAF, ya que presenta la mutación BRAF V600E. Esta mutación conduce a la activación constitutiva de la vía MAPK/ERK, lo que impulsa la proliferación y la supervivencia, y hace que las células A375 sean altamente relevantes para investigar terapias dirigidas, tales como los inhibidores de BRAF y MEK. La variante que expresa GFP conserva estas características moleculares y fenotípicas, al tiempo que permite aplicaciones basadas en la fluorescencia. La incorporación estable del reportero eGFP permite la visualización en tiempo real de las células A375-GFP tanto en sistemas in vitro como in vivo. Las imágenes de fluorescencia facilitan el monitoreo de la proliferación, migración, invasión y cambios morfológicos de las células, así como el seguimiento del crecimiento tumoral y la diseminación metastásica en modelos de xenoinjertos. La variante mejorada de GFP ofrece mayor brillo y estabilidad en comparación con construcciones anteriores de GFP, lo que permite una detección sensible incluso con un número reducido de células. Esto hace que A375-GFP sea particularmente útil en experimentos de cocultivo, plataformas de imágenes de alto contenido y estudios que requieren una resolución espacial precisa del comportamiento de las células tumorales. La línea A375-GFP conserva el fenotipo agresivo y proliferativo de la línea parental de melanoma, incluida la respuesta a los inhibidores de la vía MAPK y la capacidad de invasión y metástasis en modelos experimentales. La incorporación de la GFP amplía su utilidad para el cribado de fármacos, la obtención de imágenes de células vivas y los estudios de interacción entre el tumor y el microambiente. Al igual que con otras líneas celulares marcadas con reporteros, se recomienda validar la estabilidad y consistencia de la fluorescencia a lo largo de los pases para aplicaciones experimentales específicas. Modificación genética: Modificada de manera estable mediante transducción lentiviral incompetente para la replicación a fin de expresar el reportero de proteína fluorescente verde ZsGreen1; se mantiene como una población policlonal bajo selección con puromicina (1–5 µg/mL). Contención S1/BSL-1.
Organismo	Humano
Tejido	Pierna, piel
Enfermedad	Melanoma amelanótico

Edad	54 años
Género	Mujer
Origen étnico	caucásico
Propiedades de crecimiento	Adherente

Referencia	A375-GFP (número de catálogo de Cytion: 305665)
Nivel de bioseguridad	1
NCBI_TaxID	9606
N.º de acceso de Cellosaurus	CVCL_QZ67
Estado de los OGM	GMO-S1: Esta línea celular contiene un reportero de proteína fluorescente verde ZsGreen1 integrado de manera estable, introducido mediante transducción con un lentivirus incompetente para la replicación. La población celular policlonal resultante se mantuvo bajo selección con puromicina (1–5 µg/mL). Se requiere contención de nivel S1. Esta clasificación se aplica únicamente en Alemania y puede variar en otros lugares.

Expresión de antígenos	ZsGreen1 (proteína fluorescente verde)
Perfil mutacional	Mutación: BRAF, simple, p.Val600Glu (c.1799T>A), homocigótica (procedente de la línea celular parental).Mutación, CDKN2A, simple, p.Glu61Ter (c.181G>T) (p.Gly75Val, c.224G>T), homocigótica (procedente de la línea celular parental).Mutación, CDKN2A, simple, p.Glu69Ter (c.205G>T) (p.Gly83Val, c.248G>T), homocigótica (procedente de la línea celular parental).Mutación, TERT, simple, c.1-146C>T (c.250C>T) (C250T), no especificada, nota = en el promotor (procedente de la línea celular parental).

Medio de cultivo	DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
Suplementos	Añade al medio un 10 % de FBS
Reactivo de disociación	Accutase
Subcultivo	Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra	De 1 a 3 × 10^⁴ ^células/cm^²
Renovación de fluidos	De 2 a 3 veces por semana
Medio de congelación	Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo con un 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación.
Descongelación y cultivo de células	Verifique que el vial se mantenga profundamente congelado al momento de la entrega, ya que las células se envían en hielo seco para mantener temperaturas óptimas durante el transporte. Al recibirlo, almacene el criovial inmediatamente a temperaturas inferiores a -150 °C para garantizar la preservación de la integridad celular, o bien continúe con el paso 3 si se requiere un cultivo inmediato. Para el cultivo inmediato, descongele rápidamente el vial sumergiéndolo en un baño de agua a 37 °C con agua limpia y un agente antimicrobiano, agitando suavemente durante 40 a 60 segundos hasta que quede un pequeño trozo de hielo. Realice todos los pasos posteriores en condiciones estériles bajo una cabina de flujo laminar, desinfectando el criovial con etanol al 70 % antes de abrirlo. Abra con cuidado el vial desinfectado y transfiera la suspensión celular a un tubo de centrífuga de 15 ml que contenga 8 ml de medio de cultivo a temperatura ambiente, mezclando suavemente. Centrifugue la mezcla a 200 x g durante 5 minutos; deseche con cuidado el sobrenadante que contiene el medio de congelación. Siga el procedimiento descrito en la sección «Recuperación posterior a la descongelación»
Atmósfera de incubación	37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
Condiciones de envío	Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
Condiciones de almacenamiento	Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Número de lote	Tipo de certificado	Fecha	Número de catálogo
305665-200426	Certificado de análisis	24. Jun. 2026	305665

A375-GFP

Información general

Características

Datos normativos

Datos biomoleculares

Manejo

Control de calidad y análisis molecular

Certificado de análisis (CoA)