Клітини SiHa — новий погляд на дослідження раку шийки матки

Клітини SiHa — це клітини раку шийки матки, які широко використовуються в біомедичних дослідженнях. Вони є чудовими господарями для трансфекції, а отже, підходять для досліджень експресії генів. Завдяки своєму людському походженню та зв’язку з раком шийки матки ці клітини переважно застосовуються в дослідженнях з біології раку, вірусології та розробки лікарських засобів.

📋 Клітинна лінія SiHa — короткі факти

Середовище для культивування: Для оптимального росту клітин SiHa використовується мінімальне есенційне середовище Ігл (EMEM), що містить 10 % FBS, 2 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO₃ та збалансований сольовий розчин Ерла (EBSS). Середовище замінюють 2–3 рази на тиждень.
Час подвоєння: Час подвоєння клітин SiHa становить приблизно 17 годин.
Тип росту: SiHa — це адгезивна клітинна лінія.
Рівень біобезпеки: BSL-1
Доступно у: Cytion — Замовити SiHa

Загальні характеристики та походження клітин SiHa

Розуміння походження та загальних характеристик клітинної лінії має вирішальне значення, оскільки це впливає на її використання у ваших дослідженнях. У цьому розділі статті ви дізнаєтеся про походження клітинної лінії SiHa, її характерні особливості та багато іншого: Що таке лінія ракових клітин SiHa? Які клітини SiHa пов’язані з ВПЛ? Яке походження клітинної лінії SiHa? Яка морфологія клітин SiHa?

Клітинна лінія SiHa, що представляє карциному шийки матки, була отримана з фрагментів первинної біопсії матки азіатської жінки (55 років) з плоскоклітинним раком [1].
Клітинна лінія SiHa має гіпертриплоїдний каріотип. Більшість клітин мають середню кількість хромосом від 69 до 72. Однак приблизно 24 % клітин мають модальну кількість хромосом, що становить 71.
Клітини SiHa є позитивними щодо вірусу папіломи людини типу 16. У них спостерігається інтеграція приблизно 1–2 копій геному ВПЛ на клітину [2].
Ці клітини раку шийки матки мають епітеліальну морфологію.

Ділення клітин раку шийки матки HeLa під мікроскопом.

Клітинна лінія SiHa: інформація щодо культивування

Підтримувати культуру клітинної лінії непросто, доки ви не знаєте всіх ключових моментів її культивування. Вам слід знати: який час подвоєння клітин SiHa? Що таке середовище для культивування клітин SiHa? Як культивувати клітинну лінію SiHa?

Ключові моменти культивування клітин SiHa

Час подвоєння:: Час подвоєння клітин SiHa становить приблизно 17 годин.
Адгезивні або у суспензії:: SiHa — це адгезивна клітинна лінія.
Коефіцієнт субкультури:: Коефіцієнт субкультувації клітин SiHa становить від 1:2 до 1:4. Для пасажування адгезивні клітини промивають 1x PBS. Додають розчин Accutase, і клітини інкубують протягом 8–10 хвилин при кімнатній температурі. Далі додають культуральне середовище, а клітини центрифугують. Осад клітин ресуспендують, а клітини переносять у нову колбу для культивування.
Середовище для росту:: Для оптимального росту клітин SiHa використовують мінімальне есенційне середовище Ігл (EMEM), що містить 10 % FBS, 2 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO₃ та збалансований сольовий розчин Ерла (EBSS). Середовище замінюють 2–3 рази на тиждень.
Умови культивування:: Клітини SiHa утримують у зволоженому інкубаторі при температурі 37 °C з подачею 5 % CO₂.
Зберігання:: Заморожені пробірки з клітинною лінією SiHa раку шийки матки зберігаються при температурі нижче -150 °C в електричній морозильній камері або в паровій фазі рідкого азоту для тривалого зберігання.
Процес заморожування та середовище:: Для заморожування клітин SiHa використовують заморожувальне середовище CM-1 або CM-ACF. Клітини заморожують методом повільного заморожування, що забезпечує зниження температури лише на 1 °C за хвилину, щоб зберегти життєздатність клітин.
Процес розморожування:: Заморожені клітини утримують протягом 40–60 секунд у водяній бані з температурою 37 °C, доки не залишиться невеликий шматок льоду. Після цього додають свіже живильне середовище, а клітини центрифугують для видалення компонентів середовища для заморожування. Осад клітин ресуспендують, а клітини переносять у культуральну колбу для вирощування.
Рівень біобезпеки:: Для роботи з культурами клітин SiHa та їх утримання необхідна лабораторія рівня біобезпеки 1.

Siha cells

Шар прикріплених клітин SiHa при 10-кратному та 20-кратному збільшенні.

Переваги та недоліки клітинної лінії SiHa

Як і інші клітинні лінії карциноми людини, SiHa також має деякі характерні особливості, пов’язані з певними перевагами та недоліками. У цій статті ми розглянули кілька найважливіших із них.

Переваги клітинної лінії SiHa раку шийки матки

Модель раку шийки матки
- Отримана з плоскоклітинного раку шийки матки.
- Використовується для вивчення механізмів, росту та розвитку раку шийки матки.
- Експресує гени p53+ та pRB+, які пов’язані з репарацією ДНК, регуляцією клітинного циклу та пригніченням пухлин.
Онкогенний потенціал
- Клітини SiHa є пухлиногенними та можуть індукувати слабкодиференційовані епідермоїдні пухлини III ступеня у голих мишей.
- Використовуються для досліджень раку in vivo та тестування методів лікування раку.

Недоліки клітин SiHa

Швидкість проліферації
- Клітини SiHa швидко проліферують, що призводить до надмірного росту.
- Вимагають частого пасажування, що підвищує ризик генетичної нестабільності, яка з часом може вплинути на поведінку клітин.

Дослідницькі застосування клітинних ліній SiHa

Клітинна лінія SiHa широко використовується в дослідженнях раку шийки матки. Нижче розглядаються деякі конкретні застосування цієї клітинної лінії.

Дослідження, пов’язані з вірусом папіломи людини (ВПЛ): Клітини SiHa є ВПЛ-16-позитивними, тому вони є цінним матеріалом для вивчення інфекції вірусом папіломи людини, її молекулярних механізмів та ролі у розвитку й прогресуванні раку шийки матки. Дослідники також використовують ці клітини для вивчення реплікації вірусу, його інтеграції та впливу на процеси в клітинах-господарях. У дослідженні, проведеному у 2020 році, клітинну лінію SiHa використовували для вивчення ролі онкопротеїнів E6/E7 ВПЛ у розвитку раку шийки матки шляхом їх інгібування за допомогою технології CRISPR. Результати показали, що інгібування експресії генів E6/E7 призводило до пригнічення росту клітин SiHa та їх апоптозу. Отже, ці вірусні гени можуть слугувати важливими мішенями для розробки терапій проти раку шийки матки, пов’язаного з ВПЛ [3].
Біологія раку: клітини SiHa є безцінною моделлю для вивчення біології раку шийки матки, зокрема розвитку раку, його прогресування, метастазування та інвазії. Дослідники використовують ці клітини для вивчення генетичних мутацій та основних молекулярних шляхів, що сприяють розвитку та росту раку шийки матки; наприклад, у одному дослідженні, в якому використовувалися клітини SiHa, було виявлено, що підвищений рівень експресії SEC61G (гамма-субодиниця транслокону SEC61) стимулює проліферацію клітин раку шийки матки шляхом активації каскаду MAPK [4].
Скринінг та тестування лікарських засобів: SiHa — це широко використовувана клітинна лінія раку шийки матки для оцінки ефективності потенційних протиракових препаратів, спрямованих саме на рак шийки матки, асоційований з ВПЛ. Дослідники вивчають антипроліферативний, апоптотичний та антиметастатичний потенціал лікарських засобів за допомогою цих клітин. Наприклад, у дослідженні, проведеному в 2019 році, вивчався цитотоксичний потенціал екстрактів плодів Vatica diospyroides Symington Type SS на клітинній лінії раку шийки матки SiHa [5].

Клітини SiHa для ваших досліджень!

430,00 EUR*

Вміст: 1.5 milliliter

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 305023

Наукові публікації, присвячені клітинам SiHa

Деякі важливі та часто цитовані наукові публікації присвячені клітинній лінії SiHa плоскоклітинного раку шийки матки.

Протипухлинна дія алое-емодину на клітини раку шийки матки пов’язана з вірусом папіломи людини E6/E7 та метаболізмом глюкози

У цій публікації в журналі «OncoTargets and Therapy» (2019) висунуто гіпотезу, що природна сполука алое-емодин чинить апоптотичну дію на клітини раку шийки матки SiHa, пов’язану з генами E6/E7 вірусу папіломи людини (ВПЛ) та метаболізмом глюкози.

Оцінка протиракового потенціалу екстракту листя Excoecaria agallocha (L.) щодо клітинної лінії раку шийки матки людини (SiHa) та аналіз механізму дії

Ця стаття була опублікована в журналі «Future Journal of Pharmaceutical Sciences» у 2022 році. У цьому дослідженні вивчалася протипухлинна активність екстракту листя рослини Excoecaria agallocha (L.) на клітинній лінії раку шийки матки SiHa.

Антипроліферативний ефект 1,10-фенантроліну, з'єднаного з сульфатованими наночастинками ZnO, на клітинній лінії раку шийки матки SiHa

У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Journal of Sol-Gel Science and Technology» (2022), було висунуто гіпотезу, що молекула 1,10-фенантроліну після зв’язування з наночастинками сульфату цинку чинить значний антипроліферативний ефект на клітини SiHa.

Астрагалозид IV пригнічує інвазію та метастазування клітин раку шийки матки SiHa через опосередковані TGF‑β1 шляхи PI3K та MAPK

Це дослідження було опубліковано в журналі «Oncology Reports» у 2019 році. Дослідження показало, що астрагалозид IV, природний продукт, пригнічує міграцію та інвазію клітин SiHa шляхом модуляції сигнальних шляхів PI3K та MAPK, опосередкованих TGF‑β1.

IFI16 сприяє прогресуванню раку шийки матки шляхом підвищення експресії PD-L1 в імуномікросередовищі через шлях STING-TBK1-NF-kB

Це дослідження, опубліковане в журналі «Biomedicine & Pharmacotherapy» (2020), показало, що IFI16 (інтерферон-гамма-індукований білок 16) регулює експресію гена PD-L1 шляхом активації сигнального шляху STING-TBK1-NF-kB, сприяючи росту клітин раку шийки матки SiHa.

Ресурси щодо клітинної лінії SiHa: протоколи, відео та інше

Ось кілька онлайн-ресурсів, присвячених клітинам SiHa.

Трансфекція клітин SiHa: Ця наукова стаття містить протокол культивування клітин раку шийки матки SiHa та протокол їх трансфекції.

За наступним посиланням наведено інформацію щодо культивування клітин SiHa.

Клітинна лінія SiHa: Цей веб-сайт містить багато цінних даних про клітинну лінію SiHa. Сюди входить інформація про живильні середовища, умови культивування, протоколи субкультивування клітин SiHa та роботи з їх проліферативними та кріоконсервованими культурами.

Поширені запитання щодо клітин раку шийки матки SiHa

Література

Melzer, C., J. von der Ohe та R. Hass, Короткий огляд: взаємодія мезенхімальних стромальних/стволоподібних клітин з раковими клітинами відкриває терапевтичний потенціал. Stem cells, 2018. 36(7): с. 951–968.
Островська, К. М. та ін., Дослідження впливу вірусу папіломи людини високого ризику на біохімічний склад клітин раку шийки матки з використанням вібраційної спектроскопії. Analyst, 2010. 135(12): с. 3087–3093.
Чен, Ю., та ін., Пригнічення росту клітин раку шийки матки людини in vitro та in vivo шляхом розщеплення мРНК E6/E7 вірусу папіломи людини за допомогою системи CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178: с. 104794.
Фан, Ю., та ін., SEC61G сприяє проліферації раку шийки матки шляхом активації сигнального шляху MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
Чотхіпірат, А. та ін., Протипухлинний потенціал фруктових екстрактів з Vatica diospyroides типу Сімінгтона SS та їхній вплив на програмовану клітинну смерть клітинних ліній раку шийки матки. The Scientific World Journal, 2019. 2019.