Клітини RBL-2H3 — значення RBL-2H3 в алергічній реакції та імунологічних дослідженнях
Клітинна лінія RBL-2H3 — це лінія клітин базофільної лейкемії щурів, яка використовується в імунологічних дослідженнях. Вона слугує модельною системою для вивчення фізіології, поведінки та функцій тучних клітин. Ці клітини також застосовуються для дослідження алергічних реакцій, імунологічних процесів, а також для тестування та розробки лікарських засобів.
- Середовище для культивування
- Для культивування клітин RBL-2H3 використовується середовище EMEM, що містить 10 % FBS, 2 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO₃ та сіль EBSS. Середовище слід замінювати 2–3 рази на тиждень.
- Час подвоєння
- Час подвоєння кількості тучних клітин RBL-2H3 становить приблизно 50–60 годин.
- Тип росту
- RBL-2H3 — це адгезивна клітинна лінія.
- Рівень біобезпеки
- BSL-2
- Наявна у
- Cytion — Замовити RBL-2H3
- Клітини RBL-2H3: походження та загальні характеристики
- Клітини RBL-2H3: інформація щодо культивування
- Переваги та обмеження лінії базофільних клітин RBL-2H3
- Клітинна лінія RBL-2H3: наріжний камінь імунологічних досліджень
- Клітинна лінія RBL-2H3: найважливіші питання та відповіді для дослідників
- Література
- Клітинна лінія RBL-2H3 для передових імунологічних досліджень
- Клітини RBL-2H3: наукові публікації
- Ресурси щодо клітинної лінії RBL-2H3: протоколи, відео та інше
- Поширені запитання
Клітини RBL-2H3: походження та загальні характеристики
Перш ніж використовувати лінію базофільних клітин у своїх дослідженнях, слід ознайомитися з її походженням та загальними характеристиками. У цьому розділі статті ви дізнаєтеся про основні відомості щодо клітин RBL-2H3. Наприклад: що таке мастоцити RBL-2H3? Чому варто використовувати клітини RBL-2H3? Що таке клітини RBL-2H3 у базофільній лейкемії щурів? Яка морфологія клітин RBL-2H3? Чи є клітини RBL-2H3 безсмертними?
- RBL-2H3 — це клітини базофільної лейкемії, отримані з базофільних клітин щурів породи Вістар у 1978 році в Лабораторії імунології Національного інституту стоматологічних досліджень.
- Клітини RBL-2H3 мають рецептор тирозинкінази c-kit та рецептори протеази II тучних клітин (RMCP-II), що робить їх потенційною моделлю тучних клітин. Тому їх зазвичай називають тучними клітинами, незважаючи на те, що вони походять від базофілів щурів [1].
- При активації вони виділяють гістамін та інші медіатори й експресують високоафінні рецептори IgE.
- Клітини RBL-2H3 мають фібробластоподібну морфологію.
Клітини RBL-2H3: інформація щодо культивування
Цей розділ допоможе вам ознайомитися з деякими ключовими аспектами культивування клітинної лінії RBL-2H3. Ви дізнаєтеся: Який час подвоєння клітин RBL-2H3? Яка щільність висівання клітин RBL-2H3? Який протокол культивування клітин RBL-2H3? Яке середовище використовується для заморожування клітинної лінії RBL-2H3?
Ключові моменти культивування клітин RBL-2H3
Час подвоєння популяції:
Час подвоєння кількості тучних клітин RBL-2H3 становить приблизно 50–60 годин.
Адгезивні або у суспензії:
RBL-2H3 — це адгезивна клітинна лінія.
Коефіцієнт поділу:
Для клітин RBL-2H3 коефіцієнт поділу підтримується в межах від 1:2 до 1:4. Адгезивні клітини промивають розчином 1×PBS без магнію та кальцію. До розчину для пасажування додають Accutase, після чого клітини витримують при кімнатній температурі протягом 10 хвилин для відшарування від дна культуральної посудини. Додають свіже середовище, а клітини центрифугують. Зібрані клітини обережно ресуспендують у свіжому середовищі та переносять у нові колби, що містять середовище для росту.
Середовище для росту:
Для культивування клітин RBL-2H3 використовують середовище EMEM, що містить 10 % FBS, 2 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO₃ та сіль EBSS. Середовище слід замінювати 2–3 рази на тиждень.
Умови культивування:
Клітини RBL-2H3 культивують у зволоженому інкубаторі, налаштованому на температуру 37 °C та підключеному до джерела 5% CO₂.
Зберігання:
Клітини зберігають у паровій фазі рідкого азоту або при температурі нижче -150 °C в електричній морозильній камері для забезпечення їх життєздатності протягом тривалого часу.
Процес заморожування та середовище:
Для заморожування клітин RBL-2H3 методом повільного заморожування використовують середовища CM-1 або CM-ACF. Коротко кажучи, цей метод дозволяє знижувати температуру на 1 °C за хвилину та захищає клітини від температурного шоку.
Процес розморожування:
Клітини RBL-2H3 розморожують у заздалегідь нагрітій водяній бані (37 °C) протягом приблизно 60 секунд. Після цього клітини додають до свіжого культурального середовища та центрифугують. Цей крок є необхідним для видалення компонентів середовища для заморожування. Далі осад клітин ресуспендують у середовищі для росту, а клітини переносять у колбу для культивування.
Рівень біобезпеки:
Клітини RBL-2H3 слід утримувати в лабораторіях біобезпеки 1-го рівня.
Опубліковано: 2023 | Останній перегляд: травень 2026
Переваги та обмеження клітинної лінії базофілів RBL-2H3
Клітини RBL-2H3 широко використовуються в імунологічних дослідженнях. У цьому розділі викладено їхні основні переваги та обмеження.
Переваги
- Простота культивування: Клітини RBL-2H3 легко культивувати та підтримувати в лабораторних умовах. Це сприяє проведенню економічно ефективних та відтворюваних експериментів, що робить їх популярним вибором для початкових досліджень в імунології.
Обмеження
- Нелюдське походження: оскільки клітини RBL-2H3 походять від базофілів щурів, вони можуть неточно імітувати біологічні процеси людини, що може обмежувати їхню застосовність у дослідженнях, орієнтованих саме на людину. Це вимагає обережної інтерпретації даних під час екстраполяції результатів на людські системи.
- Спрощена модель тучних клітин: Хоча ці клітини є базовою моделлю для вивчення функцій тучних клітин, вони не повністю відображають складну природу взаємодій тучних клітин у імунній системі людини. Відповідно, вони можуть не адекватно моделювати багатогранні ролі тучних клітин в імунних реакціях або при захворюваннях in vivo.
Клітинна лінія RBL-2H3: наріжний камінь імунологічних досліджень
Дослідження базофілів та тучних клітин із використанням клітинної лінії RBL-2H3
Клітинна лінія RBL-2H3, отримана з Rattus norvegicus, слугує ключовою моделлю для вивчення біології базофілів та тучних клітин. Ці тучні клітини щурів дають важливі уявлення про вивільнення медіаторів тучними клітинами, що має вирішальне значення для розуміння алергічних станів, таких як алергічний риніт. За допомогою цих клітин дослідники вивчають динаміку клітинних рецепторів та формування імунологічних синапсів, які відіграють центральну роль у реакції імунної системи на алергени. У цікавому дослідженні, опублікованому у 2019 році, було використано клітинну лінію RBL-2H3 для вивчення механізмів, що лежать в основі псевдоалергічних реакцій, спричинених ін’єкцією препарату «Цінкайлін». Дослідження показало, що сигнальний каскад PI3K-RAC1 частково викликає цю алергічну реакцію в клітинах [2].
Динаміка імунологічних синапсів у дослідженнях алергії
Клітини RBL-2H3, які широко використовуються в імунологічних дослідженнях, є особливо ефективними для вивчення динаміки імунологічних синапсів. Це допомагає з’ясувати процеси комунікації в імунній системі, що знаходить застосування у вивченні як периферичних, так і перитонеальних тучних клітин. Такі дослідження мають вирішальне значення для всебічного розуміння імунної реакції як у системному, так і в локалізованому контексті.
Скринінг лікарських засобів та тестування на токсичність
Під час скринінгу та тестування лікарських засобів використовується чутливість клітин RBL до різних подразників, зокрема для вивчення того, як H₂O₂ пригнічує IgE-опосередковані реакції. Ці клітини відіграють важливу роль у розробці методів лікування таких захворювань, як стрептококові інфекції, при яких стрептококи групи mitis пригнічують активацію тучних клітин. Крім того, дослідники оцінюють токсичні ефекти різних речовин, зокрема хімікатів, лікарських препаратів та наночастинок, використовуючи цю модель RBL 2H3 mc. Наприклад, у недавньому дослідженні (2022) оцінювали цитотоксичність мікропластику з полістиролу на клітинах RBL-2H3. Вчені виявили, що мікропластик пошкоджує органели клітин RBL-2H3 та сприяє їхній загибелі [3]. В іншому дослідженні 2021 року за допомогою моделі RBL 2H3 mc оцінювали протиалергічний та протизапальний потенціал природного продукту — неферину. Дослідження виявило хороші протиалергічні та протизапальні властивості цієї сполуки [4].
Сучасні методики імунологічних вимірювань
Постійне та вимірюване вивільнення медіаторів з клітин RBL-2H3 робить їх ідеальними для зручної флуориметрії, що сприяє проведенню точних і достовірних вимірювань, які мають вирішальне значення для дослідження захворювань та оцінки терапевтичних засобів.
Клітинна лінія RBL-2H3, що походить від Rattus norvegicus, є безцінним ресурсом як у фундаментальних, так і в прикладних дослідженнях у галузі імунології. Вона відкриває широкі можливості для поглиблення наших знань та вдосконалення методів лікування імунологічних захворювань.
Клітинна лінія RBL-2H3 для передових імунологічних досліджень
Клітини RBL-2H3: Наукові публікації
Нижче наведено кілька цікавих наукових публікацій, присвячених тучним клітинам RBL-2H3:
Інгібуюча дія нарірутину на дегрануляцію клітин RBL-2H3
Ця наукова стаття була опублікована в журналі «Immunopharmacology and Immunotoxicology» (2021). У дослідженні висунуто гіпотезу, що нарірутин, природна сполука, чинить інгібуючий вплив на дегрануляцію клітин RBL-2H3 шляхом регулювання сигнальних шляхів NF-κB, MAPK та тирозинкінази.
У цьому дослідженні, опублікованому в «International Journal of Molecular Sciences» (2020), висунуто гіпотезу, що сполука апігенін значно пригнічує алергічні та запальні реакції клітин RBL-2H3 та RAW264.7. Отже, він може слугувати потенційним засобом для боротьби з імунозалежними захворюваннями.
У цій науковій статті, опублікованій у журналі «International Journal of Molecular Sciences» (2021), було оцінено протиалергічні та протизапальні ефекти природного продукту — сапонарину — з використанням різних клітинних ліній, зокрема RBL-2H3.
У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine» (2014), було встановлено, що екстракти «Бенчалокавічіан» та деякі його активні компоненти чинять потенційний інгібуючий вплив на вивільнення β-гексозамінідази з клітин RBL-2H3.
Ця стаття була опублікована у 2018 році в журналі «International Journal of Biological Macromolecules». У дослідженні зазначено, що спіруліна максіма, природний продукт, інгібує дегрануляцію клітин RBL 2H3, запобігаючи фосфорилюванню MAPK та AKT.
Ресурси щодо клітинної лінії RBL-2H3: протоколи, відео та інше
RBL-2H3 — це широко використовувана лінія тучних клітин. Доступні ресурси, що охоплюють протоколи культивування та трансфекції RBL-2H3, наведено тут:
- Модель RBL-2H3 MC: Ця наукова стаття містить протоколи утримання культур RBL-2H3 та їх трансфекції.
Ось кілька ресурсів, що пояснюють протокол культивування клітин RBL-2H3:
- Клітини RBL-2H3: Цей веб-сайт буде корисним для вивчення протоколів культивування клітинної лінії RBL-2H3. Крім того, він містить інформацію про середовища для культивування клітин RBL-2H3 та умови культивування.
Клітинна лінія RBL-2H3: найважливіші питання та відповіді для дослідників
Література
- Passante, E. та N. Frankish, Клітинна лінія RBL-2H3: її походження та придатність як моделі тучних клітин. Inflamm Res, 2009. 58(11): с. 737–45.
- Li, Q. та ін., Псевдоалергічна реакція, спричинена ін’єкцією препарату «Цінкайлін», частково через сигнальний шлях PI3K-Rac1 у клітинах RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): с. 353–360.
- Лю, Л. та ін., Мікро- (нано-)пластик із полістиролу пошкоджує органели клітин RBL-2H3 та сприяє індукуванню апоптозу за допомогою MOAP-1. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: с. 129550.
- Чіу, К.-М. та ін., Протиалергічна та протизапальна дія неферіну на клітини RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): с. 10994.