Клітинна лінія MG-63: докладний посібник щодо використання клітин MG-63 у дослідженнях остеосаркоми
Клітини MG-63 — це фібробластоподібні клітини людської остеосаркоми, які мають широкий спектр застосування в біомедичних дослідженнях. Це може включати вивчення процесів, пов’язаних із кістковою тканиною, таких як розвиток кісток, диференціація тощо. Крім того, клітинна лінія MG-63 слугує підходящою моделлю in vitro для вивчення життєздатності, проліферації та адгезії кісткових клітин.
Загальні характеристики та походження клітинної лінії MG-63
У цьому розділі статті розглядаються походження та загальні характеристики клітинної лінії MG-63. Ви дізнаєтеся: Що таке клітинна лінія MG-63? Яке походження клітинної лінії MG-63? Яка морфологія клітин MG-63? Який розмір клітин MG-63?
- MG-63 — це клітинна лінія остеобластів, отримана з кісткової тканини 14-річного пацієнта (європейського походження) з остеосаркомою. А. Білліо та його колеги зареєстрували цю клітинну лінію в 1977 році.
- Клітинна лінія MG-63 має морфологію, схожу на фібробласти.
- Клітини людської остеосаркоми (MG-63) демонструють гіпотриплоїдію. Модальна кількість хромосом для цих клітин становить 66, що спостерігається приблизно у 44 % клітинної популяції. Вищі плоїдності також фіксуються майже у 2 % клітинної популяції. Крім того, у всіх клітинах у великій кількості присутні 18–19 маркерних хромосом.
Інформація щодо культивування клітинної лінії MG-63
Важлива інформація про вимоги до культивування клітинної лінії може полегшити вашу роботу. У цьому розділі статті наведено всі ключові моменти, що мають вирішальне значення для культивування та утримання клітин MG-63. Тут ви дізнаєтеся: Який час подвоєння клітин MG-63? Яке живильне середовище використовується для клітин MG-63? Яка щільність висівання клітин MG-63?
Ключові моменти культивування клітин MG-63
Час подвоєння
Час подвоєння популяції клітин MG-63 становить від 28 до 38 годин, залежно від умов культивування.
Характеристики росту
MG-63 — це адгезивна клітинна лінія.
Щільність висівання
Для клітин MG-63 рекомендується щільність 1 × 10⁴ клітин/см². Адгезивні клітини промивають 1× фосфатно-буферним сольовим розчином (PBS) без магнію та кальцію. Потім ці клітини інкубують з розчином для дисоціації (Accutase), додають свіже середовище та центрифугують. Отриманий осад клітин ресуспендують у свіжому середовищі та переносять у нову колбу для росту.
Середовище для культивування
Для культивування клітин MG-63 використовують середовища DMEM або Ham’s F12. Для забезпечення оптимального росту клітин ці середовища можна збагатити 5 % сироваткою ембріонів великої рогатої худоби (FBS), 3,0 г/л глюкози, 2,5 мМ L-глутаміну та 1,2 г/л NaHCO₃. Середовище слід замінювати 2–3 рази на тиждень.
Умови культивування
Для культивування клітин MG-63 необхідний зволожений інкубатор з температурою 37 °C та подачею 5 % CO₂.
Зберігання
Ці остеобластоподібні клітини можна зберігати у паровій фазі рідкого азоту або при температурі нижче -150 °C для збереження життєздатності клітин.
Процес заморожування та середовище
Для заморожування клітин MG-63 використовують середовища CM-1 або CM-ACF. Зазвичай рекомендується повільний процес заморожування, щоб запобігти шоку клітин та зберегти їх життєздатність.
Процес розморожування
Заморожені клітини інкубують протягом 40–60 секунд у попередньо нагрітій водяній бані (37 градусів Цельсія). Клітини ресуспендують у свіжому ростовому середовищі та переносять у нову колбу. Після 24 годин інкубації середовище замінюють, щоб видалити компоненти середовища для заморожування.
Рівень біобезпеки
Для роботи з культурами MG-63 та їх утримання необхідні лабораторні умови першого рівня біобезпеки.
- Клітинна лінія MG-63: переваги та недоліки
- Інформація про культивування клітинної лінії MG-63
- Замовте клітини MG-63 вже сьогодні
- Застосування клітин MG-63
- Наукові публікації, присвячені клітинам MG-63
- Ресурси щодо клітинної лінії MG-63: протоколи, відео та інше
- Поширені запитання про клітини MG-63
- Посилання
- Поширені запитання
Клітинна лінія MG-63: переваги та недоліки
MG-63 — це широко використовувана клітинна лінія остеобластів. Вона має низку переваг та недоліків. У цій статті ми розглянемо кілька основних плюсів та мінусів клітинної лінії MG-63.
Переваги
Перевагами клітин MG-63 є:
-
Остеобластоподібні властивості
Клітинна лінія MG-63 демонструє остеобластоподібні характеристики, що робить її придатною для вивчення процесів та захворювань, пов’язаних із кістковою тканиною. Її також можна використовувати для дослідження клітинної адгезії, проліферації та життєздатності на титанових поверхнях [1].
-
Придатність до трансфекції
Клітини MG-63 широко використовуються в дослідженнях з трансфекції, що дозволяє вивчати експресію генів, їхні функції та клітинні процеси.
-
Високий рівень синтезу інтерферону
Клітини MG-63 здатні до високого рівня синтезу інтерферону. При індукції циклогексимідом, поліінозиновою кислотою-поліцитидиловою кислотою та актиноміцином вони можуть давати у 3,7 рази вищий вихід інтерферону на см² порівняно з диплоїдними фібробластами [2].
Недоліки
Недоліки, пов’язані з В-клітинами MG-63, такі:
-
Гетерогенність
Клітини MG-63 демонструють гетерогенність у межах клітинної популяції, що може впливати на відтворюваність результатів.
-
Лінія пухлинних клітин
MG-63 є лінією ракових клітин і може не повністю відображати нормальну поведінку та фізіологію клітин, що обмежує її застосування в певних лабораторних експериментах.
Замовте клітини MG-63 вже сьогодні
Застосування клітин MG-63
Клітини MG-63 є чудовим інструментом для досліджень. Вони відкривають багато перспективних можливостей у науковій сфері. Нижче наведено кілька основних напрямків застосування клітин MG-63 у наукових дослідженнях.
- Дослідження процесів та захворювань, пов’язаних із кістковою тканиною: Клітини MG-63 є остеобластоподібними (кісткоутворювальними) клітинами. Тому ці клітини широко використовуються для вивчення захворювань кісткової тканини та клітинних процесів, зокрема розвитку, диференціації та мінералізації. Крім того, ці клітини активно застосовуються для скринінгу лікарських препаратів, що сприяють загоєнню кісток. У ході досліджень клітини MG-63 використовували для вивчення терапевтичного потенціалу наночастинок оксиду цинку, синтезованих «зеленим» методом із Scutellaria baicalensis, щодо проліферації, мінералізації та диференціації кісткових клітин [3].
- Дослідження раку: Клітини MG-63 широко використовуються в дослідженнях раку. У кількох дослідженнях ці клітини остеосаркоми застосовували для вивчення сигнальних шляхів раку та оцінки цитотоксичного й терапевтичного потенціалу лікарських препаратів. У дослідженні, проведеному в 2019 році, за допомогою клітин MG-63 вивчалися протипухлинні властивості природної сполуки томентозину. Результати показали, що томентозин проявляє протиракові ефекти, стимулюючи утворення внутрішньоклітинних активних форм кисню (АФК) [4].
Наукові публікації, присвячені клітинам MG-63
Нижче наведено деякі наукові публікації, присвячені MG-63 — клітинній лінії, схожій на остеобласти.
miR-192 підвищує чутливість клітин остеосаркоми MG-63 до метотрексату
Ця стаття була опублікована у журналі «Pathology — Research and Practice» у 2020 році. У цьому дослідженні клітини MG-63 використовувалися для вивчення молекулярних механізмів, що лежать в основі резистентності до ліків у клітинах остеосаркоми (MG-63). Результати показали, що miRNA-192 може бути корисною мішенню для подолання резистентності до метотрексату при остеосаркомі.
Це дослідження опубліковано в журналі «Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology» (2020). У дослідженні повідомляється про протираковий потенціал наночастинок оксиду цинку (ZnONPs), синтезованих «зеленим» методом з кореня Rehmanniae Radix, проти клітин раку кісток (MG-63).
Ця наукова стаття була опублікована у 2021 році в журналі «Materials Science and Engineering». У цьому дослідженні було висунуто гіпотезу про властивості біосинтезованих наночастинок оксиду цинку з рослини Scutellaria baicalensis, що сприяють загоєнню кісток, на прикладі клітинної лінії MG-63.
Це дослідження було опубліковано у 2021 році в журналі «Onco Targets and Therapy». У дослідженні було висунуто гіпотезу про протипухлинні властивості куркуміну щодо клітин остеосаркоми. Ця сполука проявляла такі терапевтичні ефекти шляхом інактивації онкологічного сигнального шляху p-JAK2/p-STAT3.
Це дослідження було опубліковано у 2018 році в журналі «International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science». У ході дослідження було встановлено, що вітамін D3, оброблений енергією біополя, позитивно впливає на проліферацію, дозрівання та диференціацію кісткових клітин і покращує показники здоров’я кісткової тканини.
Ресурси щодо клітинної лінії MG-63: протоколи, відео та інше
Існує низка ресурсів щодо клітинної лінії MG-63, що роз’яснюють протоколи культивування та трансфекції клітин.
- Трансфекція клітин MG-63: у цьому відео вичерпно пояснюється протокол трансфекції клітин MG-63.
- Пасажування адгезивних клітин: це відео містить інструкції щодо субкультивування або пасажування адгезивних клітинних ліній. Воно допоможе вам опанувати основні протоколи культивування клітин.
За наступним посиланням ви знайдете протокол культивування клітин MG-63.
- Культивування клітин MG-63: Цей веб-сайт містить простий і детальний протокол субкультури або поділу клітинної лінії MG-63.
Поширені запитання про клітини MG-63
Клітини MG-63 - це клітинні лінії остеосаркоми людини, які зазвичай використовуються в дослідженнях для вивчення біології кісток, біології раку та тестування ліків. Вони отримані з остеосаркоми 14-річного хлопчика і мають характеристики, характерні для остеобластичних клітин.
Клітини MG-63 походять з людської остеосаркоми, типу раку кісток. Зокрема, вони отримані зі злоякісної кісткової тканини пацієнта.
Час подвоєння клітин MG-63 зазвичай становить від 24 до 36 годин, залежно від умов культивування та використовуваного середовища.
Клітини MG-63 мають аномальний каріотип з множинними хромосомними порушеннями. Це включає як числові, так і структурні аберації, характерні для ракових клітин.
У той час як клітини MG-63 є клітинами остеосаркоми, людські фібробласти походять зі сполучної тканини і беруть участь у загоєнні ран та формуванні позаклітинного матриксу. Обидва типи клітин використовуються в дослідженнях клітинних взаємодій, особливо в контексті кісткової та тканинної інженерії.
Клітини MG-63 мають сильні властивості прикріплення, що робить їх придатними для досліджень, пов'язаних з адгезією, поширенням та взаємодією з різними біоматеріалами. Ці властивості мають вирішальне значення для розуміння функцій остеобластів та оптимізації кісткових імплантатів.
Клітини MG-63 використовуються в дослідженнях для вивчення ролі аденозину в метаболізмі кісткової тканини. Аденозинові рецептори на цих клітинах опосередковують різні функції, включаючи формування та резорбцію кісткової тканини, що робить їх цінними для вивчення молекулярних механізмів метаболізму кісткової тканини.
Амелогенін, білок, необхідний для формування емалі зубів, також можна вивчати за допомогою клітин MG-63, щоб дослідити його вплив на кісткові клітини та його потенційну роль в інженерії та регенерації кісткової тканини.
Клітини MG-63 відіграють важливу роль у вивченні оптимізації остеоінтеграції - процесу зрощення кісткової тканини з імплантатами. Дослідники використовують ці клітини для тестування нових матеріалів та модифікацій поверхні, які можуть покращити інтеграцію та стабільність імплантатів.
Фенотипова стабільність - це сталість клітинних характеристик у часі та при багаторазовому пасажуванні. Для клітин MG-63 підтримання фенотипової стабільності має важливе значення для забезпечення надійних і відтворюваних результатів експериментів.
Клітини MG-63 слугують моделлю для вивчення функцій остеобластів, включаючи формування та мінералізацію кісткової тканини, а також патофізіології остеосаркоми, надаючи уявлення про прогресування раку та потенційні терапевтичні мішені.
Так, клітини MG-63 можна використовувати для дослідження впливу людських інтерферонів на клітини раку кісток, включаючи їхні противірусні, антипроліферативні та імуномодулюючі властивості, що сприятиме розумінню імунотерапії раку.
Література
- Wandiyanto, J.V. та ін., Доля остеобластоподібних клітин MG-63 на попередньо інфікованих бактерицидних наноструктурованих титанових поверхнях. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A. та ін., Людський інтерферон: масове виробництво в новоствореній клітинній лінії MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): с. 11–5.
- Тан, Ю., та ін., Потенціал остеогенної диференціації та мінералізації наночастинок оксиду цинку з Scutellaria baicalensis на клітинах MG-63, подібних до людських остеобластів. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: с. 111656.
- Lee, C.M. та ін., Томентозин виявляє антиканцерогенний ефект у клітинах MG-63 людської остеосаркоми шляхом індукції внутрішньоклітинних активних форм кисню. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): с. 1508.