Клітини KC
Загальна інформація
| Опис | KC (Kc167) — це ембріональна клітинна лінія Drosophila melanogaster, отримана з жіночого ембріона на стадії дорсального закриття, зареєстрована в базі даних Cellosaurus під номером CVCL_Z833. Ця лінія була створена ще на початку досліджень і широко використовується в клітинній біології Drosophila, генетичних скринінгах та функціональній геноміці. Клітини Kc167 були імунізовані вірусом SV40 і ростуть у напівадгезивному режимі, утворюючи змішану популяцію прикріплених та вільно плаваючих клітин. Вони входять до числа найкраще охарактеризованих клітинних ліній Drosophila та повністю піддаються придушенню генів за допомогою РНК-інтерференції (RNAi), що робить їх основоположною моделлю для геномних скринінгів на основі РНК-інтерференції в біології безхребетних. Клітини KC застосовуються в клітинній біології дрозофіли, геномних скринінгах за допомогою РНК-інтерференції та CRISPR, дослідженнях шляхів передачі сигналів (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), дослідженнях вродженого імунітету та порівняльних дослідженнях еволюційно консервативних шляхів. Повністю секвенований та анотований геном дрозофіли в поєднанні з обширними загальнодоступними базами даних реагентів РНК-інтерференції (наприклад, DRSC/TRiP) робить клітини KC особливо ефективними для об’єктивних відкриттів у галузі функціональної геноміки. Через іморталізацію вірусом SV40 до них застосовується класифікація BSL-2. Клітини KC культивують у середовищі Шнайдера для дрозофіли, доповненому 2 мМ глутаміну та 10 % FBS. Важливо, що клітинні лінії дрозофіли культивують при 25 °C у навколишньому повітрі без CO₂ (а не при 37 °C / 5 % CO₂, як у випадку клітин ссавців). Пасажування клітин здійснюється шляхом обережного ресуспендування та розведення (напівадгезивний ріст). Середовище оновлюють або клітини розводять кожні 2–3 дні. |
|---|---|
| Організм | Drosophila melanogaster (плодова муха) |
| Тканина | Ембріон |
| Хвороба | Нормально |
| Місце метастазування | Ембріон (стадія закриття дорсального краю) |
| Додатки | Клітинна біологія дрозофіли; скринінги за методом РНК-інтерференції на рівні геному; скринінги за методом CRISPR; передача сигналів (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); вроджений імунітет; функціональна геноміка безхребетних |
| Синоніми | К.С., К.С. |
Характеристики
| Вік | Етап закриття спинної частини |
|---|---|
| Стать | Жінка |
| Морфологія | Напівадгезивний, схожий на епітелій |
| Тип клітини | Ембріональні клітини |
| Ростові властивості | напівприлипаючий |
Нормативні дані
| Цитування | KC (номер у каталозі Cytion 300604) |
|---|---|
| Рівень біобезпеки | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| ЦелозаврПриєднання | CVCL_Z833 |
| Статус ГМО | GMO-S2: Ця клітинна лінія дрозофіли містить стабільно інтегровану касету імунізації SV40. Необхідне дотримання рівня біологічної безпеки BSL-2. Ця класифікація діє лише на території Німеччини і може відрізнятися в інших країнах. |
Біомолекулярні дані
| Сприйнятливість до вірусів | SV40, що набув безсмертя |
|---|
Обробка
| Поживне середовище | Середовище Шнайдера для дрозофіл + 2 мМ глютаміну + 10 % сироватки ембріонів великої рогатої худоби (FBS). |
|---|---|
| Додатки | Додайте до середовища 2 мМ глутаміну та 10 % FBS |
| Реагент для дисоціації | Не потрібно (напівадгезивний; обережно ресуспендувати) |
| Подвоєння часу | приблизно від 24 до 48 годин |
| Субкультура | Акуратно перенесіть культуру піпеткою, щоб ресуспендувати напівадгезивні клітини. Перенесіть відповідний об’єм у нову колбу та додайте свіже, попередньо підігріте середовище Шнайдера. Розведіть до щільності від 5 × 10⁵ до 1 × 10⁶ клітин/мл. Інкубуйте при температурі 25 °C на повітрі без CO₂. |
| Коефіцієнт розподілу | від 1 до 3 |
| Густота посіву | від 5 × 10⁵ до 1 × 10⁶ клітин/мл |
| Оновлення рідини | Кожні 2-3 дні |
| Заморожуюче середовище | Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу. |
| Розморожування та культивування клітин |
|
| Інкубаційна атмосфера | 25 °C, повітря навколишнього середовища (CO₂ не потрібний). |
| Умови доставки | Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і негайно перемістіть віали у відповідне місце для зберігання. |
| Умови зберігання | Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот. |
Контроль якості та молекулярний аналіз
Угода про передачу матеріалів
Якщо ви маєте намір використовувати клітинні лінії Cytion виключно для внутрішніх досліджень в одному дослідницькому центрі, заповніть та підпишіть нашу Угоду про передачу матеріалів (MTA) і надішліть її разом із вашим замовленням.
Для будь-яких комерційних застосувань, включаючи, але не обмежуючись, роботу за плату, тестування контролю якості, випуск продукції, діагностичне використання або регуляторні дослідження, заповніть форму передбачуваного використання, щоб ми могли підготувати відповідну угоду, адаптовану до вашого проекту.
Зверніть увагу: угода MTA застосовується лише до певних клітинних ліній. Якщо це повідомлення та документ MTA з'являються на сторінці продукту, угода є чинною. Для клітинних ліній, на які не поширюється дія угоди MTA, посилання на угоду не відображається. Угода MTA не є чинною для клієнтів в Америці, Китаї або Тайвані. Зверніться до нашого представництва в США, щоб отримати відповідну угоду.