Клітини HaCaT
Основні факти про осередки Хакату
| Опис | Клітини HaCaT є ключовою моделлю в дерматологічних дослідженнях, пропонуючи розуміння складних механізмів біології та патології шкіри. Спонтанно імморталізована клітинна лінія HaCaT отримана з епідермальних клітин дорослої людини і зберігає здатність до проліферації та диференціювання, подібно до базальних кератиноцитів in vivo. Клітини HaCaT слугують надійною платформою для дослідження процесу епідермальної диференціації та вивчення маркерів епідермальної диференціації, необхідних для підтримки цілісності шкіри. Схильність клітин HaCaT до апоптозу та їх чутливість до агентів, що індукують апоптоз, інтенсивно вивчається, особливо в контексті цитотоксичних агентів, таких як RIPL. Дослідники оцінюють цитотоксичність цих агентів і ступінь цитотоксичності, використовуючи клітини HaCaT, застосовуючи такі методи, як флуоресцентна мікроскопія для візуалізації клітинних змін. Дослідники використовували клітини HaCaT для вивчення впливу різних агентів, включаючи антимікробні субстрати та їх вплив на життєздатність клітин. Ці клітини є чудовим субстратом для тестування антимікробних біоматеріалів та антимікробних ателоколагенових субстратів, що мають вирішальне значення для відновлення шкіри та медичних застосувань. Епідермальна лінія HaCaT також відіграє важливу роль у вивченні клітинного старіння, цитокінів і профілів експресії генів, пов'язаних зі старінням і хронічними захворюваннями. Транскрипційні профілі клітин HaCaT, включаючи роль κB і мікроРНК, дають уявлення про регуляторні механізми на молекулярному рівні. Лінія кератиноцитів HaCaT, з їхніми характеристиками епідермальних кератиноцитів, пропонує зручну систему для вивчення складної взаємодії між епідермальними клітинами та імунною системою, зокрема, ролі кератиноцитів у захворюваннях. Вони дозволяють досліджувати епігенетичні модифікації та їх вплив на диференціацію кератиноцитів, включаючи формування ороговілої оболонки, яка є ключовою особливістю бар'єрної функції шкіри. Таким чином, клітини HaCaT є незамінною моделлю в дерматологічних дослідженнях, сприяючи глибшому розумінню біології та патології шкіри завдяки своїй схожості з базальними кератиноцитами та здатності до клітинного росту і диференціювання. Їх застосування охоплює від вивчення диференціації епідермісу та антимікробних ефектів до дослідження клітинних реакцій, таких як апоптоз, що робить їх наріжним каменем у клітинній біології та біомедичних дослідженнях. |
|---|---|
| Організм | Людина |
| Тканина | Шкіра |
Деталі
| Вік | 62 роки |
|---|---|
| Стать | Чоловік |
| Етнічна приналежність | Кавказець |
| Тип клітини | Кератиноцити діаметром 20-25 мкм. |
| Ростові властивості | Адепт |
Документація
| Цитування | HaCaT (номер за каталогом Cytion 300493) |
|---|---|
| Рівень біобезпеки | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| ЦелозаврПриєднання | CVCL_0038 |
Генетика клітинної лінії кератиноцитів HaCaT
| Канцерогенний | Ні |
|---|---|
| Каріотип | Анеуплоїдний (гіпотетраплоїдний) |
Робота з клітинною лінією Hacat
| Поживне середовище | ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a) |
|---|---|
| Додатки | Додайте до середовища 10% FBS |
| Реагент для дисоціації | Суміш 1:1 ЕДТА (0,05%) і трипсину (0,1%) необхідно готувати щоразу перед відділенням клітин, використовуючи PBS без Ca2+ і Mg2+, щоб забезпечити фізіологічну осмолярність. Готові до використання суміші трипсину/ЕДТА не рекомендуються, оскільки це може призвести до утворення згустків клітин. Як альтернативу можна використовувати TrypLE Express (Life Technologies) замість трипсину/ЕДТА. Слід дотримуватися протоколу виробника. |
| Подвоєння часу | Час подвоєння клітин HaCaT становить 28 годин. |
| Субкультура |
|
| Коефіцієнт розподілу | A ratio of 1:5 to 1:10 is recommended |
| Густота посіву | 1 x 104 клітин/см2 |
| Оновлення рідини | 2 рази на тиждень |
| Заморожуюче середовище | Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу. |
| Розморожування та культивування клітин |
|
| Інкубаційна атмосфера | 37°C, 5% CO2, волога атмосфера. |
| Покриття колби | Для оптимального прикріплення та життєздатності після розморожування ми рекомендуємо використовувати колби або пластини з колагеновим покриттям. |
| Процедура заморожування | Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і негайно перемістіть віали у відповідне місце для зберігання. |
| Умови доставки | Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і негайно перемістіть віали у відповідне місце для зберігання. |
| Умови зберігання | Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот. |
Забезпечення якості
| Стерильність | Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми. Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю. |
|---|---|
| Профіль STR |
Амелогенін: x,x
CSF1PO: 9,11
D13S317: 10,12
D16S539: 9,12
D5S818: 12
D7S820: 9,11
TH01: 09. Mrz
TPOX: 11,12
vWA: 16,17
D3S1358: 16
D21S11: 28,30.2
D18S51: 12
Пента Е: 7,12
Пента D: 11,13
D8S1179: 14
FGA: 24
D1S1656: 11,12
D2S1338: 17,25
D12S391: 18,23
D19S433: 13,14
|
| HLA алелі |
A*: '31:01:02
B*: '40:01:02, '51:01:01
C*: '03:04:01, '15:02:01
DRB1*: '04:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '03:01:01, '06:02:01
DPB1*: '03:01:01, '04:01:01
E: '01:03:01, '01:03:02
|
Сертифікат аналізу (CoA)
| Номер лота | Тип сертифікату | Дата | Номер за каталогом |
|---|---|---|---|
| 300493-250324 | Сертифікат аналізу | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190723 | Сертифікат аналізу | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190124 | Сертифікат аналізу | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225SF | Сертифікат аналізу | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225 | Сертифікат аналізу | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-040424 | Сертифікат аналізу | 23. May. 2025 | 300493 |