Клітини HT55

430,00 EUR*

Продукти відправляються в замороженому вигляді на сухому льоді в кріопробірках. Кожна кріопробірка зазвичай містить 3 × 10 ⁶ клітин для адгезивних ліній або 5 × 10⁶ клітин для суспензійних ліній (детальніше див. сертифікат аналізу партії).

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 305018

Паспорт безпеки

Листок з описом продукції

Угода про передачу матеріалів

Опис	HT55 — це клітинна лінія аденокарциноми прямої кишки людини, отримана з первинної пухлини прямої кишки 54-річної жінки кавказької раси. Лінія росте у вигляді адгезивного моношару з епітеліоподібною морфологією та зареєстрована в базі даних Cellosaurus під номером CVCL_1294. HT55 несе численні гетерозиготні та гомозиготні мутації з втратою функції в гені-супресорі пухлин APC (аденоматозний поліпоз товстої кишки), зокрема p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr та p.Lys241Ter (усі гетерозиготні), а також гомозиготну заміну p.Arg213Leu. Цей мутаційний профіль робить HT55 біологічно релевантною моделлю колоректального канцерогенезу, зумовленого APC, що відображає дисрегуляцію канонічного сигнального шляху WNT, який лежить в основі більшості випадків колоректального раку у людини. HT55 широко використовується в дослідженнях колоректального раку для вивчення сигнального шляху WNT/β-катеніну, функції супресора пухлин APC, чутливості та резистентності до ліків, а також для доклінічної оцінки цільових препаратів, спрямованих проти компонентів сигнального шляху WNT. Ця лінія підходить для фармакологічних аналізів in vitro та досліджень ксенотрансплантатів на імунокомпрометованих мишачих моделях, забезпечуючи прилипаючу, зручну платформу in vitro для механістичних та трансляційних досліджень колоректального раку. Наявність численних мутацій у вигляді укорочень гена APC робить HT55 репрезентативною для мікросателітно-стабільного, хромосомно-нестабільного підтипу колоректального раку, який зазвичай зумовлений втратою функції APC. HT55 культивують у середовищі EMEM (MEM Eagle, 2 мМ L-глутаміну, 2,2 г/л NaHCO₃, EBSS; номер артикулу Cytion 820100a), доповненому 10 % FBS, при температурі 37 °C у зволоженій атмосфері з 5 % CO₂. Субкультуру клітин проводять за допомогою Accutase, коли вони досягають приблизно 80–90 % конфлюентності, з рекомендованим співвідношенням поділу 1:3 до 1:5 та щільністю висівання 1–3 × 10⁴ клітин/см². Середовище оновлюють кожні 2–3 дні. Час подвоєння становить приблизно 28 годин.
Організм	Людина
Тканина	Пряма кишка
Хвороба	Аденокарцинома
Додатки	Дослідження раку товстої кишки; дослідження сигнального шляху WNT/APC; тестування чутливості та резистентності до лікарських препаратів; доклінічна онкологія; моделі ксенотрансплантатів; оцінка цільової терапії
Синоніми	HT55

Вік	54 роки
Стать	Жінка
Етнічна приналежність	Кавказець
Морфологія	Епітеліальноподібні
Тип клітини	Епітеліальні клітини
Ростові властивості	Адепт

Цитування	HT55 (номер у каталозі Cytion 305018)
Рівень біобезпеки	1
NCBI_TaxID	9606
ЦелозаврПриєднання	CVCL_1294

Мутаційний профіль	Мутація: p.Gln1131Ter, гетерозиготна; Мутація: p.Gln1303Ter, гетерозиготна; Мутація: p.Arg1463Ser, гетерозиготна; Мутація: p.Asn581Tyr, гетерозиготна; Мутація: p.Lys241Ter, гетерозиготна; Мутація: p.Arg213Leu, гомозиготна

Поживне середовище	EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Додатки	Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації	Аккутаза
Подвоєння часу	28 годин
Субкультура	Видаліть старе середовище з прикріплених клітин і промийте їх PBS без кальцію та магнію. Для колб T25 використовуйте 3–5 мл PBS, а для колб T75 — 5–10 мл. Потім повністю залийте клітини Accutase, використовуючи 1–2 мл для колб T25 і 2,5 мл для колб T75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8–10 хвилин, щоб вони відірвалися. Після інкубації обережно перемішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300×g протягом 3 хвилин. Злийте супернатант, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Коефіцієнт розподілу	від 1 до 5
Густота посіву	Від 1 до 3 x 10⁴ клітин/^см2
Оновлення рідини	Кожні 2-3 дні
Заморожуюче середовище	Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Розморожування та культивування клітин	Переконайтеся, що віал залишається глибоко замороженим після доставки, оскільки клітини транспортуються на сухому льоду для підтримання оптимальної температури під час транспортування. Після отримання негайно зберігайте кріовіал при температурі нижче -150°C, щоб забезпечити збереження клітинної цілісності, або перейдіть до кроку 3, якщо потрібне негайне культивування. Для негайного культивування швидко розморозьте віал, зануривши його у водяну баню з чистою водою і антимікробним засобом при температурі 37°C, обережно перемішуючи протягом 40-60 секунд, поки не залишиться невелика крижана грудка. Всі наступні кроки виконуйте в стерильних умовах у проточній витяжній шафі, дезінфікуючи кріовіал 70% етанолом перед відкриттям. Обережно відкрийте продезінфікований флакон і перенесіть клітинну суспензію в 15 мл центрифужну пробірку, що містить 8 мл культурального середовища кімнатної температури, обережно перемішуючи. Відцентрифугуйте суміш при 300 x g протягом 3 хвилин, щоб відокремити клітини, і обережно викиньте надосадову рідину, що містить залишки заморожувального середовища. Обережно ресуспендуйте осад клітин у 10 мл свіжого культурального середовища. Для адгезивних клітин розділіть суспензію між двома культуральними колбами T25; для суспензійних культур перенесіть все середовище в одну колбу T25, щоб сприяти ефективній взаємодії та росту клітин. Дотримуйтесь встановлених протоколів субкультивування для продовження росту і підтримання клітинної лінії, забезпечуючи надійні результати експерименту.
Інкубаційна атмосфера	37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.
Умови доставки	Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і негайно перемістіть віали у відповідне місце для зберігання.
Умови зберігання	Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Якщо ви маєте намір використовувати клітинні лінії Cytion виключно для внутрішніх досліджень в одному дослідницькому центрі, заповніть та підпишіть нашу Угоду про передачу матеріалів (MTA) і надішліть її разом із вашим замовленням.

Для будь-яких комерційних застосувань, включаючи, але не обмежуючись, роботу за плату, тестування контролю якості, випуск продукції, діагностичне використання або регуляторні дослідження, заповніть форму передбачуваного використання, щоб ми могли підготувати відповідну угоду, адаптовану до вашого проекту.

Зверніть увагу: угода MTA застосовується лише до певних клітинних ліній. Якщо це повідомлення та документ MTA з'являються на сторінці продукту, угода є чинною. Для клітинних ліній, на які не поширюється дія угоди MTA, посилання на угоду не відображається. Угода MTA не є чинною для клієнтів в Америці, Китаї або Тайвані. Зверніться до нашого представництва в США, щоб отримати відповідну угоду.

Клітини HT55

Загальна інформація

Характеристики

Нормативні дані

Біомолекулярні дані

Обробка

Контроль якості та молекулярний аналіз

Угода про передачу матеріалів