Клітини CTX

DMEM (модифіковане середовище Дульбекко)
- це універсальне і широко використовуване базальне середовище, призначене для підтримки росту різноманітних клітин ссавців у біологічних дослідженнях. Це ідеальне середовище для культивування первинних фібробластів, нейронів, гліальних клітин, HUVEC, гладком'язових клітин, а також популярних клітинних ліній, таких як HeLa, 293, Cos-7 і PC-12.
Що відрізняє DMEM від інших середовищ, так це його унікальний склад. Воно містить вражаюче чотириразове збільшення концентрації амінокислот і вітамінів порівняно з оригінальним мінімальним поживним середовищем Eagle's Minimal Essential Medium. Спочатку розроблене з низьким вмістом глюкози (1 г/л) і пірувату натрію, DMEM часто використовується з більш високим вмістом глюкози, як з піруватом натрію, так і без нього. Слід зазначити, що DMEM не містить білків, ліпідів або факторів росту, які потребують доповнення. Для досягнення оптимального росту зазвичай до DMEM додають 10% фетальної сироватки великої рогатої худоби (FBS). Крім того, DMEM використовує буферну систему бікарбонату натрію, що вимагає 5-10% CO2 середовища для підтримання фізіологічного рН.
Модифіковане середовище Dulbecco's Eagle Medium (DMEM) високо цінується серед визначених середовищ для культивування клітин і тканин, задовольняючи потреби росту різних фенотипів клітин, що прилипають. Воно перевершує оригінальне середовище Eagle's, розроблене в 1950-х роках для культивування курячих клітин, завдяки вдосконаленому додатковому складу, відомому як модифікація Дульбекко. Ця модифікація значно підвищує вміст окремих амінокислот і вітамінів до чотирьох разів порівняно з оригінальним середовищем.
У галузі клітинних культур DMEM відіграє життєво важливу роль як середовище для росту різних типів клітин, включаючи первинні клітини, стовбурові клітини та трансформовані клітини. Дослідники також використовують модифіковану версію DMEM для широкого спектру дослідницьких завдань, таких як розробка ліків, тканинна інженерія та вивчення клітинних сигнальних шляхів.

Контроль якості

Стерильно відфільтрований


Зберігання та термін придатності

Зберігати при температурі від +2°C до +8°C, в захищеному від світла місці.
Після відкриття зберігати при температурі 4°C і використати протягом 6-8 тижнів.


Умови транспортування

Температура навколишнього середовища


Обслуговування

Зберігати в холодильнику при температурі від +2°C до +8°C у темряві. Уникайте заморожування та частого нагрівання до +37°C, оскільки це знижує якість продукту.
Не нагрівайте середовище вище 37°C і не використовуйте неконтрольовані джерела тепла, такі як мікрохвильові печі.
Якщо потрібно використати лише частину засобу, відберіть необхідну кількість і підігрійте його до кімнатної температури перед застосуванням.


Склад



Категорія
Компоненти
Концентрація (мг/л)


Амінокислоти
Гліцин
30.00



L-аргінін HCl
84.00



L-цистин 2 HCl
62.57



L-глютамин
584.00



L-гістидин HCl H2O
42.00



L-ізолейцин
105.00



L-лейцин
105.00



L-лізин HCl
146.00



L-метіонін
30.00



L-фенілаланін
66.00



L-серин
42.00



L-треонін
95.00



L-триптофан
16.00



L-тирозин 2 Na 2H2O
103.79



L-валін
94.00


Вітаміни
Холіну хлорид
4.00



D-Кальцію пантотенат
4.00



Фолієва кислота
4.00



міо-інозитол
7.20



Нікотинамід
4.00



Піридоксаль HCl
4.00



Рибофлавін
0.40



Тіамін HCl
4.00


Неорганічні солі
CaCl2 2 H2O
265.00



Fe(NO3)3 9 H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Інші компоненти
D-глюкоза
4500.00



Феноловий червоний натрієва сіль
15.90



Піруват натрію
110.00

Розчин для відокремлення клітин Accutase з ЕДТА та феноловим червоним – 100 мл

Accutase — це готовий до використання, стерильнофільтрований розчин для відокремлення клітин, розроблений як м'яка альтернатива трипсину/EDTA для дисоціації адгезивних клітин ссавців зі стандартного пластикового посуду для культивування тканин та поверхонь з адгезивним покриттям. Він поєднує протеолітичну та колагенолітичну активність ферментів у збалансованому сольовому розчині для забезпечення ефективної, але контрольованої дисоціації, зберігаючи білки на поверхні клітин та підтримуючи високу життєздатність після пасажування та швидке повторне прикріплення.

Формула Accutase базується на фосфатно-буферному розчині Дюльбекко (DPBS) з ЕДТА та феноловим червоним як візуальним індикатором рН. Ферменти мають нессавцеве та небактеріальне походження, що робить Accutase особливо придатним для досліджень стовбурових клітин, робочих процесів з вакцинами та будь-яких застосувань, де необхідно мінімізувати забруднення, похідні від тварин або мікроорганізмів. Розчин самоінгібується при 37 °C, тому після відокремлення не потрібні нейтралізуючі реагенти або середовища, що містять сироватку — клітини можна переносити безпосередньо у свіже середовище.

Основні характеристики

Готова до використання 1x стерильнофільтрована рідина – розведення або відновлення не потрібні
Комбінована протеолітична та колагенолітична активність ферментів для м'якого роз'єднання
Кожна партія стандартизована до визначеної активності дисоціації для забезпечення стабільності між партіями
Ферменти не походять від ссавців та бактерій
Автоінгібується при 37 °C – не потребує нейтралізуючого розчину
Створено на основі PBS Дульбекко з EDTA
Феноловий червоний включений як візуальний індикатор pH
pH 6,8–7,8


Типові застосування
Accutase м'яко дисоціює широкий спектр адгезивних та чутливих типів клітин, включаючи ембріональні стовбурові клітини людини (hESCs), індуковані плюрипотентні стовбурові клітини людини (iPSCs), нейральні стовбурові клітини, первинні нейрони та стандартні культивовані адгезивні лінії, такі як HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 та A549. Типові випадки використання включають:

Рутинне субкультурування та пасажування адгезивних клітин ссавців
Делікатне роз'єднання окремих клітин hESCs, iPSCs та інших чутливих ліній
Підготовка зразків для проточної цитометрії та аналізу FACS
Аналіз маркерів клітинної поверхні, де важлива цілісність епітопу
Аналізи міграції, проліферації та апоптозу клітин
Аналізи стану спокою шляхом депривації сироватки та дослідження трансфекції онкогенів
Аналізи міграції пухлинних клітин та клітин нервового гребеня
Збільшення масштабів виробництва в робочих процесах біореакторів

Для рутинної роботи нанесіть приблизно 10 мл Accutase на 75 см2 поверхні культури та інкубуйте протягом 5–10 хвилин при кімнатній температурі. Оптимальний час інкубації слід визначати для кожної клітинної лінії окремо, і він не повинен перевищувати одну годину. Перед додаванням промийте клітинний шар розчином солі без Ca2+/Mg2+, таким як DPBS без кальцію та магнію, щоб видалити залишки сироватки та двовалентні катіони.

Поводження та зберігання
Зберігайте нерозкриту пляшку в замороженому стані при температурі -15 °C або нижче. Розморожуйте при кімнатній температурі або протягом ночі при температурі від +2 °C до +8 °C. Не розморожуйте Accutase у водяній бані при 37 °C, оскільки підвищені температури знижують активність ферменту. Після розморожування розчин можна зберігати до 2 місяців при температурі від +2 °C до +8 °C; не зберігайте при кімнатній температурі. Не розігрівайте реагент до 37 °C перед застосуванням – додавайте його безпосередньо до промитих клітин при кімнатній температурі. Для тривалого зберігання рекомендується розливати реагент у одноразові аліквоти, щоб уникнути багаторазових циклів розморожування. Завжди працюйте в асептичних умовах.

Якість
Виробляється відповідно до суворих стандартів якості. Кожна партія Accutase проходить стерильну фільтрацію та тестується на стерильність, рН, зовнішній вигляд та дисоціаційну активність, щоб забезпечити стабільну та відтворювану ефективність від партії до партії.

Технічні характеристики



Характеристики
Деталі



Тип продуктуРеагент для відокремлення/дисоціації клітин
ФорматСтерильнофільтрована рідина, готова до використання
Об'єм100 мл
Робоча концентрація1x (готова до використання)
Активність ферментуКомбінована протеолітична та колагенолітична
Походження ферментуНессавцевий та небактеріальний
Буферна системаPBS Дюльбекко з ЕДТА
Індикатор pHФеноловий червоний
Діапазон pH6,8 – 7,8
Зовнішній виглядПрозорий розчин від блідо-червоного до оранжевого кольору
Температура зберігання-15 °C або нижче
Стабільність після розморожуванняДо 2 місяців при температурі від +2 °C до +8 °C
Рекомендований об’єм для використання~10 мл на 75 см² поверхні культури
Типовий час інкубації5 – 10 хвилин при кімнатній температурі
Умови транспортуванняЗаморожено на сухому льоді
ПризначенняТільки для наукових досліджень та подальшого виробництва



Формула (склад на літр)



Компонент
Концентрація (мг/л)




Неорганічні солі

Хлорид натрію (NaCl)8000,00
Гідрофосфат натрію (Na2HPO4)1150,00
Хлорид калію (KCl)200,00
Дігідрофосфат калію (KH2PO4)200,00

Інші компоненти

EDTA · 4Na (тетранатрій EDTA)220,00
Феноловий червоний3,00
Запатентована суміш ферментів (протеолітична та колагенолітична активність)1x



Accutase є зареєстрованою торговою маркою компанії Innovative Cell Technologies, Inc.

Огляд продукту
Об'єм: 100 мл Зберігання: ≤-15°C Стерильність: Стерильно відфільтрований
Розчин антибіотика/антимікотика (100х )
- це стерильний, готовий до використання концентрат, призначений для зменшення ризику мікробного забруднення в культурі клітин та інших лабораторних дослідженнях. Цей 100-кратний розчин містить добре відому комбінацію пеніциліну, стрептоміцину та амфотерицину В, що забезпечує антимікробну активність широкого спектру дії проти грампозитивних і грамнегативних бактерій, дріжджів та нитчастих грибів. Препарат підходить для використання в культурах еукаріотичних клітин, бактеріальних середовищах та інших чутливих до забруднення системах, підтримуючи чистоту та послідовність лабораторних операцій.
Застосування та переваги Оптимізоване для рутинних дослідницьких протоколів, це рішення широко використовується для підтримання асептичних умов у робочих процесах з клітинними культурами. Воно забезпечує надійну роботу в чутливих до забруднення середовищах, допомагаючи дослідникам зменшити ризик надмірного росту мікроорганізмів без шкоди для здоров'я клітин і відтворюваності експериментів. Стерильно відфільтрований склад усуває необхідність у додаткових етапах розчинення, сприяючи спрощеній підготовці середовищ і зменшуючи варіабельність щоденних лабораторних процедур.
Використання та сумісність Для досягнення стандартних робочих концентрацій розведіть розчин у співвідношенні 1:100 у вашому поживному середовищі. Продукт сумісний з широким спектром клітинних ліній ссавців і базальних середовищ. Завдяки постійній наявності на складі, дослідники отримують вигоду від надійного безперервного постачання та спрощеного планування логістики. Розчин слід зберігати при ≤ -15 °C і захищати від повторних циклів заморожування-розморожування для збереження стабільності. Тільки для дослідницьких цілей. Не для використання в діагностичних або терапевтичних процедурах. Не застосовувати для лікування людей або тварин.