DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3
DMEM:Ham's F12 — це широко визнане та широко використовуване базове середовище для культивування клітин у біологічних дослідженнях. Воно слугує основним джерелом поживних речовин для росту різних ліній клітин ссавців, особливо у поєднанні з ембріональною сироваткою великої рогатої худоби (FBS).
Ця унікальна формула поєднує модифіковане середовище Дульбекко (DMEM) та Ham's F-12 (поживна суміш Ham's F-12) у точному співвідношенні 1:1. Додавання L-глутаміну ще більше покращує її склад.
DMEM, похідна від мінімального есенціального середовища Ігл (EMEM), має підвищену концентрацію амінокислот та вітамінів порівняно зі своїм попередником. Натомість Ham's F-12 базується на середовищі Ham's F-10, забезпечуючи доповнюючий набір необхідних компонентів.
Для забезпечення оптимального росту клітин зазвичай DMEM:Ham's F12 доповнюють FBS у типовій концентрації 5–10%. Це додавання є необхідним, оскільки у середовищі відсутні гормони росту, ліпіди та білки, що мають вирішальне значення для розвитку клітин.
DMEM:Ham's F12 містить буферну систему для регулювання рН і часто доповнюється феноловим червоним, індикатором рН. Культивовані клітини в DMEM:Ham's F12 або будь-якому середовищі, що використовує бікарбонатну буферну систему, потребують контрольованого середовища з вмістом CO2 5–10% для підтримання відповідного рівня рН.
Контроль якості
- Стерильно фільтрований
Зберігання та термін придатності
- Зберігати при температурі від +2 °C до +8 °C, захищаючи від світла.
- Після відкриття зберігати при температурі 4 °C і використати протягом 6–8 тижнів.
Умови транспортування
- Температура навколишнього середовища
Зберігання
- Зберігати в холодильнику при температурі від +2 °C до +8 °C у темному місці. Уникати заморожування та частого нагрівання до +37 °C, оскільки це знижує якість продукту.
- Не нагрівайте середовище вище 37°C та не використовуйте неконтрольовані джерела тепла, такі як мікрохвильові печі.
- Якщо планується використання лише частини середовища, відберіть необхідну кількість та нагрійте її до кімнатної температури перед використанням.
Склад
| Категорія | Компоненти | Концентрація (мг/л) |
| Амінокислоти | Гліцин | 18,75 |
| L-аланін | 4,45 | |
| L-аргінін HCl | 147,50 | |
| L-аспарагін H₂O | 7,50 | |
| L-аспарагінова кислота | 6,65 | |
| L-цистеїн HCl H₂O | 17,56 | |
| L-цистин 2 HCl | 31,29 | |
| L-глутамінова кислота | 7,35 | |
| L-глутамін | 365,00 | |
| L-гістидин HCl H₂O | 31,48 | |
| L-ізолейцин | 54,47 | |
| L-лейцин | 59,05 | |
| L-лізин HCl | 91,25 | |
| L-метіонін | 17,24 | |
| L-фенілаланін | 35,48 | |
| L-пролін | 17,25 | |
| L-серин | 26,25 | |
| L-треонін | 53,45 | |
| L-триптофан | 9,02 | |
| L-тирозин 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-валін | 52,85 | |
| Вітаміни | D-біотин | 0,0035 |
| Хлорид холіну | 8,98 | |
| D-пантотенат кальцію | 2,24 | |
| Фолієва кислота | 2,66 | |
| міо-інозитол | 12,60 | |
| Нікотинамід | 2,02 | |
| Піридоксин HCl | 0,031 | |
| Піридоксаль HCl | 2,00 | |
| Рибофлавін | 0,219 | |
| Тіамін HCl | 2,17 | |
| Вітамін В12 | 0,68 | |
| Неорганічні солі | CaCl₂·2H₂O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Інші компоненти | D-глюкоза | 3151,00 |
| Гіпоксантин | 2,40 | |
| ГЕПЕС | 3574,50 | |
| Лінолева кислота | 0,042 | |
| Ліпоєва кислота | 0,105 | |
| Феноловий червоний натрієвий | 8,63 | |
| Путресцин 2 HCl | 0,081 | |
| Піруват натрію | 55,00 | |
| Тімідин | 0,365 |