KC Hücreleri
Genel bilgi
| Açıklama | KC (Kc167), dorsal kapanma aşamasındaki bir dişi embriyodan elde edilen bir Drosophila melanogaster embriyonik hücre hattıdır ve Cellosaurus’ta CVCL_Z833 olarak kayıtlıdır. Bu hat ilk olarak kurulmuş ve Drosophila hücre biyolojisi, genetik taramalar ve fonksiyonel genomik alanlarında yaygın olarak kullanılmıştır. Kc167 hücreleri SV40 ile ölümsüzleştirilmiştir ve yarı yapışkan bir şekilde büyürler; bu da yapışık ve gevşek bir şekilde yüzen hücrelerden oluşan karışık bir popülasyon oluşturur. Bu hücreler, en iyi karakterize edilmiş Drosophila hücre hatları arasında yer alır ve RNAi aracılı gen susturmaya tamamen uygundur; bu da onları omurgasız biyolojisinde genom çapında RNAi taramaları için temel bir model haline getirir. KC hücreleri, Drosophila hücre biyolojisi, genom çapında RNAi ve CRISPR taramaları, sinyal iletim yolu çalışmaları (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), doğuştan gelen bağışıklık araştırmaları ve evrimsel olarak korunmuş yolakların karşılaştırmalı çalışmalarında kullanılabilir. Tamamen dizilenmiş ve anotlanmış Drosophila genomu, RNAi reaktiflerine ilişkin kapsamlı kamuya açık veritabanları (örn. DRSC/TRiP) ile birleştiğinde, KC hücrelerini tarafsız fonksiyonel genomik keşifler için özellikle güçlü kılar. SV40 ile ölümsüzleştirme nedeniyle BSL-2 sınıflandırması geçerlidir. KC hücreleri, 2 mM Glutamin ve %10 FBS ile takviye edilmiş Schneider's Drosophila besiyerinde kültürlenir. Önemli bir nokta olarak, Drosophila hücre hatları, CO₂ içermeyen ortam havasında 25°C'de kültürlenir (memeli hücreleri için olduğu gibi 37°C / %5 CO₂'de değil). Hücreler, nazikçe yeniden süspansiyon haline getirilip seyreltilerek pasajlanır (yarı yapışkan büyüme). Ortam her 2–3 günde bir yenilenir veya hücreler seyreltilir. |
|---|---|
| Organizma | Drosophila melanogaster (Meyve sineği) |
| Doku | Embriyo |
| Hastalık | Normal |
| Metastatik bölge | Embriyo (sırt kapanması aşaması) |
| Uygulamalar | Drosophila hücre biyolojisi; genom çapında RNAi taramaları; CRISPR taramaları; sinyal iletimi (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); doğuştan gelen bağışıklık; omurgasızlarda fonksiyonel genomik |
| Eşanlamlılar | KC, K C |
Özellikler
| Yaş | Sırt kapanma aşaması |
|---|---|
| Cinsiyet | Kadın |
| Morfoloji | Yarı yapışkan, epitel benzeri |
| Hücre tipi | Embriyonik hücreler |
| Büyüme özellikleri | yarı yapışkan |
Düzenleyici Veriler
| Atıf | KC (Cytion katalog numarası 300604) |
|---|---|
| Biyogüvenlik seviyesi | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| CellosaurusAccession | CVCL_Z833 |
| GDO Durumu | GMO-S2: Bu Drosophila hücre hattı, kalıcı olarak entegre edilmiş bir SV40 ölümsüzleştirme kaseti içerir. BSL-2 güvenlik seviyesinde muhafaza edilmesi gerekmektedir. Bu sınıflandırma yalnızca Almanya sınırları içinde geçerlidir ve başka ülkelerde farklılık gösterebilir. |
Biyomoleküler Veriler
| Virüs duyarlılığı | SV40'ın ölümsüzleştirilmesi |
|---|
Elleçleme
| Kültür Ortamı | Schneider'in Drosophila besiyeri + 2 mM glutamin + %10 fetal sığır serumu (FBS). |
|---|---|
| Takviyeler | Besiyerine 2 mM glutamin ve %10 FBS ekleyin |
| Ayrıştırma Reaktifi | Gerekli değildir (yarı yapışkan; nazikçe yeniden süspansiyon haline getirin) |
| İki katına çıkma süresi | yaklaşık 24 ila 48 saat |
| Alt kültürleme | Yarı yapışık hücreleri yeniden süspansiyon haline getirmek için kültürü nazikçe pipetleyin. Uygun bir hacmi yeni bir şişeye aktarın ve önceden ısıtılmış taze Schneider besiyerini ekleyin. Hücre yoğunluğunu 5 × 10⁵ ila 1 × 10⁶ hücre/ml olacak şekilde seyreltin. CO₂ içermeyen ortam havasında 25°C'de inkübe edin. |
| Bölünmüş oran | 1'den 3'e kadar |
| Tohumlama yoğunluğu | 5 × 10⁵ ila 1 × 10⁶ hücre/ml |
| Sıvı yenileme | Her 2 ila 3 günde bir |
| Ortamı dondurun | Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz. |
| Hücrelerin Çözdürülmesi ve Kültürlenmesi |
|
| Kuluçka Atmosferi | 25 °C, ortam havası (CO₂ gerekmez). |
| Nakliye Koşulları | Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın. |
| Depolama Koşulları | Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir. |
Kalite Kontrol ve Moleküler Analiz
Malzeme Transfer Sözleşmesi
Cytion hücre hatlarını yalnızca tek bir araştırma merkezinde iç araştırma amaçlı kullanmayı planlıyorsanız, Malzeme Transfer Anlaşması'nı (MTA) doldurup imzaladıktan sonra siparişinizle birlikte gönderin.
Hizmet bedeli, kalite kontrol testleri, ürün piyasaya sürülmesi, teşhis amaçlı kullanım veya düzenleyici çalışmalar dahil ancak bunlarla sınırlı olmamak üzere tüm ticari uygulamalar için, projenize uygun bir anlaşma hazırlayabilmemiz için Lütfen Kullanım Amacı Formunu doldurun.
Lütfen dikkat: MTA yalnızca belirli hücre hatları için geçerlidir. Bu bildirim ve MTA belgesi bir ürün sayfasında görünüyorsa, sözleşme geçerlidir. MTA kapsamına girmeyen hücre hatları için sözleşmeye atıfta bulunulmayacaktır. MTA, Amerika, Çin veya Tayvan'daki müşteriler için geçerli değildir. Uygun sözleşmeyi almak için lütfen ABD kuruluşumuzla iletişime geçin.