HT55 Hücreleri

HT55, 54 yaşındaki Kafkasyalı bir kadının primer rektal tümöründen elde edilen bir insan rektal adenokarsinom hücre hattıdır. Bu hücre hattı, epitel benzeri morfolojiye sahip, yüzeye yapışık tek tabaka halinde büyür ve Cellosaurus’ta CVCL_1294 numarasıyla kayıtlıdır. HT55, APC (adenomatöz polipozis coli) tümör baskılayıcı geninde p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr ve p.Lys241Ter (hepsi heterozigot) mutasyonlarının yanı sıra homozigot bir p.Arg213Leu ikamesi de içermektedir. Bu mutasyon profili, HT55'i APC kaynaklı kolorektal karsinogenezin biyolojik açıdan anlamlı bir modeli haline getirir ve insan kolorektal kanserlerinin çoğuna yol açan kanonik WNT yolakındaki düzensizliği yansıtır.

HT55, kolorektal kanser araştırmalarında WNT/β-katenin sinyal iletimi, APC tümör baskılayıcı işlevi, ilaç duyarlılığı ve direnci ile WNT yolak bileşenlerine karşı hedefe yönelik ajanların preklinik değerlendirmesi çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hat, in vitro farmakolojik analizler ve bağışıklık sistemi baskılanmış fare modellerinde ksenograft çalışmaları için uygundur; mekanistik ve translasyonel kolorektal kanser araştırmaları için yapışkan, işlenebilir bir in vitro platform sağlar. Birden fazla APC kesilme mutasyonunun varlığı, HT55'i genellikle APC işlev kaybı tarafından tetiklenen, mikrosatellit açısından stabil, kromozomal açıdan kararsız kolorektal kanser alt tipini temsil eden bir model haline getirir.

HT55, 37°C’de, %5 CO₂ içeren nemlendirilmiş bir atmosferde, %10 FBS ile takviye edilmiş EMEM (MEM Eagle, w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO₃, w: EBSS; Cytion ürün kodu 820100a) ortamında, %10 FBS ilavesiyle, %5 CO₂ içeren nemlendirilmiş bir atmosferde 37°C'de muhafaza edilir. Hücreler, yaklaşık %80–90 konfluent hale geldiğinde Accutase kullanılarak alt kültürlenir; önerilen bölme oranı 1:3 ila 1:5 ve tohumlama yoğunluğu 1–3 × 10⁴ hücre/cm²'dir. Besiyeri her 2–3 günde bir yenilenir. Çoğalma süresi yaklaşık 28 saattir.