SW-620 Hücreleri - Kolon Kanseri Araştırmaları ve Deneyleri Üzerindeki Etkisi
SW-620 hücreleri, Dukes evre C insan kolorektal kanser hücre hattını oluşturur. Yüksek tümör oluşturma ve metastaz potansiyeline sahiptirler. Bu nedenle, kanser ve toksikoloji çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadırlar. Bu makale, kolon kanseri hücre hattı SW-620'nin temel özelliklerini ele alacaktır.
- Büyüme Ortamı
- SW-620 hücrelerinin ideal büyümesi için %10 fetal sığır serumu, 4,5 g/L glikoz, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 ve 1,0 mM sodyum piruvat ile takviye edilmiş DMEM besiyeri kullanılır. Besiyeri haftada iki kez yenilenmelidir.
- Çiftlenme Süresi
- SW-620'nin ikiye katlanma süresi 20 ila 26 saat arasındadır.
- Büyüme Tipi
- SW-620 hücre hattı yapışkandır. Hücreler, kültür kabının yüzeyinde tek tabakalar oluşturur.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-1
- Satın alınabileceği yer
- Cytion — SW-620 Siparişi
SW-620 hücrelerinin kökeni ve genel özellikleri
Köken ve genel özellikler, bir hücre hattı hakkında en önemli bilgilerdir. Bunu önceden bilmek, araştırma çalışmalarında bu hücre hattını kullanmayı düşünen araştırmacılar için çok önemlidir. Makalenin bu bölümünde, SW-620 hücre hattının temel özellikleri ve kökeni açıklanacaktır. Başlıca öğrenecekleriniz şunlardır: SW620 hücre hattı nedir? SW-620 hücre hattının özellikleri nelerdir? SW-620'nin kökeni nedir? SW-640 hücre boyutu nedir? Ve SW-620 ile SW-480 arasındaki fark nedir?
- Kolorektal karsinom hücre hattı olan SW-620, kolon adenokarsinomu olan 51 yaşındaki Kafkasyalı bir erkeğin mediatize lenf düğümü lezyonundan elde edilmiştir [1]. Bu hücre hattı, A. Leibovitz ve meslektaşları tarafından depolanmıştır.
- SW-620 hücreleri epitelyal bir morfolojiye sahiptir. Ayrıca mikrovillilere benzeyen küçük, yuvarlak ve bipolar hücrelerden oluşur.
- SW-620 hücrelerinin çapı 14,4 ± 0,3 μm'dir.
- Bu kolon kanseri hücreleri hiperdiploid bir karyotipe sahiptir. SW-620 hücreleri için modal kromozom sayısı 50'dir ve bu sayı 45 ile 53 arasında değişebilir.
SW-480 ile SW-620 Karşılaştırması
SW480 ve SW620, kolorektal kanser hücre hatlarıdır. SW-480 bir primer tümörden elde edilirken, SW-620 metastaz yapmış bir lenf düğümünden oluşturulmuştur. Ayrıca, bu hücre hatlarından geliştirilen ksenograftlar birbirinden farklıdır. SW620 ksenograftları tümör hücre tabakaları oluştururken, SW480 ksenograftları bez benzeri yapılar oluşturur [2]. Her iki hücre hattı da aynı mutasyon profillerine sahiptir.
SW-620 Hücreleri: Hücre kültürü bilgileri
Bir hücre hattının temel hücre kültürü kavramını kavramak, uygun şekilde işlenmesini ve bakımını sağlamak açısından zorunludur. Bu bölümde, SW-620'nin kültürüyle ilgili bilmenize yardımcı olabilecek bazı önemli noktalar belirtilmiştir: SW-620 besiyeri nedir? SW-620'nin ikiye katlanma süresi nedir? SW-620 hücreleri nasıl kültürlenir?
SW-620 Hücrelerinin Kültürüyle İlgili Önemli Noktalar
Çoğalma Süresi:
SW-620'nin ikiye katlanma süresi 20 ila 26 saat arasındadır.
Yapışkan mı, Süspansiyon Halinde mi:
SW-620 hücre hattı yapışkandır. Hücreler, kültür kabının yüzeyinde tek tabaka oluşturur.
Alt Kültür Oranı:
SW-620 hücreleri 1:3 bölme oranında alt kültürlenir. Yapışkan hücreler, magnezyum ve kalsiyum içermeyen fosfat salin tamponu (1X) ile durulanır. Ardından, pasaj çözeltisi olan Accutase eklenir ve hücreler oda sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübe edilir. Taze besiyeri eklenir ve hücreler santrifüjlenir. Ardından, hasat edilen hücreler bir büyüme besiyerinde dikkatlice yeniden süspansiyon haline getirilir ve büyüme için yeni şişelere aktarılır.
Büyüme Ortamı:
SW-620 hücrelerinin ideal büyümesi için %10 fetal sığır serumu, 4,5 g/L glikoz, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 ve 1,0 mM sodyum piruvat ile takviye edilmiş DMEM besiyeri kullanılır. Besiyeri haftada iki kez yenilenmelidir.
Büyüme Koşulları:
SW-620 kolon karsinomu hücreleri, 37°C sıcaklıkta ve %5 CO₂ içeren nemlendirilmiş bir inkübatörde kültürlenir.
Saklama:
Dondurulduktan sonra, SW-620 hücreleri ultra düşük sıcaklıklı dondurucularda veya sıvı azotun buhar fazında -150°C'nin altındaki sıcaklıkta saklanır.
Dondurma Süreci ve Ortamı:
CM-1 veya CM-ACF, SW-620 hücreleri için ideal bir dondurma ortamıdır. SW-620 hücrelerini dondurmak için yavaş dondurma işlemi kullanılır. Bu işlem, sıcaklığın dakikada sadece 1°C düşmesine izin vererek hücre canlılığını korur.
Çözme Süreci:
Dondurulmuş SW-620 hücreleri, önceden 37°C'ye ayarlanmış bir su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca çözdürülür. Çözüldükten sonra, kültür ortamı eklenir ve hücreler santrifüjlenerek dondurma ortamı bileşenleri uzaklaştırılır. Ardından, elde edilen hücre peleti bir büyüme ortamında yeniden süspansiyon haline getirilir ve hücreler büyüme için yeni bir şişeye aktarılır.
Biyogüvenlik Seviyesi:
SW-620 kültürlerinin işlenmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 (BSL-1) laboratuvarı gereklidir.
SW-620 Hücrelerinin Avantajları
Avantajlar
- Kolon Karsinomunun Modellenmesi: SW-620 hücreleri, kolon karsinomu için kritik bir model görevi görür ve özellikle ksenograft modellerinde tümör ve metastaz mekanizmalarının derinlemesine incelenmesine olanak tanır.
- Kanser Araştırması ve Tedavisi: Bu hücreler, kanser biyolojisi, kemoterapötik etkinlik ve anoikis dahil olmak üzere hücre ölümü mekanizmalarının araştırılmasını kolaylaştırır.
- CD133 Ekspresyonu: SW-620 hücrelerinde CD133 ekspresyonu, kanser kök hücre biyolojisi ve bunun tümör oluşumu ile tedavi direnci üzerindeki etkileri hakkında bilgi sağlar.
- Akış Sitometrisi Uygulamaları: Bu hücreler üzerinde yapılan akış sitometrisi analizi, hücre popülasyonlarının, apoptoz düzeylerinin ve proliferasyonun değerlendirilmesini sağlar.
SW-620 hücre hattının araştırma uygulamaları
SW-620 hücrelerinin umut verici bir kullanım alanı bulduğu araştırma alanları aşağıda ele alınmaktadır:
- Kanser araştırması: SW-620, kolorektal kanserin biyolojisini incelemek için paha biçilmez bir hücre modelidir. Araştırmacılar, kanser hücresinin büyümesini, istilasını ve göçünü tetikleyen moleküler mekanizmaları araştırmak için bu in vitro modeli kullanmaktadır. Ayrıca, SW620 hücre hattındaki mutasyonları, yani p53, APC ve KRAS mutasyonlarını incelemek için de kullanılabilir. 2021 yılında yürütülen bir araştırmada, SW620 hücre hattındaki KRAS mutasyonunun yeni bir ilaç olan FL118’e duyarlılık üzerindeki etkisi incelenmiştir. Araştırmacılar, KRAS'ın aşırı ekspresyonunun FL118'in kolorektal hücrelerde indüklediği apoptozu artırdığını, buna karşılık KRAS'ın susturulmasının ise apoptozu azalttığını gözlemlemişlerdir. Bu sonuçlar, KRAS mutasyonu olan kolon karsinomu hastalarında FL118 kullanımının öngörülmesine yardımcı olabilir [3].
- İlaç Taraması ve Geliştirilmesi: SW-620 hücre hattı, kolon kanserine karşı potansiyel ilaç adaylarını taramak ve test etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacılar, hedefli tedavi yaklaşımlarının geliştirilmesine yol açabilecek ilaçların sitotoksisitesini ve etkinliğini değerlendirmek için bu hücreleri kullanmaktadır. Örneğin, bir çalışmada SW-620 hücre hattı kullanılarak tarçın ve karanfilin tekli uçucu yağ bileşiklerinin kolorektal kanser karşıtı etkileri araştırılmıştır [4].
- Metastaz çalışmaları: Yüksek metastaz potansiyeli nedeniyle, SW-620 hücreleri, kanser hücresi metastazının altında yatan moleküler yolakları araştırmak için kullanılabilir. Örneğin, Zhou Yang ve meslektaşları, kolon kanserinin ilerlemesi ve metastazında Grainy-head-like 2 (GRHL2) geninin rolünü ortaya çıkarmıştır. Araştırmacılar, GRHL2 gen ekspresyonunun, epitelyal-mezenkimal geçişi (EMT) baskılayarak kolorektal kanserin ilerlemesini ve metastazını engellediğini öne sürmüştür [5].
SW620 Hücre Hattınızı Koruyun
SW-620 hücreleri: Yayınlar
Bu bölümde, SW-620 hücreleri ile ilgili ilginç ve en çok atıf alan araştırma yayınlarından bazılarına değinilecektir.
Molecular Carcinogenesis (2017) dergisinde yayınlanan bu çalışma, bir polifenol olan urolithin A tedavisinin, kolorektal kanser hücre hattı SW620'de otofajiyi indüklediğini öne sürmüştür. Ayrıca, kanser hücrelerinin metastazını da bastırmıştır.
Oncology Letters (2018) dergisinde yer alan bu makale, SW-620 hücrelerini kullanarak bir bis-benzilizokinolin alkaloid olan tetrandrinin anti-metastatik potansiyelini araştırmıştır.
CDCA3, kolorektal kanserde NF-κB/siklin D1 sinyal yolunu aktive ederek hücre çoğalmasını teşvik eder
Bu makale, Biochemical and Biophysical Research Communications (2018) dergisinde yayınlanmıştır. Makalede, CDCA3 (Hücre bölünme döngüsü ile ilişkili 3) geninin kolorektal kanser hücrelerinde yukarı doğru düzenlendiği ve NF-κB sinyal yolunu aktive ederek bu hücrelerin çoğalmasını teşvik ettiği öne sürülmüştür.
International Journal of Molecular Sciences (2021) dergisinde yayınlanan bir çalışmada, bispesifik bir antikor (ABL001) ile kemoterapötik ilaçların SW620 ksenograftındaki tümör ilerlemesi üzerindeki sinerjik etkisi araştırılmıştır.
Bu makale Cells (2018) dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışmada, Bacopa monnieri'den elde edilen Bacopaside II ekstraktının SW-620 ve diğer kolorektal kanser hücreleri üzerindeki antitümör aktiviteleri araştırılmıştır.
SW-620 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
Aşağıda, SW-620 kolon karsinomu hücrelerini ele alan birkaç çevrimiçi kaynak yer almaktadır.
- SW-620 transfeksiyonu: Bu makale, SW-620 hücre hattının stabil transfeksiyonu için protokolü kısaca açıklamaktadır.
Aşağıdaki bağlantı, SW620 hücre kültürü protokolünü içermektedir.
- SW-620 hücre kültürü protokolü: Bu bağlantı, SW-620 hücre hattı hakkında temel bilgiler sağlar. Ayrıca, SW-620 hücrelerinin alt kültürleme protokolünü öğrenmenize ve kriyoprezervasyonlu ve çoğalan SW-620 kültürlerini yönetmenize yardımcı olacaktır.
- Hücre kültürü protokolleri: Bu video, yapışkan hücrelerin pasajlanması, dondurulması ve çözülmesi protokollerini öğrenmek için harika bir kaynaktır.
SW620 Hücreleri Hakkında Sıkça Sorulan Sorular
SW620 hücreleri, kolon kanserli bir hastanın lenf nodu metastazından elde edilen insan kolorektal adenokarsinom hücreleridir ve bu da onları kanser araştırmaları için önemli kılmaktadır.
SW620 hücreleri genellikle 15 ila 30 mikrometre arasında değişen bir çapa sahiptir, ancak bu kültür koşullarına bağlı olarak değişebilir.
SW620 hücreleri, TP53 geni de dahil olmak üzere çeşitli mutasyonlar sergiler. Bu mutasyonlar hücre morfolojisini etkileyerek popülasyon içinde farklı şekil ve boyutlara yol açabilir.
SW620 ve SW480 hücrelerinin her ikisi de kolon adenokarsinomlarından türetilmiştir, ancak SW620 hücreleri metastatik bir bölgeden gelirken, SW480 hücreleri primer tümörden kaynaklanır. Bu farklılık genetik yapılarını, kültürdeki davranışlarını ve tedavilere yanıtlarını etkileyebilir.
SW620 hücreleri, özellikle ksenograft fare modellerinde tümör oluşturma yetenekleri ve CD133 gibi kanser kök hücre belirteçlerini ifade etmeleri nedeniyle tümör oluşumunun incelenmesinde etkilidir.
Evet, SW620 hücreleri, çeşitli kanser terapötiklerine ve çevresel koşullara yanıt verdikleri için apoptoz ve anoikis dahil olmak üzere hücre ölüm yollarını incelemek için kullanılır.
SW620 hücrelerinin yüksek metastatik potansiyeli ve metastatik bir lenf düğümünden köken almaları, onları kolon kanserinin yayılmasını incelemek için uygun bir model haline getirmektedir.
Akış sitometrisi, araştırmacıların SW620 hücrelerinin CD133 ifade kalıpları ve apoptoz derecesi veya anoikise duyarlılık gibi özelliklerini analiz etmelerine olanak tanır.
SW620 hücreleri, immün yetmezlikli ksenograft fare modellerine eklendiğinde yüksek bir tümörijenik potansiyele sahiptir, bu da onları kanser ilerlemesinin in vivo çalışmaları için değerli kılar.
Kaynakça
- Siekmann, W. ve ark., Lidokain ve ropivakainin primer (SW480) ve metastatik (SW620) kolon kanseri hücre hatları üzerindeki etkisi. Oncol Lett, 2019. 18(1): s. 395-401.
- Hewitt, R.E. ve ark., Kolon kanseri ilerlemesi modelinin doğrulanması. J Pathol, 2000. 192(4): s. 446-54.
- Thangaiyan, R. ve ark., Kras mutasyon alt tipleri, kolorektal kanser hücrelerinin survivin, Mcl-1, XIAP, cIAP2 ve MdmX'in yeni bir inhibitörü olan FL118'e duyarlılığını belirgin şekilde etkilemektedir. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): s. 7458.
- Petrocelli, G. ve ark., Kolorektal kanserin (CRC) önlenmesi ve tedavisi için bitki esansiyel yağlarında bulunan moleküller. Molecules, 2021. 26(4): s. 885.
- Yang, Z. ve ark., GRHL2, epitelyal-mezenkimal geçişi baskılayarak kolorektal kanserin ilerlemesini ve metastazını engeller. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): s. 1195-1205.