SiHa Hücreleri - Rahim Ağzı Kanseri Araştırmalarına Işık Tutuyor
SiHa hücreleri, biyomedikal araştırmalarda yaygın olarak kullanılan rahim ağzı kanseri hücreleridir. Mükemmel transfeksiyon konakçıları oldukları için gen ekspresyonu çalışmalarına uygundurlar. İnsan kökenli olmaları ve rahim ağzı kanseriyle ilişkili olmaları nedeniyle, bu hücreler ağırlıklı olarak kanser biyolojisi, viroloji ve ilaç geliştirme çalışmalarında kullanılmaktadır.
- Büyüme Ortamı
- SiHa hücrelerinin ideal büyümesi için %10 FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 ve Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) içeren Eagle's minimum essential medium (EMEM) kullanılır. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez değiştirilir.
- Çiftlenme Süresi
- SiHa hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 17 saattir.
- Büyüme Tipi
- SiHa, yapışkan bir hücre hattıdır.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-1
- Temin edilebilir
- Cytion — SiHa Siparişi
SiHa hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
Bir hücre hattının kökenini ve genel özelliklerini anlamak, araştırmanızda kullanımını etkilediği için çok önemlidir. Bu makale bölümünde, SiHa hücre hattının kökeni, ayırt edici özellikleri ve çok daha fazlası hakkında bilgi edineceksiniz: SiHa kanser hücre hattı nedir? SiHa hücreleri HPV nedir? SiHa hücre hattının kökeni nedir? SiHa'nın morfolojisi nedir?
- SiHa, servikal karsinom hücre hattı, skuamöz hücreli kanseri olan Asyalı bir kadının (55 yaşında) primer rahim biyopsisinden elde edilen fragmanlardan türetilmiştir [1].
- SiHa hücre hattı, hipertriploid bir karyotip sergiler. Hücrelerin çoğunun ortalama kromozom sayısı 69 ile 72 arasındadır. Ancak, hücrelerin yaklaşık %24’ü 71’lik bir modal kromozom sayısına sahiptir.
- SiHa hücreleri, insan papilloma virüsü 16 pozitifdir. Hücre başına yaklaşık 1 ila 2 kopya HPV genom entegrasyonu sergilerler [2].
- Bu servikal kanser hücreleri epitelyal bir morfoloji sergiler.
SiHa hücre hattı: Kültivasyon bilgileri
Bir hücre hattı kültürünü sürdürmek, kültürlemeyle ilgili tüm önemli noktaları öğrenene kadar kolay değildir. Şunları bilmelisiniz: SiHa'nın ikiye katlanma süresi nedir? SiHa hücre besiyeri nedir? SiHa hücre hattı nasıl kültürlenir?
SiHa Hücrelerinin Kültürü İçin Önemli Noktalar
Çoğalma Süresi:
SiHa hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 17 saattir.
Yapışkan mı, Süspansiyon Halinde mi:
SiHa, yapışkan bir hücre hattıdır.
Alt Kültür Oranı:
SiHa hücreleri için alt kültür oranı 1:2 ile 1:4 arasındadır. Hücrelerin pasajlanması için, yapışkan hücreler 1x PBS ile durulanır. Accutase çözeltisi eklenir ve hücreler ortam sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübe edilir. Ardından, kültür besiyeri eklenir ve hücreler santrifüjlenir. Hücre peleti yeniden süspansiyona alınır ve hücreler, kültürleme için yeni şişeye aktarılır.
Büyüme Ortamı:
SiHa hücrelerinin ideal büyümesi için %10 FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 ve Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) içeren Eagle's minimum essential medium (EMEM) kullanılır. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez değiştirilir.
Büyüme Koşulları:
SiHa hücreleri, %5 CO₂ beslemesi olan 37°C nemlendirilmiş inkübatörde muhafaza edilir.
Saklama:
Dondurulmuş SiHa rahim ağzı kanseri hücre hattı şişeleri, elektrikli dondurucuda -150°C'nin altındaki sıcaklıkta veya daha uzun süreli saklama için sıvı azotun buhar fazında saklanır.
Dondurma Süreci ve Ortamı:
SiHa hücrelerinin dondurulması için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamı kullanılır. Hücrelerin canlılığını korumak amacıyla, dakikada sadece 1 °C'lik bir sıcaklık düşüşüne izin veren yavaş dondurma yöntemi kullanılır.
Çözme Süreci:
Dondurulmuş hücreler, küçük bir buz topakçığı kalana kadar 37°C'lik su banyosunda 40 ila 60 saniye tutulur. Ardından, taze büyüme ortamı eklenir ve hücreler, dondurma ortamı bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Hücre peleti yeniden süspansiyon haline getirilir ve hücreler, büyüme amacıyla bir kültür şişesine aktarılır.
Biyogüvenlik Seviyesi:
SiHa hücre kültürlerinin işlenmesi ve muhafaza edilmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar gereklidir.
SiHa hücre hattının avantajları ve dezavantajları
Diğer insan karsinom hücre hatları gibi, SiHa da belirli avantaj ve dezavantajlarla ilişkili bazı belirgin özelliklere sahiptir. Burada, bunlardan birkaç önemli olanını ele aldık.
SiHa Rahim Ağzı Kanseri Hücre Hattının Avantajları
- Rahim Ağzı Kanseri Modeli
- Servikal skuamöz hücreli karsinomdan türetilmiştir.
- Rahim ağzı kanserinin mekanizmalarını, büyümesini ve gelişimini incelemek için kullanılır.
- DNA onarımı, hücre döngüsü düzenlemesi ve tümör baskılanmasıyla ilişkili p53+ ve pRB+ genlerini eksprese eder.
- Tümör Oluşturma Potansiyeli
- SiHa hücreleri tümör oluşturma özelliğine sahiptir ve çıplak farelerde düşük farklılaşmış derece III epidermoid tümörleri indükleyebilir.
- İn vivo kanser araştırmaları ve anti-kanser tedavilerinin test edilmesinde kullanılır.
SiHa Hücrelerinin Dezavantajları
- Çoğalma Hızı
- SiHa hücreleri hızla çoğalır ve bu da aşırı büyümeye yol açar.
- Sık sık pasajlama gerektirir; bu da genetik instabilite riskini artırır ve zamanla hücre davranışını etkileyebilir.
SiHa hücrelerinin araştırma alanlarındaki uygulamaları
SiHa hücre hattı, rahim ağzı kanseri araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattının birkaç özel uygulaması burada ele alınmaktadır.
- İnsan papilloma virüsü (HPV) ile ilgili çalışmalar: SiHa hücreleri HPV 16 pozitif olduğundan, insan papilloma virüsü enfeksiyonunu, moleküler mekanizmalarını ve rahim ağzı kanserinin gelişimi ve ilerlemesindeki rolünü incelemek için değerli birer araçtır. Araştırmacılar ayrıca bu hücreleri, viral replikasyonu, entegrasyonu ve konak hücre süreçleri üzerindeki etkisini araştırmak için kullanmaktadır. 2020 yılında yapılan bir çalışmada, CRISPR teknolojisi kullanılarak HPV E6/E7 onkoproteinlerinin rahim ağzı kanseri gelişimindeki rolü incelenmek üzere SiHa hücre hattı kullanılmıştır. Bulgular, E6/E7 genlerinin baskılanmasının SiHa hücrelerinin büyümesini engellediğini ve apoptozu tetiklediğini ortaya koymuştur. Bu nedenle, bu viral genler, HPV ile ilişkili rahim ağzı kanserine karşı tedaviler geliştirmek için önemli ilaç hedefleri olarak hizmet edebilir [3].
- Kanser biyolojisi: SiHa hücreleri, kanserin gelişimi, ilerlemesi, metastazı ve invazyonu dahil olmak üzere rahim ağzı kanseri biyolojisini incelemek için paha biçilmez bir model görevi görür. Araştırmacılar, rahim ağzı kanserinin gelişimi ve büyümesine katkıda bulunan genetik mutasyonları ve altta yatan moleküler yolakları araştırmak için bu hücreleri kullanmaktadır; örneğin, bir çalışmada SiHa hücreleri kullanılmış ve SEC61G (SEC61 translokon gama alt birimi) ekspresyonunun artmasının, MAPK kaskadının aktivasyonu yoluyla rahim ağzı kanseri hücrelerinin çoğalmasını teşvik ettiği bulunmuştur [4].
- İlaç taraması ve testleri: SiHa, HPV ile ilişkili rahim ağzı kanserine özgü potansiyel antikanser ilaçlarının etkinliğini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan bir rahim ağzı kanseri hücre hattıdır. Araştırmacılar, bu hücreleri kullanarak ilaçların antiproliferatif, apoptotik ve antimetastatik potansiyelini araştırmaktadır. Örneğin, 2019 yılında yapılan bir çalışmada, Vatica diospyroides Symington Tip SS meyve özütlerinin SiHa rahim ağzı kanseri hücre hattı üzerindeki sitotoksik potansiyeli incelenmiştir [5].
Araştırmalarınız için SiHa hücreleri!
SiHa Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları
SiHa servikal skuamöz karsinom hücre hattını ele alan bazı önemli ve sıkça atıf yapılan araştırma yayınları bulunmaktadır.
OncoTargets and Therapy dergisinde (2019) yayınlanan bu makale, doğal bir bileşik olan aloe-emodinin, SiHa servikal kanser hücrelerinde HPV E6/E7 ve glikoz metabolizmasıyla ilişkili apoptotik etkiler gösterdiğini öne sürmüştür.
Bu makale, 2022 yılında Future Journal of Pharmaceutical Sciences dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışma, Excoecaria agallocha (L.) bitkisinin yaprak özütünün SiHa rahim ağzı kanseri hücre hattındaki antitümör aktivitelerini araştırmıştır.
Journal of Sol-Gel Science and Technology dergisinde (2022) yayınlanan bu çalışma, 1,10-fenantrolin molekülünün çinko sülfat nanopartikülleriyle birleşmesi üzerine SiHa hücrelerinde önemli antiproliferatif etkiler sergilediğini ortaya koymuştur.
Bu araştırma 2019 yılında Oncology Reports dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma, doğal bir ürün olan Astragaloside IV’ün, TGF‑β1 aracılı PI3K ve MAPK sinyal yolaklarını modüle ederek SiHa hücrelerinin göçünü ve istilasını bastırdığını ortaya koymuştur.
Biomedicine & Pharmacotherapy dergisinde (2020) yayınlanan bu çalışma, IFI16’nın (interferon-gama ile indüklenebilir protein 16) STING-TBK1-NF-kB yolunu aktive ederek PD-L1 genini düzenlediğini ve böylece SiHa rahim ağzı kanseri hücrelerinin büyümesini teşvik ettiğini ortaya koymuştur.
SiHa Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
İşte SiHa hücrelerini konu alan bazı çevrimiçi kaynaklar.
- SiHa hücre transfeksiyonu: Bu araştırma makalesi, SiHa rahim ağzı kanseri hücrelerinin muhafaza edilmesi ve SiHa hücre transfeksiyonu için bir protokol içermektedir.
Aşağıdaki bağlantı, SiHa hücreleri için hücre kültürü bilgilerini içermektedir.
- SiHa hücre hattı: Bu web sitesi, SiHa hücre hattı hakkında birçok değerli veri içermektedir. Bunlar arasında büyüme ortamları, kültürleme koşulları, SiHa hücrelerinin alt kültürlenmesi için protokoller ve bu hücrelerin proliferatif ve kriyoprezervatif kültürlerinin işlenmesi ile ilgili bilgiler yer almaktadır.
SiHa Servikal Karsinom Hücreleri Hakkında Sık Sorulan Sorular
Kaynakça
- Melzer, C., J. von der Ohe ve R. Hass, Kısa derleme: Mezenkimal stroma/kök hücre benzeri hücrelerin kanser hücreleriyle etkileşimi, terapötik potansiyel sunmaktadır. Stem cells, 2018. 36(7): s. 951-968.
- Ostrowska, K.M. ve ark., Titreşim spektroskopisi kullanılarak yüksek riskli insan papilloma virüsünün rahim ağzı kanseri hücrelerinin biyokimyasal bileşimi üzerindeki etkisinin araştırılması. Analyst, 2010. 135(12): s. 3087-3093.
- Chen, Y. ve ark., CRISPR/Cas13a sistemi ile insan papilloma virüsü E6/E7 mRNA’larının kesilmesi yoluyla insan serviks kanseri hücrelerinin in vitro ve in vivo büyümesinin engellenmesi. Antiviral Research, 2020. 178: s. 104794.
- Fan, Y. ve ark., SEC61G, MAPK sinyal yolunu aktive ederek rahim ağzı kanseri proliferasyonunu teşvik eder. Disease Markers, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A. ve ark., Vatica diospyroides symington tip SS'den elde edilen meyve özütlerinin antikanser potansiyeli ve bunların rahim ağzı kanseri hücre hatlarının programlanmış hücre ölümü üzerindeki etkisi. The Scientific World Journal, 2019. 2019.
