CTX Hücreleri

CTX (CTX0E03 olarak da adlandırılır), ilk trimesterdeki insan fetal kortikal nöroepitelinden elde edilen, koşullu olarak ölümsüzleştirilmiş bir insan nöral kök hücre hattıdır. Bu hat, yalnızca 4-hidroksitamoksifen (4-OHT) varlığında hücre çoğalmasını tetikleyen bir c-mycER^TAM füzyon transgeninin retroviral entegrasyonu yoluyla oluşturulmuştur. 4-OHT yokluğunda ve mitojen içermeyen besiyerinde, CTX0E03 hücreleri büyüme durması yaşar ve çok potansiyelli farklılaşma kapasitesini koruyarak nöronlara ve astrositlere farklılaşır. Bu hücre hattı klonaldır, normal insan karyotipine (46,XY) sahiptir ve potansiyel klinik uygulama amacıyla GMP uyumlu koşullar altında geliştirilmiştir.

CTX0E03, iskemik inme (MCAo sıçan modeli) preklinik modellerinde değerlendirilmiş ve implante edilen hücreler, duyu-motor fonksiyonda önemli ölçüde iyileşme sağlamıştır. Bu hücre hattı, inme tedavisi için klinik denemelere girmiştir. Ayrıca nöral kök hücre biyolojisi, kortikal nöron farklılaşması, Alzheimer hastalığı araştırmaları (Abeta toksisite çalışmaları) ve nörofarmakolojik tarama için in vitro model olarak da kullanılmaktadır. Koşullu ölümsüzleştirme sistemi, nakilden önce 4-OHT'nin uzaklaştırılmasıyla proliferasyonun durdurulabilmesi sayesinde CTX0E03'ü güvenlik ve etkinlik çalışmaları için özellikle uygun hale getirir.

CTX0E03, N2 takviyesi, EGF (20 ng/ml) ve FGF-2 (20 ng/ml) ile takviye edilmiş DMEM/F12 besiyerinde, laminin kaplı yüzeylerde 37°C'de %5 CO₂ ortamında 4-OHT (1 μM) ilavesiyle çoğaltılır. Farklaşma için büyüme faktörleri ve 4-OHT uzaklaştırılır. Bu hücre hattı, biyogüvenlik seviyesi 1 olarak sınıflandırılmıştır (entegre c-mycERTAM transgeni nedeniyle Almanya’da GMO-S1 olarak sınıflandırılır). Kullanıcılar, kendi yetki alanlarında geçerli olan GDO yönetmeliklerine uymalıdır.