CTX Hücreleri

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) biyolojik araştırmalarda çok çeşitli memeli hücrelerinin büyümesini desteklemek için tasarlanmış çok yönlü ve yaygın olarak kullanılan bir bazal ortamdır. Primer fibroblastlar, nöronlar, glial hücreler, HUVEC'ler, düz kas hücrelerinin yanı sıra HeLa, 293, Cos-7 ve PC-12 gibi popüler hücre hatlarının kültürü için ideal bir ortam olarak hizmet eder.
DMEM'i diğer ortamlardan ayıran şey benzersiz bileşimidir. Orijinal Eagle's Minimal Essential Medium'a kıyasla amino asit ve vitamin konsantrasyonunda dört katlık etkileyici bir artış içerir. Başlangıçta düşük glikoz (1 g/L) ve sodyum piruvat ile geliştirilen DMEM, sıklıkla sodyum piruvat içeren veya içermeyen daha yüksek glikoz seviyeleri ile kullanılmaktadır. DMEM'in protein, lipid veya büyüme faktörü içermemesi, takviye gerektirmesi dikkat çekicidir. Optimum büyümeyi sağlamak için yaygın bir yaklaşım DMEM'i %10 Fetal Sığır Serumu (FBS) ile desteklemektir. Ayrıca DMEM, fizyolojik pH'ı korumak için %5-10 CO2 ortamı gerektiren bir sodyum bikarbonat tampon sistemi kullanır.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM), çeşitli yapışık hücre fenotiplerinin büyüme ihtiyaçlarını karşılayan, hücre ve doku kültürü için tanımlanmış ortamlar arasında oldukça saygındır. Dulbecco'nun modifikasyonu olarak bilinen gelişmiş ek formülasyon sayesinde 1950'lerde tavuk hücrelerini yetiştirmek için geliştirilen orijinal Eagle's Medium'u aşmaktadır. Bu modifikasyon, belirli amino asitlerin ve vitaminlerin içeriğini orijinal besiyerine kıyasla dört kata kadar önemli ölçüde artırır.
Hücre kültürü alanında DMEM, birincil hücreler, kök hücreler ve dönüştürülmüş hücreler dahil olmak üzere farklı hücre tipleri için büyüme ortamı olarak hayati bir rol oynamaktadır. Araştırmacılar ayrıca ilaç keşfi, doku mühendisliği ve hücre sinyal yollarının incelenmesi gibi çok çeşitli araştırma uygulamaları için DMEM'in değiştirilmiş versiyonunu kullanmaktadır.

Kalite Kontrol

Steril filtreli


Depolama ve Raf Ömrü

2°C ila +8°C arasında, ışıktan koruyarak saklayın.
Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6-8 hafta içinde kullanın.


Nakliye Koşulları

Ortam sıcaklığı


Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için dondurmaktan ve sık sık +37°C'ye kadar ısıtmaktan kaçının.
Besiyerini 37°C'nin üzerinde ısıtmayın veya mikrodalga fırın gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın.
Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı çıkarın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına kadar ısıtın.


Kompozisyon



Kategori
Bileşenler
Konsantrasyon (mg/L)


Amino Asitler
Glisin
30.00



L-Arginin HCl
84.00



L-Sistin 2 HCl
62.57



L-Glutamin
584.00



L-Histidin HClH2O
42.00



L-İzolösin
105.00



L-Lösin
105.00



L-Lizin HCl
146.00



L-Metiyonin
30.00



L-Fenilalanin
66.00



L-Serin
42.00



L-Threonine
95.00



L-Triptofan
16.00



L-Tirozin 2 Na 2H2O
103.79



L-Valine
94.00


Vitaminler
Kolin klorür
4.00



D-Kalsiyum Pantotenat
4.00



Folik Asit
4.00



miyo-İnositol
7.20



Nikotinamid
4.00



Piridoksal HCl
4.00



Riboflavin
0.40



Tiamin HCl
4.00


İnorganik Tuzlar
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Diğer Bileşenler
D-Glikoz
4500.00



Fenol Kırmızı Sodyum Tuzu
15.90



Sodyum Piruvat
110.00

EDTA ve Fenol Kırmızısı İçeren Accutase Hücre Ayrıştırma Çözeltisi – 100 ml

Accutase, yapışkan memeli hücrelerini standart doku kültürü plastik kaplarından ve yapışma kaplı yüzeylerden ayırmak için tripsin/EDTA'ya nazik bir alternatif olarak tasarlanmış, kullanıma hazır, steril filtrelenmiş bir hücre ayırma çözeltisidir. Dengeli bir tuz çözeltisi içinde proteolitik ve kollajenolitik enzim aktivitesini birleştirerek etkili ancak kontrollü bir ayrışma sağlar, hücre yüzeyi proteinlerini korur ve yüksek pasaj sonrası canlılık ve hızlı yeniden yapışmayı destekler.

Accutase formülasyonu, görsel pH göstergesi olarak EDTA ve fenol kırmızısı içeren Dulbecco fosfat tamponlu salin (DPBS) bazlıdır. Enzimler memeli ve bakteriyel kökenli değildir, bu da Accutase'i kök hücre araştırmaları, aşı iş akışları ve hayvan veya mikrobiyal kaynaklı kontaminantların en aza indirilmesi gereken tüm uygulamalar için özellikle uygun hale getirir. Çözelti 37 °C'de kendiliğinden inhibe olur, bu nedenle ayrılma işleminden sonra nötralize edici reaktif veya serum içeren ortam gerekmez – hücreler doğrudan taze ortama aktarılabilir.

Temel Özellikler

Kullanıma hazır 1x steril filtrelenmiş sıvı – seyreltme veya sulandırma gerekmez
Nazik ayrışma için birleşik proteolitik ve kollajenolitik enzim aktivitesi
Partiler arası tutarlılık için her parti, tanımlanmış bir ayrışma aktivitesine göre standartlaştırılmıştır
Memeli ve bakteri kaynaklı olmayan enzim
37 °C'de kendiliğinden inhibe olur – nötralize edici çözeltiye gerek yoktur
EDTA içeren Dulbecco’s PBS içinde formüle edilmiştir
Görsel pH göstergesi olarak fenol kırmızısı içerir
pH 6,8 – 7,8


Tipik Uygulamalar
Accutase, insan embriyonik kök hücreleri (hESC'ler), insan indüklenmiş pluripotent kök hücreleri (iPSC'ler), nöral kök hücreler, birincil nöronlar ve HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ve A549 gibi rutin olarak kültürlenen yapışkan hücre hatları dahil olmak üzere çok çeşitli yapışkan ve hassas hücre tiplerini nazikçe ayrıştırır. Tipik kullanım örnekleri şunlardır:

Yapışkan memeli hücrelerinin rutin alt kültürü ve pasajlanması
hESC'lerin, iPSC'lerin ve diğer hassas hatların nazik tek hücre ayrıştırması
Akış sitometrisi ve FACS analizi için numune hazırlığı
Epitop bütünlüğünün önemli olduğu hücre yüzeyi belirteçlerinin analizi
Hücre göçü, proliferasyon ve apoptoz testleri
Serum açlığı ve onkogen transfeksiyon çalışmaları ile durgunluk testleri
Tümör hücresi ve nöral kret hücresi göç testleri
Biyoreaktör iş akışlarında üretim ölçeğinin büyütülmesi

Rutin çalışmalar için, 75 cm2 kültür yüzeyi başına yaklaşık 10 ml Accutase uygulayın ve oda sıcaklığında 5–10 dakika inkübe edin. Optimum inkübasyon süresi her hücre hattı için ayrı ayrı belirlenmelidir ve bir saati geçmemelidir. İlave etmeden önce, kalıntı serum ve iki değerlikli katyonları gidermek için hücre tabakasını kalsiyum ve magnezyum içermeyen DPBS gibi Ca2+/Mg2+ içermeyen bir tuz çözeltisiyle durulayın.

Kullanım ve Saklama
Açılmamış şişeyi -15 °C veya altında dondurulmuş olarak saklayın. Oda sıcaklığında veya +2 °C ile +8 °C arasında bir gece boyunca çözdürün. Yüksek sıcaklıklar enzim aktivitesini azalttığından, Accutase'i 37 °C'lik su banyosunda çözdürmeyin. Çözdürme işleminden sonra, çözelti +2 °C ile +8 °C arasında 2 aya kadar saklanabilir; oda sıcaklığında saklamayın. Uygulamadan önce reaktifi 37 °C'ye önceden ısıtmayın – oda sıcaklığında yıkanmış hücrelere doğrudan ekleyin. Uzun süreli raf ömrü için, tekrarlanan çözme döngülerinden kaçınmak amacıyla tek kullanımlık alıkoyma önerilir. Her zaman aseptik koşullar altında çalışın.

Kalite
Sıkı kalite standartları altında üretilmiştir. Accutase'in her partisi, partiden partiye tutarlı ve tekrarlanabilir performans sağlamak için steril filtreden geçirilir ve sterilite, pH, görünüm ve ayrışma aktivitesi açısından test edilir.

Ürün Özellikleri



Özellik
Ayrıntı



Ürün türüHücre ayrıştırma / disosiyasyon reaktifi
BiçimSteril filtrelenmiş sıvı, kullanıma hazır
Hacim100 ml
Çalışma konsantrasyonu1x (kullanıma hazır)
Enzim aktivitesiKombine proteolitik ve kollajenolitik
Enzim kaynağıMemeli ve bakteri kaynaklı olmayan
Tampon sistemiEDTA içeren Dulbecco’s PBS
pH göstergesiFenol kırmızısı
pH aralığı6,8 – 7,8
GörünümBerrak, soluk kırmızı ila turuncu renkli çözelti
Saklama sıcaklığı-15 °C veya altında
Çözüldükten sonra stabilite+2 °C ila +8 °C arasında 2 aya kadar
Önerilen kullanım hacmi75 cm2 kültür yüzeyi başına ~10 ml
Tipik inkübasyon süresiOda sıcaklığında 5 – 10 dakika
Nakliye koşullarıKuru buzda dondurulmuş
Kullanım amacıYalnızca araştırma amaçlı ve ileri üretim için



Formülasyon (Litre Başına Bileşim)



Bileşen
Konsantrasyon (mg/L)




İnorganik Tuzlar

Sodyum klorür (NaCl)8000,00
Disodyum hidrojen fosfat (Na2HPO4)1150,00
Potasyum klorür (KCl)200,00
Potasyum dihidrojen fosfat (KH2PO4)200,00

Diğer Bileşenler

EDTA · 4Na (tetrasodyum EDTA)220,00
Fenol kırmızısı3,00
Özel enzim karışımı (proteolitik ve kollajenolitik aktivite)1x



Accutase, Innovative Cell Technologies, Inc. şirketinin tescilli ticari markasıdır.

Ürüne Genel Bakış
Hacim: 100 ml Depolama: ≤-15°C Sterilite: Steril filtrelenmiş
Antibiyotik/Antimikotik Solüsyon (100x), hücre kültürü ve ilgili laboratuvar uygulamalarında mikrobiyal kontaminasyon risklerini azaltmak için tasarlanmış steril, kullanıma hazır bir konsantredir. Bu 100x çözelti, Gram-pozitif ve Gram-negatif bakterilere, mayalara ve filamentli mantarlara karşı geniş spektrumlu antimikrobiyal aktivite sağlayan iyi bilinen bir penisilin, streptomisin ve amfoterisin B kombinasyonu içerir. Formülasyon, ökaryotik hücre kültürlerinde, bakteriyel besiyerlerinde ve kontaminasyona duyarlı diğer sistemlerde kullanıma uygundur ve temiz ve tutarlı laboratuvar işlemlerini destekler.
Uygulama ve Faydaları Rutin araştırma protokolleri için optimize edilen bu çözüm, hücre kültürü iş akışlarında aseptik koşulları korumak için yaygın olarak kullanılmaktadır. Kontaminasyona duyarlı ortamlarda güvenilir performans sunarak araştırmacıların hücre sağlığından veya deneysel tekrarlanabilirlikten ödün vermeden mikrobiyal aşırı büyüme riskini azaltmalarına yardımcı olur. Steril filtreli formülasyon, ek çözündürme adımlarına olan ihtiyacı ortadan kaldırarak kolaylaştırılmış besiyeri hazırlığını destekler ve günlük laboratuvar prosedürlerindeki değişkenliği azaltır.
Kullanım ve Uyumluluk Standart çalışma konsantrasyonları elde etmek için çözeltiyi 1:100 oranında tam kültür ortamınızda seyreltin. Ürün çok çeşitli memeli hücre hatları ve bazal besiyerleri ile uyumludur. Tutarlı stok mevcudiyeti sayesinde araştırmacılar güvenilir tedarik sürekliliğinden ve basitleştirilmiş lojistik planlamasından faydalanır. Çözelti ≤ -15 °C'de saklanmalı ve stabiliteyi korumak için tekrarlanan dondurma-çözme döngülerinden korunmalıdır. Yalnızca araştırma amaçlı kullanım içindir. Tanısal veya terapötik prosedürlerde kullanım için değildir. İnsanlarda veya hayvanlarda kullanım için değildir.