CHO-FCGR2B Hücreleri
€1.900,00*
Ürünler, kuru buzla donmuş halde kriyotüplerde gönderilir. Her kriyotüp, tipik olarak yapışkan hatlar için 3 × 10 6 hücre veya süspansiyon hatları için 5 × 106 hücre içerir (ayrıntılar için parti CoA'sına bakın).
Genel bilgi
| Açıklama | Yasal Uyarı: Hücre hatları için gösterilen fiyatlar yalnızca akademik/kar amacı gütmeyen müşteriler içindir. Ticari kuruluşlar için fiyat yaklaşık 6.250 €'dur. CHO-FCGR2B hücreleri, immünoglobulin G'nin (IgG) Fc bölgesi için düşük afiniteli bir inhibe edici reseptör olan insan Fc gama reseptörü IIB'yi (FcγRIIB; FCGR2B/CD32B) stabil bir şekilde eksprese etmek üzere tasarlanmış rekombinant Çin hamster yumurtalık (CHO) hücreleridir. FcγRIIB, B hücreleri, dendritik hücreler, monositler, makrofajlar ve diğer immün hücre popülasyonlarında yaygın olarak eksprese edilir ve burada immün aktivasyonun kritik bir negatif düzenleyicisi olarak işlev görür. Aktive edici reseptörlerle birlikte bağlandığında, FcγRIIB, immün reseptör tirozin bazlı inhibe edici motifi (ITIM) aracılığıyla fosfatazları devreye sokar ve böylece antikor aracılı immün yanıtlarda rol oynayan aşağı akış sinyal yolaklarını baskılar. FcγRIIB sinyal iletiminin düzensizliği, otoimmün hastalıklar, kronik inflamasyon ve antikor terapilerine karşı değişmiş yanıtlarla ilişkilendirilmiştir. CHO-FCGR2B hücreleri, Fc aracılı etkileşimleri, reseptör seçiciliğini ve inhibe edici sinyal mekanizmalarını değerlendirmek amacıyla terapötik antikor geliştirme ve immünoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücreler, IgG alt sınıfı bağlanmasının, Fc mühendisliği stratejilerinin, immün kompleks etkileşimlerinin ve Fcγ reseptör yolaklarının antikora bağlı modülasyonunun kantitatif değerlendirmesini destekler. Bu hücreler, monoklonal antikorların, bispesifik antikorların, Fc füzyon proteinlerinin ve FcγRIIB bağlanmasını değiştirmek üzere tasarlanmış gliko-mühendislik biyolojik ürünlerin taranmasında özellikle değerlidir. CHO-FCGR2B modelleri ayrıca, Fc reseptör spesifikliğini ve fonksiyonel aktivitesini karakterize etmeyi amaçlayan akış sitometrisi analizlerinde, reseptör doluluk çalışmalarında, raportör analizlerinde ve yüksek verimli tarama platformlarında sıklıkla uygulanmaktadır. |
|---|---|
| Organizma | Çin hamsterı |
| Doku | Yumurtalık |
| Hastalık | Çin hamster yumurtalık hücresi, neoplastik olmayan; FcγRIIB (CD32B/FCGR2B) yüzey ekspresyonu için genetik olarak modifiye edilmiş |
| Uygulamalar | Antikor Fc mühendisliği; inhibe edici Fc reseptörü çalışmaları; ADCP araştırmaları; immünoterapi geliştirme; akış sitometrisi |
Özellikler
| Yaş | Yetişkin |
|---|---|
| Cinsiyet | Kadın |
| Morfoloji | Epitel benzeri |
| Hücre tipi | Yumurtalığın epitel hücresi |
| Büyüme özellikleri | Yapışık/süspansiyon |
Düzenleyici Veriler
| Atıf | CHO-FCGR2B (Cytion katalog numarası 305982) |
|---|---|
| Biyogüvenlik seviyesi | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A8W4 |
| GDO Durumu | GMO-S1: Bu CHO hücre hattı, reseptör fonksiyon analizlerini destekleyen bir FCGR2B ekspresyon kaseti içerir. Bu sınıflandırma yalnızca Almanya sınırları içinde geçerlidir ve başka ülkelerde farklılık gösterebilir. |
Biyomoleküler Veriler
| İfade edilen reseptörler | FCGR2B/CD32B |
|---|
Elleçleme
| Kültür Ortamı | Yapışık kültürler için: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a) Süspansiyon kültürleri için: CHO Büyüme Ortamı A (InSCREENeX'ten; InSCREENeX katalog numarası INS-ME-1039) |
|---|---|
| Takviyeler | Yapışık kültürler için: Ortamı %5 FBS ile takviye edin. Nihai konsantrasyonu 0,5 mg/mL elde etmek için Geneticin (G418-Sulfat) ekleyin. |
| Ayrıştırma Reaktifi | Yapışık kültürler için: Tripsin-EDTA |
| İki katına çıkma süresi | yaklaşık 14-16 saat |
| Alt kültürleme | Rutin yapışık hücre kültürü için: Yapışık hücrelerden eski kültür ortamını aspire edin ve kalan ortamı çıkarmak için PBS ile yıkayın. PBS'yi aspire ettikten sonra kültür kabı boyutuna göre uygun hacimde Tripsin/EDTA solüsyonu ekleyin (örn. T25 şişesi için 1 ml, T75 şişesi için 3 ml) ve oda sıcaklığında veya 37°C'de 5-10 dakika veya hücreler ayrılana kadar inkübe edin. Mikroskop altında ayrılmayı izleyin ve gerekirse hücreleri serbest bırakmak için kaba hafifçe vurun. Hücreler ayrıldıktan sonra Tripsin/EDTA'yı inaktive etmek için tam ortam ekleyin, hücreleri nazikçe yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunun bir alikotunu taze ortam içeren yeni bir kültür kabına aktarın. Kabı %5CO2 ile 37°C'ye ayarlanmış bir inkübatöre yerleştirin ve ortamı 2-3 günde bir değiştirin. |
| Bölünmüş oran | 1'den 5'e kadar |
| Tohumlama yoğunluğu | 2 ila 5 x 104 hücre/cm2 |
| Sıvı yenileme | haftada 2 ila 3 kez |
| Çözülme Sonrası İyileşme | Çözüldükten sonra, hücreleri 1:2 ila 1:3 oranında T25 flasklara bölün ve hücrelerin donma sürecinden kurtulmasına ve en az 24 saat boyunca yapışmasına (yapışkan kültürler için) izin verin. |
| Ortamı dondurun | Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz. |
| Hücrelerin Çözdürülmesi ve Kültürlenmesi |
|
| Kuluçka Atmosferi | 37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer. |
| Nakliye Koşulları | Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın. |
| Depolama Koşulları | Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir. |
Kalite kontrol / Genetik profil / HLA
| Sterilite | Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır. Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur. |
|---|