เซลล์ U87MG - การวิจัยกลิโอบลาสโตมาโดยใช้เซลล์ U87MG และผลกระทบต่อการศึกษาโรคมะเร็งสมอง
U-87 MG ซึ่งเป็นสายพันธุ์เซลล์กลีโอโบลาสโตมาชนิดปฐมภูมิจากมนุษย์ ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีววิทยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งในสาขาประสาทวิทยาศาสตร์และภูมิคุ้มกันมะเร็ง
ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ไลน์ U-87 MG
ส่วนนี้จะกล่าวถึงที่มาและลักษณะทั่วไปของสายพันธุ์เซลล์ U87 คุณจะเรียนรู้ว่า เซลล์ U-87 MG คืออะไร? เซลล์ U87 มาจากไหน? รูปแบบเต็มของ U-87 MG คืออะไร? เซลล์ U87 มีขนาดเท่าไร? ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของสายพันธุ์เซลล์ U87 เป็นอย่างไร?
- สายเซลล์ U87 เป็นสายเซลล์ของโรคกลีโอบลาสโตมา อะสโตรไซโตมา ซึ่งถูกสร้างขึ้นในปี 1966 ที่มหาวิทยาลัยอุปซอลา เซลล์เหล่านี้ได้มาจากชายชาวคอเคเชียนอายุ 44 ปีที่ป่วยเป็นโรคกลีโอบลาสโตมา สายเซลล์นี้เรียกอย่างเป็นทางการว่า U 87 MG ซึ่งย่อมาจาก Uppsala 87 Malignant Glioma
- เซลล์ U 87 MG มีลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว
- ขนาดของเซลล์ U 87 MG อยู่ระหว่าง 12 ถึง 14 ไมโครเมตรในเส้นผ่านศูนย์กลาง
- สายพันธุ์เซลล์มะเร็งสมองชนิดกลิโอบลาสโตมาของมนุษย์นี้มีจำนวนโครโมโซมต่ำกว่าปกติและมีจำนวนโครโมโซมที่เป็นค่ากลางอยู่ที่ 44 ในประชากรเซลล์ประมาณ 48% อย่างไรก็ตาม พบประชากรเซลล์ที่มีจำนวนโครโมโซมมากกว่าปกติในระดับสูงกว่าใน 5.9% ของประชากรเซลล์
ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์ U-87 MG
ก่อนทำงานกับเซลล์ U 87 MG คุณควรเรียนรู้เกี่ยวกับประเด็นสำคัญต่อไปนี้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์กลีโอบลาสโตมาเหล่านี้ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง คุณควรทราบ: เวลาในการเพิ่มจำนวนประชากรของเซลล์ U 87 MG คืออะไร? สื่อที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ U87 คืออะไร? ความหนาแน่นในการเพาะเลี้ยงของสายพันธุ์เซลล์ U 87 MG คืออะไร?
จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ U-87 MG
|
เวลาการเพิ่มจำนวนประชากรเป็นสองเท่า: |
เซลล์ U 87 MG มีเวลาการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าของประชากรอยู่ระหว่าง 18-38 ชั่วโมง |
|
ติดกันหรือแขวนลอย: |
U 87 MG เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติดกัน เซลล์มีรูปร่างยาวและเติบโตเป็นชั้นเดียว |
|
ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด: |
แนะนำให้เพาะเลี้ยงเซลล์ไลน์ U 87 MG ของเซลล์กลีโอบลาสโตมาที่ความหนาแน่นของเซลล์ 1 x104เซลล์/ซม.2 เซลล์ U87 ที่เกาะติดจะถูกชะล้างด้วย 1 x PBS และบ่มด้วยสารละลาย Accutase หลังจากนั้น เซลล์ที่แยกตัวแล้วจะถูกปั่นเหวี่ยงและเก็บรวบรวม เซลล์จะถูกแขวนลอยอย่างระมัดระวังและเติมลงในขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์ |
|
อาหารเลี้ยงเชื้อ: |
เซลล์ไลน์ U 87 MG ถูกเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเซลล์ EMEM (Eagle's minimal essential medium) ที่เสริมด้วย L-glucose 1.0 กรัม/ลิตร, L-glutamine 2.0 มิลลิโมลาร์, NaHCO3 2.2 กรัม/ลิตร, NEAA 1%, sodium pyruvate 1 มิลลิโมลาร์ และ FBS 10% ควรเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ทุก 2 ถึง 3 วัน |
|
เงื่อนไขการเจริญเติบโต: |
เซลล์ U-87 MG ต้องการตู้เพาะเลี้ยงที่มีความชื้นพร้อมแหล่งก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% และอุณหภูมิ 37°C เพื่อการเจริญเติบโตที่เหมาะสมที่สุด |
|
การเก็บรักษา: |
เซลล์ U87 ถูกเก็บรักษาไว้ทั้งในระยะไอของไนโตรเจนเหลวหรือที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C เพื่อรักษาความมีชีวิตสูงสุดของเซลล์กลีโอบลาสโตมา |
|
กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง: |
CM-1 หรือ CM-ACF freezing media เหมาะสำหรับการแช่แข็งเซลล์ U 87 MG แนะนำให้ใช้กระบวนการแช่แข็งแบบช้า เนื่องจากจะช่วยป้องกันการเกิดช็อกของเซลล์และรักษาความมีชีวิตของเซลล์ |
|
กระบวนการละลาย |
หลอดเซลล์สายพันธุ์ U-87 MG ที่ถูกแช่แข็งจะถูกนำมาละลายในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37°C จากนั้นเติมอาหารเลี้ยงเซลล์ ผสมให้เข้ากัน แล้วแบ่งใส่ขวดเพาะเลี้ยงใหม่ ตรงกันข้ามกับวิธีนี้ เซลล์ U87 สามารถนำไปปั่นเหวี่ยงเพื่อแยกสารละลายแช่แข็งออก แล้วจึงนำไปเพาะเลี้ยงต่อ |
|
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ: |
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ 1 จำเป็นต้องใช้สำหรับการจัดการเซลล์เพาะเลี้ยง U 87 MG |
ข้อดีและข้อเสียของเซลล์ U-87 MG
เมื่อเราคิดถึงเซลล์ไลน์ สิ่งแรกที่ผุดขึ้นในใจคือ: ข้อดีของการใช้เซลล์ U-87 MG คืออะไร? ข้อเสียของเซลล์ U87 คืออะไร?
ข้อดี
U 87 MG cell lines ถูกใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัย ข้อดีบางประการที่เกี่ยวข้องกับสายเซลล์นี้คือ:
ข้อดี
- ง่ายต่อการเพาะเลี้ยง:เซลล์ U 87 MG ง่ายต่อการดูแลในวัฒนธรรมเซลล์ ไม่ต้องการการเพาะเลี้ยงที่ยุ่งยากหรือซับซ้อน
- ความสม่ำเสมอ:U-87 MG เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่มีความสม่ำเสมอ เซลล์ส่วนใหญ่ในประชากรมีองค์ประกอบทางพันธุกรรมเหมือนกันและจึงมีลักษณะคล้ายคลึงกัน เซลล์เหล่านี้ถูกนำมาใช้ในการศึกษาเกี่ยวกับกระบวนการของเซลล์ การคัดกรองยา และการทดสอบ
- มีการกำหนดลักษณะที่ดี:สายพันธุ์เซลล์กลีโอโบลาสโตมาชนิดนี้มีการกำหนดลักษณะที่ดีโดยลักษณะการเจริญเติบโต, รูปร่าง, และการแสดงออกของยีน, ทำให้เป็นเครื่องมือวิจัยที่มีคุณค่า.
ข้อเสีย
- การนำไปใช้ได้จำกัด:U 87 MG เป็นสายพันธุ์เซลล์ของโรคกลีโอบลาสโตมา ดังนั้นการนำไปใช้จึงจำกัดอยู่เพียงการศึกษาโรคกลีโอบลาสโตมาและกลไกโมเลกุลที่เกี่ยวข้อง อาจไม่เหมาะสำหรับการศึกษาชนิดของมะเร็งอื่น ๆ
การวิจัยที่ใช้เซลล์ U-87 MG
เซลล์ไลน์ U87MG glioblastoma ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษาเกี่ยวกับมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการวิจัยเกี่ยวกับ glioblastoma การประยุกต์ใช้ในงานวิจัยของเซลล์ U 87 MG ได้แก่:
- การวิจัยชีววิทยามะเร็ง: สายเซลล์ U87 ถูกใช้ในการศึกษาการเจริญเติบโตและพัฒนาของมะเร็ง กลไกโมเลกุลพื้นฐาน เส้นทางการส่งสัญญาณ และสภาพแวดล้อมจุลภาคของเนื้องอก งานวิจัยที่ตีพิมพ์ในปี 2020 ใช้โมเดล in vitro ของมะเร็งสมองชนิดกลิโอบลาสโตมา สายเซลล์ U-87 MG เพื่อศึกษาการแสดงออกของยีน BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) ในฐานะเป้าหมายการรักษาผลการวิจัยพบว่า ยีน BMAL1 ยับยั้งการเพิ่มจำนวน การเคลื่อนที่ และการรุกรานของเซลล์กลิโอบลาสโตมา โดยการกดการแสดงออกของยีนไซคลิน B1 เมทัลโลโปรตีเนส-9 และฟอสโฟ-AKT [1]งานวิจัยอีกชิ้นหนึ่งซึ่งดำเนินการในปี 2019 ได้ใช้เซลล์ไลน์ U87 และศึกษาว่า การลดลงของการแสดงออกของปัจจัยการถอดรหัส Lipopolysaccharide-induced tumour necrosis factor-alpha factor (LITAF) ที่ถูกกระตุ้นโดย Lipopolysaccharide สามารถเพิ่มความไวต่อรังสีของเซลล์เนื้องอกในสมองผ่านทางการเพิ่มระดับของเส้นทาง FOXO-1 ได้ LITAF ยังเป็นที่รู้จักในชื่อ p53-induced gene 7 (PIG7) [2]
- การค้นพบและพัฒนายา: เซลล์U-87 MG สามารถใช้สำหรับการคัดกรองและทดสอบยา ทำให้ผู้วิจัยสามารถระบุยาต้านมะเร็งที่มีศักยภาพใหม่และประเมินประสิทธิภาพและความเป็นพิษได้ งานวิจัยหนึ่งได้ใช้สายพันธุ์เซลล์ U 87 MG ของมะเร็งสมองชนิดกลิโอบลาสโตมาเพื่อประเมินศักยภาพในการต้านมะเร็งและต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดจากอินูล่า เฮเลเนียม (L.) [3]ในทำนองเดียวกัน สิ่งพิมพ์อีกฉบับหนึ่งได้กล่าวถึงการใช้สายพันธุ์เซลล์ U87 เพื่อทดสอบผลความเป็นพิษต่อเซลล์และการเกิดอะพอพโทซิสของสารสกัดจากพืช [4] นอกจากนี้ งานวิจัยที่ตีพิมพ์ในปี 2018 ได้ศึกษาผลความเป็นพิษต่อเซลล์ของแอลคาลอยด์เซสควิเทอร์พีนที่สกัดจากพืช Nuphar ต่อสายพันธุ์เซลล์ U 87 MG ที่ไวต่อยาและดื้อยา [5]
สั่งซื้อสายเซลล์มะเร็งสมอง U87 MG ของคุณวันนี้
สายพันธุ์เซลล์ U-87 MG: สิ่งพิมพ์งานวิจัย
นี่คือเอกสารวิจัยที่โดดเด่นซึ่งมีการใช้สายพันธุ์เซลล์ U 87 MG
บทความนี้ซึ่งตีพิมพ์ในวารสาร Neuroreport ปี 2018 ได้เสนอว่าภาวะขาดออกซิเจน (hypoxia) อาจเพิ่มการเคลื่อนที่และการรุกรานของเซลล์กลีโอบลาสโตมาในมนุษย์ โดยผ่านการควบคุมเส้นทางสัญญาณ PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α
การศึกษานี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Frontiers in Pharmacology ในปี 2020 ผลการวิจัยระบุว่าสารฟลาโวนอยด์ที่ชื่อว่า เอริโอดิคทิยอล (Eriodictyol) มีฤทธิ์ต้านมะเร็งต่อเซลล์สายพันธุ์ U87 และยับยั้งการเพิ่มจำนวนเซลล์และการแพร่กระจายของเซลล์ สารประกอบนี้ออกฤทธิ์ต้านเนื้องอกโดยควบคุมเส้นทาง PI3K/Akt/NF-κB
งานวิจัยนี้ในวารสารการแพทย์ทางเลือกและเสริมสร้างด้วยหลักฐาน (2018) ชี้ให้เห็นว่าสูตรสมุนไพรจีนที่เรียกว่า Xihuang pill สามารถกระตุ้นการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสในเซลล์ U87 ได้โดยมุ่งเป้าไปที่กระบวนการ cascade ของ Akt/mTOR/FOXO1 ที่ถูกกระตุ้นโดย ROS
LITAF เพิ่มความไวต่อรังสีของเซลล์เนื้องอกในสมองของมนุษย์ผ่านเส้นทาง FoxO1
งานวิจัยฉบับนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Cellular and Molecular Neurobiology ในปี 2019 การศึกษานี้เสนอว่าปัจจัยการถอดรหัส LITAF สามารถลดและเพิ่มการไวต่อรังสีของเซลล์กลีโอม่าโดยการควบคุมเส้นทางสัญญาณ FOXO-1
บทความนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Biointerface Research in Applied Chemistry (2019) นักวิจัยใช้เซลล์ U 87 MG เพื่อศึกษาผลพิษต่อเซลล์ของอนุภาคนาโน PLGA ที่บรรจุเคอร์คูมิน
ทรัพยากรสำหรับเซลล์ U-87 MG: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ
เซลล์ไลน์ U87MG glioblastoma ถูกใช้ในห้องปฏิบัติการวิจัยมะเร็งหลายแห่ง แหล่งข้อมูลบางส่วนที่มีเซลล์ไลน์นี้ได้แก่:
- การถ่ายยีนในเซลล์สายพันธุ์ U87:เอกสารนี้จะอธิบายถึงวิธีการถ่ายยีนสำหรับเซลล์ U 87 MG
- การถ่ายยีนในเซลล์สายพันธุ์ U 87 MG:วิดีโอนี้เป็นบทเรียนที่อธิบายขั้นตอนการถ่ายยีนในเซลล์ U87 อย่างละเอียดทีละขั้นตอน
แหล่งข้อมูลสำหรับโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ U87 มีดังต่อไปนี้:
- เซลล์ U87 MG:ลิงก์นี้มีข้อมูลพื้นฐานเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ U 87 MG ซึ่งรวมถึงวิธีการแบ่งเซลล์ การแช่แข็ง และการละลายเซลล์โดยย่อ
ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการวิจัยเนื้องอกในสมองชนิด U87 MG: คำถามที่พบบ่อย
เอกสารอ้างอิง
- กวน, ดี.เอช., และคณะ,BMAL1 ยับยั้งการเพิ่มจำนวน, การเคลื่อนที่, และการบุกรุกของเซลล์ U87MG โดยการลดระดับของไซคลิน B1, ฟอสโฟ-AKT, และเมทัลโลโปรตีนเนส-9.Int J Mol Sci, 2020.21(7).
- Huang, C., et al.,LITAF เพิ่มความไวต่อรังสีของเซลล์เนื้องอกในสมองมนุษย์ผ่านเส้นทาง FoxO1.Cell Mol Neurobiol, 2019.39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al.,กิจกรรมต้านอนุมูลอิสระและต้านมะเร็งของสารสกัดจาก Inula helenium (L.) ในเซลล์มะเร็งสมองชนิด glioblastoma สายพันธุ์ U-87 MG ในมนุษย์.J Cancer Res Ther, 2018.14(3): หน้า 658-661.
- เรซาดูสต์, เอ็ม.เอช., เอช.เอช. คูมเลห์, และ เอ. กาเซมปูร์,ฤทธิ์ต้านเซลล์และการเหนี่ยวนำให้เกิดการตายแบบอะพอพโทซิสในเซลล์มะเร็งเต้านม, มะเร็งผิวหนัง และเซลล์กลิโอบลาสโตมาโดยสารสกัดจากพืช.Mol Biol Rep, 2019.46(5): หน้า 5131-5142.
- ฟุกายะ, เอ็ม., และคณะ,ฤทธิ์ต้านเซลล์ของสารอัลคาลอยด์เซสควิเทอร์พีนจากพืชสกุลนูฟาร์ต่อเซลล์ไลน์ที่ไวต่อยาและดื้อยา.ฟู้ด ฟังก์ชัน, 2018.9(12): หน้า 6279-6286.
