เซลล์ไลน์ HT-29
HT-29เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์ที่มีการประยุกต์ใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยด้านมะเร็งและพิษวิทยา เช่น เซลล์เหล่านี้มีความไวต่อการรักษาด้วยเคมีบำบัดมาตรฐานที่ใช้กับมะเร็งลำไส้ใหญ่ นอกจากนี้ เซลล์ไลน์ HT-29 ยังเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่ได้รับการอธิบายลักษณะอย่างละเอียดเพื่อศึกษาการตอบสนองของเยื่อบุผิวลำไส้ต่อการติดเชื้อแบคทีเรียเซลล์ HT-29 เลียนแบบลักษณะของเซลล์ลำไส้ที่เจริญเต็มที่แล้ว เช่น เอนเทอโรไซต์ จึงเหมาะสำหรับการยึดเกาะและการศึกษาเชิงกลไก
บทความนี้จะครอบคลุมทุกแง่มุมของสายพันธุ์เซลล์ HT-29 ที่คุณจำเป็นต้องรู้ก่อนทำงานกับมัน โดยจะรวมถึง:
- เซลล์ HT-29: ต้นกำเนิดและข้อมูลทั่วไป
- ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์ของสายพันธุ์ HT-29
- เซลล์ HT-29: ข้อได้เปรียบและข้อจำกัด
- เซลล์ HT-29: การประยุกต์ใช้
- การตีพิมพ์งานวิจัยเกี่ยวกับเซลล์ HT-29
- เซลล์ HT-29 ทรัพยากร: โปรโตคอล, วิดีโอ และอื่นๆ
1. เซลล์ HT-29: ต้นกำเนิดและข้อมูลทั่วไป
ก่อนการใช้เซลล์ไลน์ใด ๆ คุณควรทราบเกี่ยวกับลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ไลน์นั้น ๆ บทความนี้จะช่วยคุณเรียนรู้: เซลล์ HT-29 คืออะไร? HT-29 เป็นเซลล์ไลน์ของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักหรือไม่? ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ HT-29 เป็นอย่างไร?
เซลล์ไลน์ HT-29 คืออะไร? HT-29 เป็นเซลล์ไลน์ของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา ซึ่งถูกสร้างขึ้นในปี พ.ศ. 2507 โดย Trempe และ Fogh เซลล์เหล่านี้ถูกแยกมาจากเนื้องอกปฐมภูมิของผู้หญิงเชื้อสายคอเคเชียน (อายุ 44 ปี) ที่เป็นมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา [1] นับตั้งแต่การสร้างเซลล์ไลน์นี้ขึ้นมา เซลล์ไลน์ HT-29 ได้ถูกนำมาใช้ในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็ง
สัณฐานวิทยาของเซลล์ HT-29: สายพันธุ์เซลล์HT-29 โดยทั่วไปมีลักษณะสัณฐานวิทยาคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว เซลล์ที่เจริญเต็มที่เติบโตเป็นชั้นเดียว ติดต่อกันแน่นหนา และประกอบด้วยขอบแปรงที่ปลายยอด หากเซลล์เหล่านี้ถูกเลี้ยงในอาหารที่มีกลูโคสไม่เพียงพอหรือได้รับสารกระตุ้นเช่น บัตียเรตหรือกรด พวกมันจะแสดงลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุลำไส้
ขนาดเซลล์: เส้นผ่านศูนย์กลาง ของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักสายพันธุ์ HT-29 คือ 11 ไมโครเมตร
จีโนมและจำนวนชุดโครโมโซม: จำนวนโครโมโซมที่พบมากที่สุด ในเซลล์ไลน์ HT-29 คือ 71 ชุด ซึ่งอาจอยู่ในช่วง 68-72 ชุด นอกจากนี้ จำนวนโครโมโซมที่เรียบง่ายของเซลล์ HT-29 เป็นแบบไฮเปอร์ไตรพลอยด์ โดยมีส่วนประกอบ 2S เกิดขึ้นในอัตรา 2.4%
HT29 MTX คืออะไร? HT29 MTX เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่ต้านทานยาเมโธเทรกเซต ซึ่งแยกได้จากสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์ HT-29 ดั้งเดิม โดยการปรับตัวกับยาเมโธเทรกเซตที่ความเข้มข้น 10 µM เซลล์เหล่านี้มีลักษณะของเซลล์โกเบล็ตที่เจริญเต็มที่ซึ่งหลั่งสารเมือก
2. ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์ของสายพันธุ์ HT-29
การรู้เกี่ยวกับความต้องการทางวัฒนธรรมพื้นฐานของสายเซลล์สามารถทำให้การทำงานของคุณง่ายขึ้นได้ คุณควรรู้: ระยะเวลาการเพิ่มจำนวนสองเท่าของสายเซลล์ HT-29 คืออะไร? ความหนาแน่นในการเพาะเลี้ยงของเซลล์ HT-29 คืออะไร? สื่ออาหารสำหรับเซลล์ HT-29 คืออะไร?
|
เวลาที่ใช้เป็นสองเท่า |
ค่าเฉลี่ยของเวลาสองเท่าสำหรับสายพันธุ์เซลล์ HT-29 คือ 24 ชั่วโมง |
|
ติดแน่น/แขวนลอย |
HT-29 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติด |
|
ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด |
ความหนาแน่นของการเพาะเลี้ยงที่แนะนำสำหรับเซลล์ HT-29 คือ 3 x104เซลล์/cm2 เซลล์ที่เจริญเติบโตแล้วล้างด้วย 1 X PBS และแยกออกจากกันหลังจากการบ่มด้วย Accutase เป็นเวลา 8-10 นาที เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่และปั่นเหวี่ยง เซลล์ที่ตกตะกอนถูกแขวนลอยใหม่ และเซลล์ถูกแบ่งลงในขวดใหม่ตามความหนาแน่นที่แนะนำ |
|
อาหารเลี้ยงเชื้อ |
ใช้ Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) ที่เสริมด้วย L-glutamine 2.5 mM และ FBS 10% สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT-29 อย่างเหมาะสม ควรเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ทุก 2 ถึง 3 วัน |
|
เงื่อนไขการเจริญเติบโต |
เซลล์ HT-29 ต้องการตู้เพาะเลี้ยงที่มีสภาพดินอุดมด้วยฮิวมัส อุณหภูมิ 37°C และมีการจ่ายก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์5% สำหรับการเจริญเติบโต |
|
การจัดเก็บ |
เซลล์เหล่านี้ถูกเก็บไว้ในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวที่อุณหภูมิต่ำกว่า -195°C.
|
|
ตัวกลางและกระบวนการแช่แข็ง |
ตัวกลางแช่แข็งที่ใช้สำหรับสายพันธุ์เซลล์ HT-29 คือ CM-1 หรือ CM-ACF เซลล์จะถูกแช่แข็งโดยกระบวนการแช่แข็งช้าที่ทำให้อุณหภูมิลดลง 1 °C และปกป้องความมีชีวิตของเซลล์ได้อย่างมีประสิทธิภาพ |
|
กระบวนการละลาย |
เซลล์ HT-29 ที่ถูกแช่แข็งจะถูกนำมาละลายในอ่างน้ำที่ตั้งอุณหภูมิไว้ที่ 37°C เซลล์เหล่านี้สามารถนำไปแขวนลอยและแจกจ่ายโดยตรงลงในขวดเลี้ยงเชื้อที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อสดได้ ตรงกันข้ามกับวิธีนี้ เซลล์ที่ละลายแล้วสามารถนำไปปั่นเหวี่ยงเพื่อกำจัดสารอาหารจากอาหารแช่แข็งออก จากนั้นแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเชื้อสดและนำไปเพาะเลี้ยงในขวดเพาะเลี้ยง |
|
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ |
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ 1 ใช้สำหรับจัดการและดูแลรักษาสายพันธุ์เซลล์ HT-29 |
3. เซลล์ HT-29: ข้อดีและข้อจำกัด
ทุกสายพันธุ์ของเซลล์มีข้อดีและข้อเสียที่เป็นเอกลักษณ์ซึ่งทำให้แตกต่างจากสายพันธุ์อื่น ๆ ส่วนนี้จะครอบคลุมถึงข้อได้เปรียบหลักและข้อจำกัดที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ HT-29
ข้อดี
ข้อดีหลักของเซลล์ HT-29 คือ:
-
เพาะเลี้ยงง่าย
เซลล์ไลน์ HT-29 ง่ายต่อการจัดการและบำรุงรักษา โดยไม่มีความต้องการที่ซับซ้อนสำหรับการเพาะเลี้ยง และถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการวิจัย
-
แบบจำลองในหลอดทดลองของเซลล์ลำไส้
เซลล์ HT-29 สามารถเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ลำไส้ที่สมบูรณ์ (เซลล์เยื่อบุลำไส้และเซลล์ที่ผลิตเมือก) ภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงเฉพาะ พวกมันถูกใช้เป็นแบบจำลองเซลล์เพื่อศึกษาการย่อยอาหารและการดูดซึมทางชีวภาพ
-
ประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนสูง
เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ HT-29 มีประสิทธิภาพในการถ่ายโอนยีนสูง ทำให้เหมาะสำหรับการศึกษาการแสดงออกและการควบคุมยีน การทดลองถ่ายโอนยีนทั้งแบบชั่วคราวและแบบถาวรสามารถทำได้โดยใช้วิธีการต่างๆ
-
ความไวต่อยา
เซลล์ HT-29 มีความไวต่อยาเคมีบำบัด เช่น ฟลูออโรยูราซิล และออกซาลิพลาติน ซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในการรักษามะเร็งลำไส้ใหญ่ พวกมันถูกใช้ในการศึกษาความต้านทานต่อยาและคัดกรองยาที่มีศักยภาพในการรักษาสำหรับมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก
ข้อจำกัด
-
ความไม่สม่ำเสมอ
เซลล์ HT-29 เช่นเดียวกับเซลล์มะเร็งสายพันธุ์อื่น ๆ แสดงความหลากหลายภายในกลุ่มและอาจไม่สามารถสร้างประชากรเซลล์ที่เป็นเนื้อเดียวกันได้ ซึ่งอาจส่งผลต่อความสามารถในการทำซ้ำของผลลัพธ์ในการทดสอบบางประเภท และนำไปสู่ความแปรปรวนเล็กน้อยในผลลัพธ์ของการทดลอง
-
การแยกแยะที่จำกัด
เซลล์ HT-29 มีศักยภาพในการเปลี่ยนแปลงรูปเป็นเซลล์ชนิดอื่นได้จำกัด โดยไม่สามารถเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ลำไส้หรือเซลล์ลำไส้ใหญ่ได้อย่างสมบูรณ์ แต่จะแสดงลักษณะเฉพาะบางประการเท่านั้น ข้อจำกัดนี้อาจส่งผลให้ไม่สามารถนำไปใช้ในการศึกษาชีวกระบวนการที่ซับซ้อนมากขึ้นได้
4. HT-29 เซลล์: การประยุกต์ใช้งาน
เซลล์ไลน์ HT-29 ถูกเพาะเลี้ยงอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการวิจัยเนื่องจากมีขอบเขตการใช้งานที่หลากหลาย ส่วนนี้จะครอบคลุมเพียงไม่กี่การใช้งานที่สำคัญของเซลล์ HT-29 เท่านั้น
การวิจัยมะเร็ง: HT-29 เป็นเซลล์ไลน์ของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา จึงถูกนำมาใช้ในการศึกษาการลุกลามของมะเร็ง การพัฒนา และกลไกระดับโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการศึกษาที่ดำเนินการในปี 2018 ได้ใช้สายพันธุ์เซลล์ HT-29 เพื่อตรวจสอบโมเลกุลของเซลล์ที่รับผิดชอบต่อการแพร่กระจายของมะเร็ง การศึกษานี้พบว่ายีน vimentin และ CXCR4 ควบคุมการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็ง ในขณะที่การถ่ายยีน microRNA-193a-5p สามารถลดระดับ mRNA ของยีนเหล่านี้และลดการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งได้สำเร็จ [2]
การวิจัยทางพิษวิทยา: สายพันธุ์เซลล์HT-29 ถูกใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางพิษวิทยา เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่เหล่านี้ถูกใช้ในการประเมินความเป็นพิษของยาต่างๆ โดยใช้การทดสอบที่หลากหลาย เช่น การศึกษาหนึ่งที่สำรวจศักยภาพความเป็นพิษของสารสกัดเอทานอลจากพืชSyzygium cuminiต่อสายพันธุ์เซลล์ HT-29 ผลการศึกษาแสดงให้เห็นการยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ HT-29 อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งบ่งชี้ถึงคุณสมบัติต้านมะเร็งที่มีแนวโน้มดีของสารสกัดนี้ [3]
จุลชีววิทยา: HT-29 สามารถใช้เป็นระบบเซลล์โฮสต์เพื่อศึกษาพยาธิกำเนิดของจุลชีพที่อาจก่อโรค เช่น แบคทีเรียและไวรัส นักวิจัยสามารถติดเชื้อจุลชีพในเซลล์ HT-29 เพื่อศึกษาความรุนแรงของเชื้อและการตอบสนองของโฮสต์ การศึกษาดังกล่าวใช้เซลล์ HT-29 เพื่อสำรวจคุณสมบัติโปรไบโอติกของแบคทีเรียกรดแลคติก [4]การศึกษาอีกชิ้นหนึ่งใช้เซลล์ HT-29 เพื่อประเมินประสิทธิภาพและความปลอดภัยของการรักษาด้วยแบคทีฟาจ [5]
5. การตีพิมพ์งานวิจัยเกี่ยวกับเซลล์ HT-29
ส่วนนี้จะให้ความกระจ่างเกี่ยวกับสิ่งพิมพ์ที่น่าสนใจบางฉบับเกี่ยวกับเซลล์ HT-29 ที่จะช่วยคุณในการวางแผนการศึกษาวิจัยของคุณ
การศึกษานี้เสนอสารสกัดเอทานอลจากSyzygium cuminiเป็นสารต้านมะเร็งที่มีศักยภาพต่อเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิด HT-29 สารสกัดนี้สามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งได้อย่างมีนัยสำคัญ
สิ่งพิมพ์นี้ใน Bioscience Reports ได้ทดสอบฤทธิ์ต้านมะเร็งของสารประกอบ Tetradrine ในเซลล์ HT-29 ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่า tetrandrine ยับยั้งการเพิ่มจำนวนและการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งผ่านการควบคุมเส้นทางการส่งสัญญาณของเซลล์
การศึกษานี้เสนอว่า miRNA-193a-5p อาจสามารถควบคุมการแพร่กระจายของเซลล์ HT-29 ได้โดยการควบคุมยีนที่เกี่ยวข้องกับการแพร่กระจาย
บทความนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Nature Scientific Reports ในปี 2018 การศึกษานี้ใช้เซลล์ไลน์มะเร็ง HT-29 ซึ่งเป็นเซลล์ต้นแบบของลำไส้ เพื่อประเมินประสิทธิภาพของการรักษาด้วยแบคทีริโอเฟจที่นำเสนอ
ในการศึกษานี้ นักวิจัยใช้เซลล์ HT-29 เพื่อตรวจสอบกิจกรรมของโปรไบโอติกในแบคทีเรียกรดแลคติก น่าสนใจที่การศึกษาชี้ให้เห็นว่าแบคทีเรียแลคโตบาซิลลัสสามารถป้องกันการยึดเกาะของแบคทีเรียก่อโรคกับเซลล์ลำไส้ใหญ่ได้
6. เซลล์ HT-29 ทรัพยากร: โปรโตคอล, วิดีโอ และอื่นๆ
ส่วนนี้จะครอบคลุมแหล่งข้อมูลออนไลน์ที่มีเกี่ยวกับเซลล์ HT-29 ซึ่งจะช่วยในการเรียนรู้การบำรุงรักษา การเพาะเลี้ยง และวิธีการถ่ายยีนเข้าสู่เซลล์
โปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์
ทรัพยากรต่อไปนี้จะแนะนำคุณเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT-29 ในอาหารเลี้ยงเชื้อ
- การเพาะเลี้ยงเซลล์ HT-29:ลิงก์นี้จะ ให้ข้อมูลพื้นฐานเกี่ยวกับอาหารเลี้ยงเซลล์ การละลายน้ำแข็ง และการเพาะเลี้ยงต่อรุ่นของเซลล์ HT-29
- การดูแลรักษาเซลล์ HT-29:บทความนี้ ประกอบด้วยข้อมูลที่เป็นประโยชน์ทั้งหมดเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงและการดูแลรักษาเซลล์ HT-29
โปรโตคอลการถ่ายโอนยีน
สายพันธุ์เซลล์ HT-29 มีประสิทธิภาพในการทรานส์เฟคสูงมาก และมักถูกใช้ในงานศึกษาการแสดงออกของยีน แหล่งข้อมูลต่อไปนี้อธิบายถึงโปรโตคอลการทรานส์เฟคที่เป็นไปได้สำหรับเซลล์เหล่านี้
- การถ่ายยีน HT-29:ลิงก์เว็บไซต์นี้มีโปรโตคอลโดยละเอียดสำหรับการถ่ายยีนในเซลล์ HT-29
- การถ่ายโอนยีนในเซลล์ไลน์ HT-29:เอกสารนี้อธิบายขั้นตอนการถ่ายโอนยีนในเซลล์ไลน์ HT-29 ด้วยพลาสมิดดีเอ็นเอ
วิดีโอที่เกี่ยวข้องกับสายพันธุ์เซลล์ HT-29
นี่คือวิดีโอเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงและการดูแลรักษาเซลล์ไลน์ที่ก่อให้เกิดเนื้องอกนี้
- การเพาะเลี้ยงเซลล์:วิดีโอนี้ แสดงวิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์สำหรับสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติด
- การถ่ายยีนในเซลล์ HT-29:วิดีโอนี้จะแนะนำคุณเกี่ยวกับ วิธีการถ่ายยีน ที่ใช้สำหรับเซลล์ HT-29
เราคาดหวังว่าข้อมูลในบทความนี้มีคุณค่าและเพียงพอสำหรับคุณในการจัดการและบำรุงรักษาเซลล์ไลน์ HT-29 หากคุณวางแผนที่จะใช้เซลล์ HT-29 ในการศึกษาของคุณ กรุณาสั่งซื้อจากเรา
เอกสารอ้างอิง
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, และ I. Recio,สายเซลล์ HT29.ผลกระทบของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในอาหารต่อสุขภาพ: แบบจำลอง in vitro และ ex vivo, 2015: หน้า 113-124.
- Shirafkan, N., et al.,microRNA‐193a‐5p ยับยั้งการเคลื่อนที่ของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ HT‐29 ของมนุษย์ผ่านทางการยับยั้งเส้นทางของการแพร่กระจาย.วารสารชีวเคมีระดับเซลล์, 2019.120(5): หน้า 8775-8783.
- โคดาวิร์ดิพูร์, เอ., อาร์. ซาเรอัน, และ อาร์. ซาฟาราไลซาเดห์,การประเมินผลต้านมะเร็งของสารสกัดเอทานอลจาก Syzygium cumini ต่อเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิด HT-29.วารสารมะเร็งทางเดินอาหาร, 2021.52: หน้า 575-581.
- ฟอนเซกา, เอช.ซี., และคณะ,คุณสมบัติของโปรไบโอติกของแลคโตบาซิลลัสและความสามารถในการยับยั้งการเกาะติดของแบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรคทางเดินอาหารต่อเซลล์ Caco-2 และ HT-29.โปรไบโอติกส์และโปรตีนต้านจุลชีพ, 2021.13: หน้า 102-112.
- Shan, J., และคณะ,แบคทีริโอฟาจมีความรุนแรงต่อแบคทีเรียที่มีเซลล์มนุษย์มากกว่าในวัฒนธรรมแบคทีเรีย; ข้อมูลเชิงลึกจากเซลล์ HT-29.รายงานทางวิทยาศาสตร์, 2018.8(1): หน้า 5091.
