เซลล์ DLD-1: การประยุกต์ใช้และข้อมูลเชิงลึกของเซลล์ DLD-1 ในการวิจัยมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก
DLD-1เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็ง เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการศึกษาแง่มุมต่าง ๆ ของมะเร็งลำไส้ใหญ่ รวมถึงการพัฒนาของเนื้องอก การลุกลาม กลไกโมเลกุลพื้นฐาน และการตอบสนองต่อสารบำบัด ดังนั้น DLD-1 จึงโดดเด่นในการทำความเข้าใจโรคและพัฒนาแนวทางการรักษาที่มีศักยภาพ
บทความนี้จะให้ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ DLD-1 ที่คุณควรทราบก่อนใช้งาน โดยจะครอบคลุม:
- ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ DLD-1
- การเพาะเลี้ยงข้อมูลของเซลล์ไลน์ DLD-1
- สายพันธุ์เซลล์ DLD-1: ข้อได้เปรียบ & ข้อจำกัด
- การประยุกต์ใช้เซลล์ไลน์ DLD-1 ในการวิจัย
- การตีพิมพ์งานวิจัยเกี่ยวกับเซลล์ DLD-1
- ทรัพยากรสำหรับเซลล์ไลน์ DLD-1: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ
1.ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ DLD-1
ก่อนทำงานกับเซลล์ไลน์ นักวิจัยควรพิจารณาถึงที่มาและลักษณะทั่วไปของเซลล์ไลน์นั้นก่อนเสมอ บทความส่วนนี้เป็นการแนะนำอย่างละเอียดเกี่ยวกับเซลล์ไลน์ DLD-1 ซึ่งจะครอบคลุมคำถามที่พบบ่อยต่อไปนี้: เซลล์ DLD-1 คืออะไร? เซลล์ไลน์มะเร็ง DLD-1 คืออะไร? การกลายพันธุ์ของเซลล์ไลน์ DLD-1 คืออะไร? ขนาดของเซลล์ DLD-1 คืออะไร? รูปร่างของเซลล์ DLD-1 คืออะไร?
- DLD-1 เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งลำไส้ใหญ่ที่มีต้นกำเนิดจากลำไส้ใหญ่ของผู้ป่วยชายอายุ 67 ปีที่เป็นมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก ถูกแยกโดย D.L. Dexter และคณะในช่วงปี 1977-1979 เซลล์ไลน์นี้มีต้นกำเนิดเดียวกันกับเซลล์ไลน์ HCT-8, HCT-15 และ HRT-18
- เช่นเดียวกับมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก เซลล์ DLD-1 มีลักษณะทางฟีโนไทป์ของความไม่เสถียรของไมโครแซทเทลไลต์ [1]
- การกลายพันธุ์ของ DLD-1 รวมถึง KRAS, P53, BRAF, BRCA1 และ BRCA2 เนื่องจากสถานะของ DLD-1 P53, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 และการกลายพันธุ์ของ DLD-1 KRAS เซลล์เหล่านี้จึงถือว่าเป็นตัวอย่างที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับมะเร็ง
- เซลล์เหล่านี้มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเยื่อบุผิว
- ขนาดของเซลล์ไลน์ DLD-1 ประมาณ 15 ไมโครเมตร
- เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักของมนุษย์สายพันธุ์ DLD-1 มีโครโมโซมแบบเทียมสองชุด ประมาณ 86% ของเซลล์มีจำนวนโครโมโซมที่เป็นค่ากลางอยู่ที่ 46 อย่างไรก็ตาม อาจพบภาวะโครโมโซมหลายชุดใน 17.1% ของประชากรเซลล์
2. การเพาะเลี้ยงข้อมูลของเซลล์ไลน์ DLD-1
ก่อนการเพาะเลี้ยงเซลล์ไลน์ใด ๆ คุณต้องทราบถึงข้อกำหนดพื้นฐานในการเพาะเลี้ยงเซลล์ของเซลล์ไลน์นั้น ๆ ก่อนเสมอ หัวข้อต่อไปนี้จะเน้นย้ำถึงจุดสำคัญที่คุณต้องทราบก่อนเริ่มทำงานกับเซลล์ไลน์ DLD-1 ซึ่งรวมถึง: - DLD-1 doubling time คืออะไร? - DLD-1 culture medium คืออะไร? - ความหนาแน่นของการเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1 คืออะไร? - วิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1 คืออะไร?
จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1
|
เวลาสองเท่า: |
เวลาสองเท่าของ DLD-1 ประมาณ 15 ชั่วโมง |
|
ติดกันหรือแขวนลอย: |
DLD-1 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์ที่เกาะติดกัน เซลล์จะเจริญเติบโตเป็นชั้นเดียว |
|
ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด: |
เซลล์ DLD-1 ถูกเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 1 ถึง 2 x10^4เซลล์/ซม.^2เซลล์ที่เกาะติดถูกชะล้างด้วย 1x ฟอสเฟตบัฟเฟอร์เกลือ (PBS) และบ่มด้วยสารละลายการผ่านเซลล์ (Accutase) ที่อุณหภูมิห้อง หลังจากบ่มเป็นเวลา 8 ถึง 10 นาที เซลล์ที่หลุดออกจะถูกเติมลงในอาหารเลี้ยงเซลล์และปั่นเหวี่ยง จากนั้นตะกอนเซลล์จะถูกแขวนลอยอย่างระมัดระวัง และเซลล์จะถูกเทลงในภาชนะเพาะเลี้ยงใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สำหรับการเจริญเติบโต |
|
อาหารเลี้ยงเชื้อ: |
RPMI 1640 พร้อมสารเสริมอาหารระดับกลาง รวมถึงเซรั่มจากเลือดวัวในครรภ์ 10% FBS, กลูตามีนเสถียร 2.1 มิลลิโมลาร์ และโซเดียมไฮโดรเจนคาร์บอเนต 2.0 กรัม/ลิตร ใช้สำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1 สารอาหารควรเปลี่ยน 2-3 ครั้งต่อสัปดาห์ |
|
เงื่อนไขการเจริญเติบโต: |
วัฒนธรรม DLD-1 ถูกเก็บรักษาไว้ในตู้เพาะเลี้ยงที่มีความชื้นที่อุณหภูมิ 37°C พร้อมกับการจ่ายก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% |
|
การเก็บรักษา: |
เซลล์ DLD-1 ถูกเก็บรักษาในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวหรือในตู้แช่แข็งอุณหภูมิต่ำพิเศษแบบไฟฟ้า (ที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C) |
|
กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง: |
สามารถใช้วัตถุดิบแช่แข็ง CM-1 หรือ CM-ACF ในการแช่แข็งเซลล์ DLD-1 ได้ แนะนำให้ใช้กระบวนการแช่แข็งอย่างช้าๆ โดยลดอุณหภูมิลงทีละ 1°C เพื่อป้องกันไม่ให้เซลล์เกิดการช็อกและรักษาความมีชีวิตของเซลล์ไว้ |
|
กระบวนการละลาย |
เซลล์ที่ถูกแช่แข็งจะถูกละลายในอ่างน้ำที่ตั้งอุณหภูมิไว้ล่วงหน้า 37 °C เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที จนเหลือเป็นก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก หลังจากนั้นจึงเติมเซลล์ลงในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และปั่นเหวี่ยง ขั้นตอนนี้มีความจำเป็นเพื่อกำจัดส่วนประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อที่ใช้ในการแช่แข็งออกจากเซลล์ เซลล์ที่รวบรวมได้จะถูกแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับการเจริญเติบโตและนำไปแบ่งใส่ขวดเลี้ยงเชื้อเพื่อเพาะเลี้ยงต่อไป |
|
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ: |
สายเซลล์ DLD-1 ได้รับการดูแลในห้องปฏิบัติการระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ 1 |
3. สายเซลล์ DLD-1: ข้อได้เปรียบ & ข้อจำกัด
ในส่วนนี้ของบทความ เราจะทบทวนข้อดีและข้อจำกัดของเซลล์ไลน์มะเร็งลำไส้ใหญ่ DLD-1
ข้อดี
ข้อได้เปรียบหลักของเซลล์ไลน์ DLD-1 คือ:
|
แบบจำลองมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก |
เซลล์ DLD-1 มีการกลายพันธุ์ที่พบได้บ่อยในผู้ป่วยมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก เช่น การกลายพันธุ์ของ DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA และ DLD-1 BRCA2 ความเกี่ยวข้องนี้ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองเซลล์ที่เหมาะสมทางคลินิกสำหรับการศึกษาโรคนี้ |
|
เซลล์ไลน์ก่อเนื้องอก |
เซลล์ DLD-1 เป็นเซลล์ก่อเนื้องอก สามารถก่อให้เกิดเนื้องอกเมื่อฉีดเข้าสู่หนูเมาส์ที่ไม่มีระบบภูมิคุ้มกัน (nude mice) ดังนั้น นักวิจัยจึงใช้เซลล์เหล่านี้ในการพัฒนาแบบจำลองเนื้องอกชนิด xenograft เพื่อช่วยในการศึกษาการก่อตัว การพัฒนา และการลุกลามของเนื้องอกในร่างกายสัตว์ทดลอง (in vivo) |
ข้อจำกัด
ข้อจำกัดที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ DLD-1 ได้แก่:
|
ความไม่สม่ำเสมอ |
ประชากรเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ชนิด DLD-1 แสดงความหลากหลายทางพันธุกรรมและลักษณะทางฟีโนไทป์ ซึ่งอาจส่งผลต่อความสามารถในการสรุปผลวิจัยในวงกว้าง |
4. การประยุกต์ใช้เซลล์ไลน์ DLD-1 ในการวิจัย
เซลล์ไลน์ DLD-1 มีประโยชน์หลากหลายในการวิจัยมะเร็ง การประยุกต์ใช้ที่โดดเด่นบางประการจะกล่าวถึงในส่วนนี้
- การศึกษาโรคมะเร็ง: เซลล์DLD-1 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่มีคุณค่าสำหรับการทำความเข้าใจกลไกทางโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการเจริญเติบโต การพัฒนา และการลุกลามของมะเร็งลำไส้ใหญ่ นอกจากนี้ยังถูกใช้ในการศึกษาการแสดงออกของยีน เส้นทางสัญญาณอิทธิพลของการกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมเฉพาะต่อพฤติกรรมของเซลล์มะเร็งการวิจัยที่ดำเนินการในปี 2022 สังเกตเห็นว่า กระบวนการส่งสัญญาณ PI3K/Akt/YAP ควบคุมการเคลื่อนที่และการบุกรุกของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิด DLD‑1 [2]
- การพัฒนาตัวยา: นักวิจัยใช้ สายพันธุ์เซลล์ DLD-1 ในการทดสอบประสิทธิภาพของยาต้านมะเร็งและประเมินศักยภาพในการรักษาโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่ ซึ่งช่วยในการพัฒนายาและต่อสู้กับโรคได้อย่างมีประสิทธิภาพการศึกษาที่ดำเนินการในปี 2022 ได้ใช้เซลล์มะเร็งสายพันธุ์ DLD-1 และสำรวจฤทธิ์ต้านมะเร็งของซิลิคอนฟทาโลไซยานีน ซึ่งเป็นสารประกอบที่สังเคราะห์ทางเคมี ผลการศึกษาชี้ให้เห็นว่าสารประกอบเหล่านี้มีศักยภาพเป็นสารต้านมะเร็งที่มีประสิทธิภาพ [3] ที่น่าสนใจคือ งานวิจัยอีกชิ้นหนึ่งพบศักยภาพในการต้านมะเร็งของโปรตีน P8 ที่สกัดจากโปรไบโอติก โดยใช้เซลล์ DLD-1 เป็นตัวทดสอบ [4]
5. สิ่งพิมพ์งานวิจัยเกี่ยวกับเซลล์ DLD-1
ส่วนนี้จะเน้นย้ำถึงสิ่งพิมพ์ที่น่าสนใจและมีการอ้างอิงบ่อยครั้งซึ่งนำเสนอข้อมูลเกี่ยวกับสายเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ DLD-1
สิ่งพิมพ์นี้อยู่ในวารสาร Journal of Biologically Active Products from Nature (2022) การศึกษาพบว่าไดออสมิน ซึ่งเป็นฟลาโวนอยด์ สามารถกระตุ้นการตายของเซลล์ในเซลล์ DLD-1 และยังทำให้เกิดการหยุดชะงักของวัฏจักรเซลล์ ดังนั้นจึงอาจเป็นสารต้านมะเร็งที่มีศักยภาพ
การศึกษาในเซลล์และระบบสัตว์ (2018) ได้เสนอว่า เบรอมีเลน ซึ่งเป็นเอนไซม์ สามารถยับยั้งการกลายพันธุ์ของ DLD-1 KRAS และทำให้เกิดฤทธิ์ทำลายเซลล์อย่างรุนแรง
บทความวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในปี 2019 ในวารสาร "Environmental Toxicology" การศึกษานี้ได้สำรวจฤทธิ์ต้านเนื้องอกของสารประกอบธรรมชาติชื่อ Bergapten โดยใช้เซลล์ไลน์ DLD-1 ของเซลล์ลำไส้ใหญ่
การศึกษาในวารสาร Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) พบว่า นาโนคอมโพสิตของเคอร์คิวมิน/ออกไซด์ของเหล็ก มีประสิทธิภาพสูงในการต่อต้านเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ชนิด DLD-1
บทความวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในปี 2020 ในวารสารชีววิทยาแห่งประเทศตุรกี การศึกษาได้เสนอว่าผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ การกระตุ้น AKT ในเซลล์ DLD-1 ผ่านการสื่อของ epibrassinolide สามารถกระตุ้นการ autophagy ที่เกี่ยวข้องกับ polyamines
6. ทรัพยากรสำหรับเซลล์ไลน์ DLD-1: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่นๆ
ต่อไปนี้คือแหล่งข้อมูลบางส่วนเกี่ยวกับเซลล์ DLD-1:
- การถ่ายยีน DLD-1:วิดีโอสอนนี้เป็นคู่มือที่ครอบคลุมเกี่ยวกับโปรโตคอลการถ่ายยีน DLD-1 ในหลอดทดลอง
- เซลล์ DLD-1:บทความวิจัยฉบับนี้อธิบายโดยสังเขปเกี่ยวกับข้อกำหนดในการเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1 รวมถึงสื่อเลี้ยงเซลล์และสภาวะการเพาะเลี้ยง นอกจากนี้ อาจช่วยให้คุณเรียนรู้ขั้นตอนการถ่ายโอนยีนที่ใช้กับเซลล์ DLD-1 ได้อีกด้วย
ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ DLD-1 ซึ่งมีต้นกำเนิดจากมนุษย์
- สายเซลล์ DLD-1:เว็บไซต์นี้จะให้ข้อมูลพื้นฐานเกี่ยวกับสายเซลล์ DLD-1 ซึ่งจะช่วยให้คุณเรียนรู้เกี่ยวกับวิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1 ที่แตกต่างกัน รวมถึงการเพาะเลี้ยงย่อยและการจัดการเซลล์ที่เก็บรักษาในสภาพเยือกแข็งและเซลล์ที่กำลังเพิ่มจำนวน
เอกสารอ้างอิง
- Gavrilas, L.I., และคณะ,ยีนโปร-อะพอพโทติกส์เป็นเป้าหมายใหม่สำหรับการรักษาเดี่ยวและการรักษาแบบผสมผสานด้วยเรสเวอราทรอลและเคอร์คูมินในมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก.อาหาร & ฟังก์ชัน, 2019.10(6): หน้า 3717-3726.
- ทาเคดา, ที., และคณะ,การส่งสัญญาณ PI3K/Akt/YAP ส่งเสริมการเคลื่อนที่และการรุกรานของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก DLD-1.Oncology Letters, 2022.23(4): หน้า 1-9.
- ฟาราจซาเดห์, เอ็น., และคณะ,กิจกรรมต้านมะเร็งของสารประกอบฟทาโลไซยานีนซิลิคอนชนิดใหม่ต่อเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา (DLD-1).วารสารเคมีใหม่, 2022.46(41): หน้า 19863-19873.
- An, B.C., และคณะ,บทบาทต้านมะเร็งของโปรตีน P8 ที่ได้จากโปรไบโอติกในเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก DLD-1.วารสารนานาชาติด้านวิทยาศาสตร์โมเลกุล, 2023.24(12): หน้า 9857.