เซลล์ DLD-1: การประยุกต์ใช้และข้อมูลเชิงลึกของเซลล์ DLD-1 ในการวิจัยมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก
DLD-1 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็ง เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการศึกษาแง่มุมต่างๆ ของมะเร็งลำไส้ใหญ่ รวมถึงการพัฒนาของเนื้องอก การลุกลาม กลไกโมเลกุลพื้นฐาน และการตอบสนองต่อสารบำบัด ดังนั้น DLD-1 จึงโดดเด่นในการทำความเข้าใจโรคและพัฒนาแนวทางการรักษาที่มีศักยภาพ
- อาหารเลี้ยงเชื้อ
- RPMI 1640 พร้อมสารเสริมอาหาร รวมถึงเซรั่มจากเลือดวัวในครรภ์ 10% FBS, กลูตามีนเสถียร 2.1 มิลลิโมลาร์ และโซเดียมไบคาร์บอเนต 2.0 กรัม/ลิตร ใช้สำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1 สารอาหารควรเปลี่ยน 2-3 ครั้งต่อสัปดาห์
- เวลาสองเท่า
- เวลาสองเท่าของ DLD-1 ประมาณ 15 ชั่วโมง
- ประเภทการเติบโต
- DLD-1 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์ที่เกาะติดกัน เซลล์จะเจริญเติบโตเป็นชั้นเดียว
- ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ
- BSL-1
- มีจำหน่ายจาก
- ไซเทียน — สั่งซื้อ DLD-1
ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ DLD-1
ก่อนที่จะทำงานกับเซลล์ไลน์ นักวิจัยจะต้องพิจารณาถึงแหล่งกำเนิดและลักษณะทั่วไปของเซลล์ไลน์นั้นก่อนเสมอ ส่วนของบทความนี้จะเป็นการแนะนำอย่างละเอียดเกี่ยวกับเซลล์ไลน์ DLD-1 โดยจะครอบคลุมคำถามที่พบบ่อยดังต่อไปนี้: เซลล์ DLD-1 คืออะไร? เซลล์ไลน์มะเร็ง DLD-1 คืออะไร? การกลายพันธุ์ของเซลล์ไลน์ DLD-1 คืออะไร? ขนาดของเซลล์ DLD-1 คืออะไร? ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ DLD-1 คืออะไร?
- DLD-1 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ ซึ่งมีต้นกำเนิดจากลำไส้ใหญ่ของผู้ป่วยชายอายุ 67 ปี ที่เป็นมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก ได้รับการแยกโดย D.L. Dexter และคณะ ในช่วงปี 1977-1979 เซลล์ไลน์นี้มีแหล่งกำเนิดเดียวกันกับเซลล์ไลน์ HCT-8, HCT-15 และ HRT-18
- เช่นเดียวกับมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก เซลล์ DLD-1 มีลักษณะทางฟีโนไทป์ของความไม่เสถียรของไมโครแซทเทลไลท์ [1]
- การกลายพันธุ์ของ DLD-1 รวมถึง KRAS, P53, BRAF, BRCA1 และ BRCA2 เนื่องจากสถานะของ DLD-1 P53, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 และการกลายพันธุ์ของ DLD-1 KRAS เซลล์เหล่านี้จึงถือว่าเป็นตัวอย่างที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับมะเร็ง
- เซลล์เหล่านี้มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเยื่อบุผิว
- ขนาดของเซลล์ไลน์ DLD-1 ประมาณ 15 ไมโครเมตร
- เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักของมนุษย์สายพันธุ์ DLD-1 มีลักษณะโครโมโซมเทียมแบบไดพลอยด์ ประมาณ 86% ของเซลล์มีจำนวนโครโมโซมที่เป็นค่าโมดอลเท่ากับ 46 อย่างไรก็ตาม อาจพบภาวะพอลิพลอยด์ในประชากรเซลล์ 17.1%
การเพาะเลี้ยงข้อมูลของเซลล์ไลน์ DLD-1
ก่อนการเพาะเลี้ยงเซลล์ไลน์ใด ๆ คุณต้องทราบถึงข้อกำหนดพื้นฐานในการเพาะเลี้ยงเซลล์ของเซลล์ไลน์นั้น ๆ ก่อน บทนี้จะเน้นย้ำถึงจุดสำคัญที่คุณต้องเรียนรู้ก่อนเริ่มทำงานกับเซลล์ไลน์ DLD-1 ซึ่งรวมถึง: อะไรคือเวลาการเพิ่มจำนวนของเซลล์ DLD-1? อะไรคืออาหารเลี้ยงเชื้อ DLD-1? ความหนาแน่นของการเพาะเชื้อของเซลล์ DLD-1 คืออะไร? คุณจะเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1 ได้อย่างไร?
จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1
เวลาสองเท่า:
เวลาสองเท่าของ DLD-1 ประมาณ 15 ชั่วโมง
ติดกันหรือแขวนลอย:
DLD-1 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์ที่เกาะติดกัน เซลล์จะเจริญเติบโตเป็นชั้นเดียว
ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด:
เซลล์ DLD-1 ถูกเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 1 ถึง 2 x 104 เซลล์/ซม.2 เซลล์ที่เกาะติดถูกชะล้างด้วย 1x ฟอสเฟตบัฟเฟอร์เกลือ (PBS) และบ่มด้วยสารละลายการผ่านเซลล์ (Accutase) ที่อุณหภูมิห้อง หลังจากการบ่มเป็นเวลา 8 ถึง 10 นาที เซลล์ที่หลุดออกจะถูกเติมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อและนำไปปั่นเหวี่ยง จากนั้นนำตะกอนเซลล์ที่ได้มาแขวนลอยอย่างระมัดระวัง แล้วเทเซลล์ลงในภาชนะเลี้ยงเชื้อใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับการเจริญเติบโต
อาหารเลี้ยงเชื้อ:
RPMI 1640 พร้อมสารเสริมอาหารระดับกลาง รวมถึงเซรั่มจากเลือดวัวในครรภ์ 10% (FBS), กลูตามีนเสถียร 2.1 มิลลิโมลาร์ และโซเดียมไบคาร์บอเนต 2.0 กรัม/ลิตร ใช้สำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1 สารอาหารควรเปลี่ยน 2-3 ครั้งต่อสัปดาห์
เงื่อนไขการเจริญเติบโต:
วัฒนธรรม DLD-1 ถูกเก็บรักษาไว้ในตู้เพาะเลี้ยงที่มีความชื้นที่อุณหภูมิ 37°C พร้อมกับการจ่ายก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5%
การเก็บรักษา:
เซลล์ DLD-1 ถูกเก็บรักษาในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวหรือในตู้แช่แข็งอุณหภูมิต่ำพิเศษแบบไฟฟ้า (ที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C)
กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง:
สามารถใช้วัตถุดิบแช่แข็ง CM-1 หรือ CM-ACF เพื่อแช่แข็งเซลล์ DLD-1 ได้ แนะนำให้ใช้กระบวนการแช่แข็งอย่างช้าๆ โดยลดอุณหภูมิลงทีละ 1°C เพื่อป้องกันไม่ให้เซลล์เกิดการช็อกและรักษาความมีชีวิตของเซลล์ไว้
กระบวนการละลาย
เซลล์ที่ถูกแช่แข็งจะถูกละลายในอ่างน้ำที่ตั้งอุณหภูมิไว้ล่วงหน้า 37 °C เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที จนกระทั่งเหลือเป็นก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก จากนั้น นำเซลล์ไปเติมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และปั่นเหวี่ยง ขั้นตอนนี้มีความจำเป็นเพื่อกำจัดส่วนประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อที่ใช้ในการแช่แข็งออกจากเซลล์ เซลล์ที่รวบรวมได้จะถูกแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับการเจริญเติบโตและนำไปแบ่งใส่ขวดเลี้ยงเชื้อเพื่อเพาะเลี้ยงต่อไป
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ:
สายเซลล์ DLD-1 ได้รับการดูแลในห้องปฏิบัติการระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ 1
สายเซลล์ DLD-1: ข้อดีและข้อจำกัด
ในส่วนนี้ของบทความ เราจะทบทวนข้อดีและข้อจำกัดของสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ DLD-1
ข้อดี
ข้อได้เปรียบหลักของเซลล์ไลน์ DLD-1 คือ:
แบบจำลองมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก
เซลล์ DLD-1 มีการกลายพันธุ์ที่พบได้บ่อยในผู้ป่วยมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก เช่น การกลายพันธุ์ของ DLD-1 KRAS, DLD-1 BRCA และ DLD-1 BRCA2 ความเกี่ยวข้องนี้ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองเซลล์ที่เหมาะสมทางคลินิกสำหรับการศึกษาโรคนี้
เซลล์ไลน์ก่อเนื้องอก
เซลล์ DLD-1 เป็นเซลล์ก่อเนื้องอก สามารถก่อให้เกิดเนื้องอกเมื่อฉีดเข้าสู่หนูเมาส์ที่ไม่มีระบบภูมิคุ้มกัน (nude mice) ดังนั้น นักวิจัยจึงใช้เซลล์เหล่านี้ในการพัฒนาแบบจำลองเนื้องอกชนิด xenograft เพื่อช่วยในการศึกษาการก่อตัว การพัฒนา และการลุกลามของเนื้องอกในร่างกายสัตว์ทดลอง
ข้อจำกัด
ข้อจำกัดที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ DLD-1 ได้แก่:
ความไม่สม่ำเสมอ
ประชากรเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ DLD-1 แสดงความหลากหลายทางพันธุกรรมและลักษณะทางฟีโนไทป์ ซึ่งอาจส่งผลต่อความสามารถในการสรุปผลวิจัยในวงกว้าง
การประยุกต์ใช้เซลล์ไลน์ DLD-1 ในการวิจัย
เซลล์ไลน์ DLD-1 มีประโยชน์หลากหลายในการวิจัยมะเร็ง การประยุกต์ใช้ที่โดดเด่นบางประการจะกล่าวถึงในส่วนนี้
- การศึกษาโรคมะเร็ง: เซลล์ DLD-1 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่มีคุณค่าสำหรับการทำความเข้าใจกลไกทางโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการเจริญเติบโต การพัฒนา และการลุกลามของมะเร็งลำไส้ใหญ่ นอกจากนี้ยังถูกใช้ในการศึกษาการแสดงออกของยีน เส้นทางการส่งสัญญาณ และอิทธิพลของการกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมเฉพาะต่อพฤติกรรมของเซลล์มะเร็ง การวิจัยที่ดำเนินการในปี 2022 สังเกตเห็นว่า กระบวนการส่งสัญญาณ PI3K/Akt/YAP ควบคุมการเคลื่อนที่และการบุกรุกของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิด DLD‑1 [2]
- การพัฒนาตัวยา: นักวิจัยใช้เซลล์ไลน์ DLD-1 ในการทดสอบประสิทธิภาพของยาต้านมะเร็งและประเมินศักยภาพในการรักษาโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่ ซึ่งช่วยในการพัฒนายาและต่อสู้กับโรคได้อย่างมีประสิทธิภาพ การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2022 ได้ใช้เซลล์มะเร็งสายพันธุ์ DLD-1 และสำรวจฤทธิ์ต้านมะเร็งของซิลิคอนฟทาโลไซยานีน ซึ่งเป็นสารประกอบที่สังเคราะห์ทางเคมี ผลการศึกษาชี้ให้เห็นว่าสารประกอบเหล่านี้มีศักยภาพเป็นสารต้านมะเร็งที่มีประสิทธิภาพ [3] ที่น่าสนใจคือ งานวิจัยอีกชิ้นหนึ่งพบศักยภาพในการต้านมะเร็งของโปรตีน P8 ที่สกัดได้จากโปรไบโอติก โดยใช้เซลล์ DLD-1 [4]
5. งานวิจัยที่ตีพิมพ์เกี่ยวกับเซลล์ DLD-1
ส่วนนี้จะเน้นย้ำถึงสิ่งพิมพ์ที่น่าสนใจและมีการอ้างอิงบ่อยครั้งซึ่งนำเสนอข้อมูลเกี่ยวกับสายเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ DLD-1
สิ่งพิมพ์นี้อยู่ในวารสาร Journal of Biologically Active Products from Nature (2022) การศึกษาพบว่าไดออสมิน ซึ่งเป็นฟลาโวนอยด์ สามารถกระตุ้นการตายของเซลล์ในเซลล์ DLD-1 และยังทำให้เกิดการหยุดชะงักของวัฏจักรเซลล์ ดังนั้นจึงอาจเป็นสารต้านมะเร็งที่มีศักยภาพ
การศึกษาในเซลล์และระบบสัตว์ (2018) ได้เสนอว่า เบรอมีเลน ซึ่งเป็นเอนไซม์ สามารถยับยั้งการกลายพันธุ์ของ DLD-1 KRAS และทำให้เกิดฤทธิ์ทำลายเซลล์อย่างรุนแรง
บทความวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในปี 2019 ในวารสาร "Environmental Toxicology" การศึกษานี้สำรวจผลต้านเนื้องอกของสารประกอบธรรมชาติ เบอร์กอปเทน โดยใช้เซลล์ไลน์ DLD-1 ของเซลล์ลำไส้ใหญ่
การศึกษาในวารสาร Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) พบว่า อนุภาคนาโนคอมโพสิตของเคอร์คูมิน/ออกไซด์ของเหล็ก มีประสิทธิภาพสูงในการต่อต้านเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิด DLD-1
บทความวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในปี 2020 ในวารสารชีววิทยาแห่งประเทศตุรกี การศึกษานี้เสนอว่าผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ การกระตุ้น AKT ในเซลล์ DLD-1 ผ่านการสื่อของ epibrassinolide สามารถกระตุ้นการเกิดออโตฟาจีที่เกี่ยวข้องกับโพลีเอมีน
ทรัพยากรสำหรับเซลล์ไลน์ DLD-1: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ
ต่อไปนี้คือแหล่งข้อมูลบางส่วนเกี่ยวกับเซลล์ DLD-1:
- การถ่ายยีน DLD-1: วิดีโอสอนนี้เป็นคู่มือที่ครอบคลุมเกี่ยวกับโปรโตคอลการถ่ายยีน DLD-1 ในหลอดทดลอง
- เซลล์ DLD-1: บทความวิจัยฉบับนี้อธิบายโดยสังเขปเกี่ยวกับข้อกำหนดในการเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1 รวมถึงสื่อเลี้ยงเซลล์และสภาวะการเพาะเลี้ยง นอกจากนี้ อาจช่วยให้คุณเรียนรู้ขั้นตอนการถ่ายโอนยีนที่ใช้กับเซลล์ DLD-1 ได้อีกด้วย
ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ DLD-1 ซึ่งมีต้นกำเนิดจากมนุษย์
- สายเซลล์ DLD-1: เว็บไซต์นี้จะให้ข้อมูลพื้นฐานเกี่ยวกับสายเซลล์ DLD-1 ซึ่งจะช่วยให้คุณเรียนรู้เกี่ยวกับวิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ DLD-1 ที่แตกต่างกัน รวมถึงการเพาะเลี้ยงย่อยและการจัดการเซลล์ที่เก็บรักษาในสภาพแช่แข็งและเซลล์ที่กำลังเพิ่มจำนวน
เอกสารอ้างอิง
- Gavrilas, L.I., และคณะ, ยีนที่ส่งเสริมการตายของเซลล์ (pro-apoptotic genes) เป็นเป้าหมายใหม่สำหรับการรักษาแบบเดี่ยวและแบบผสมผสานด้วยเรสเวอราทรอลและเคอร์คูมินในมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก. อาหารและการทำงาน, 2019. 10(6): หน้า 3717-3726.
- ทาเคดา, ที., และคณะ, การส่งสัญญาณ PI3K/Akt/YAP ส่งเสริมการเคลื่อนที่และการรุกรานของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): หน้า 1-9.
- ฟาราจซาเดห์, เอ็น., และคณะ, กิจกรรมต้านมะเร็งของสารประกอบซิลิคอนฟทาโลไซยานีนชนิดใหม่ต่อเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา (DLD-1). วารสารเคมีฉบับใหม่, 2022. 46(41): หน้า 19863-19873.
- An, B.C., และคณะ, บทบาทต้านมะเร็งของโปรตีน P8 ที่ได้จากโปรไบโอติกในเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก DLD-1. วารสารนานาชาติด้านวิทยาศาสตร์โมเลกุล, 2023. 24(12): หน้า 9857.