เซลล์ A431 - การวิเคราะห์เชิงลึกของเซลล์มะเร็งผิวหนังชนิดเอพิเดอร์โมอิดในการวิจัยทางผิวหนัง
A431เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งผิวหนังชนิดเอพิเดอร์โมอิดของมนุษย์ ใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านการวิจัยชีวการแพทย์ โดยเฉพาะในชีววิทยาของมะเร็ง ภูมิคุ้มกันมะเร็งวิทยา และพิษวิทยา นอกจากนี้ เซลล์ A431 ยังมีการแสดงออกของ EGFR (ตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง) ในระดับสูง จึงถูกใช้เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่มีคุณค่าในการศึกษาวงจรเซลล์และเส้นทางการส่งสัญญาณของเซลล์ที่เกี่ยวข้องกับมะเร็ง
บทความนี้จะอธิบายพื้นฐานของเซลล์มะเร็งสายพันธุ์ A431 คุณจะเรียนรู้สิ่งต่อไปนี้:
- เซลล์ A431: ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิด
- สายพันธุ์เซลล์ A431: ข้อมูลการเพาะเลี้ยง
- ข้อดีและข้อเสียของเซลล์ไลน์ A431
- การวิจัยการประยุกต์ใช้เซลล์ A431
- สิ่งพิมพ์งานวิจัยที่นำเสนอเซลล์ A431
- ทรัพยากรสำหรับสายเซลล์ A431: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ
1.เซลล์ A431: ลักษณะทั่วไปและแหล่งที่มา
ส่วนนี้จะช่วยให้คุณทราบข้อมูลทั่วไปเกี่ยวกับสายเซลล์ A431 ที่คุณจำเป็นต้องรู้ก่อนทำงานกับมัน เช่น อะไรคือที่มาของสายเซลล์ A431? ลักษณะของสายเซลล์ A431 คืออะไร? รูปร่างของเซลล์ A431 เป็นอย่างไร? เซลล์ A431 มาจากไหน?
- A431, สายพันธุ์เซลล์มะเร็งผิวหนังของมนุษย์, ได้มาจากผิวหนังชั้นนอกของผู้ป่วยหญิงอายุ 85 ปีที่เป็นมะเร็งผิวหนังชนิดเอพิเดอร์โมอิด [1] สายพันธุ์นี้ถูกสร้างขึ้นโดย D.J. Giard และคณะ ซึ่งได้พัฒนาสายพันธุ์เซลล์อื่นๆ อีกมากมายจากเนื้องอกชนิดแข็ง
- เซลล์ A-431 มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาเป็นเซลล์เยื่อบุผิว พวกมันรวมตัวกันและก่อตัวเป็นกลุ่มเซลล์
- เซลล์มะเร็งผิวหนังสายพันธุ์ a431 เป็นเซลล์ที่มีโครโมโซมเกินสามเท่า (hypertriploid) จำนวนโครโมโซมที่เป็นค่าส่วนใหญ่ (modal) ของเซลล์สายพันธุ์นี้คือ 74 ซึ่งพบในประมาณ 36% ของเซลล์ทั้งหมด นอกจากนี้ยังพบเซลล์ที่มีจำนวนโครโมโซมมากกว่าปกติในระดับที่สูงขึ้น (ploidies สูงกว่า) ในประมาณ 1% ของประชากรเซลล์
2. สายเซลล์ A431: ข้อมูลการเพาะเลี้ยง
การรู้ถึงข้อกำหนดและขั้นตอนในการเพาะเลี้ยงเซลล์ของสายพันธุ์เซลล์สามารถทำให้การจัดการเป็นไปอย่างราบรื่น ส่วนนี้จะช่วยให้คุณเรียนรู้จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงสายพันธุ์เซลล์ A431 เช่น คุณจะทราบเวลาในการเพิ่มจำนวนของเซลล์ A431 คืออะไร? สายพันธุ์เซลล์ A431 เป็นเซลล์ที่เกาะติดหรือไม่? สื่อการเจริญเติบโตที่ใช้สำหรับ A431 คืออะไร?
จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ A431
|
เวลาสองเท่า: |
ระยะเวลาการเพิ่มจำนวนประชากรของเซลล์ A431 อยู่ระหว่าง 80 ถึง 100 ชั่วโมง |
|
ติดกันหรือแขวนลอย: |
A431 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติด |
|
ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด: |
ความหนาแน่นของเซลล์ 1 x104เซลล์/cm2เป็นค่าที่เหมาะสมสำหรับเซลล์สายพันธุ์ A431 เซลล์จะใช้เวลาประมาณ 4 วันในการเจริญเติบโตจนเต็มแผ่นที่ความหนาแน่นนี้ เซลล์ที่เกาะติดถูกชะล้างด้วย PBS (1x) และบ่มด้วยสารละลาย Accutase สำหรับการแยกเซลล์ หลังจากนั้นเซลล์ถูกแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเซลล์และปั่นเหวี่ยง เซลล์ที่เก็บได้ถูกแขวนลอยอีกครั้งและแบ่งใส่ขวดเพาะเลี้ยงใหม่เพื่อเพิ่มจำนวน |
|
อาหารเลี้ยงเชื้อ: |
ใช้ DMEM ที่มีอาหารเสริม 10% ของเซรั่มจากเลือดวัวตัวเมีย, 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, 1.5 กรัม/ลิตร NaHCO3, และ 4 มิลลิโมลาร์ L-Glutamine ในการเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์ A431 สื่อควรเปลี่ยนทุก 2 ถึง 3 วันต่อสัปดาห์ |
|
เงื่อนไขการเจริญเติบโต: |
เซลล์มะเร็ง A431 ถูกเพาะเลี้ยงในตู้บ่มที่มีอากาศชื้นพร้อมแหล่งก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส |
|
การเก็บรักษา: |
สายพันธุ์เซลล์สามารถเก็บรักษาไว้ในตู้แช่แข็งไฟฟ้าหรือในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150 องศาเซลเซียส เนื่องจากช่วยในการปกป้องความมีชีวิตของเซลล์ |
|
กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง: |
CM-1 หรือ CM-ACF เป็นสองสื่อแช่แข็งที่แนะนำอย่างสูงสำหรับเซลล์ A431. เซลล์ถูกแช่แข็งโดยใช้วิธีแช่แข็งช้าซึ่งทำให้อุณหภูมิลดลงเพียง 1 องศาต่อนาที. |
|
กระบวนการละลาย |
เซลล์ A431 ที่ถูกแช่แข็งจะถูกละลายในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสซึ่งมีสารต้านจุลชีพอยู่เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที เมื่อเหลือเพียงก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก เซลล์จะถูกเติมด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อและปั่นเหวี่ยง เซลล์ที่เก็บเกี่ยวได้จะถูกแขวนลอยและเทลงในขวดเลี้ยงเชื้อเพื่อการเจริญเติบโต |
|
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ: |
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพระดับหนึ่งแนะนำให้ใช้ในการจัดการและบำรุงรักษาวัฒนธรรม A431 |
3. ข้อดี & ข้อเสียของเซลล์ไลน์ A431
เซลล์ไลน์ A431 มีลักษณะเฉพาะที่โดดเด่นและมีข้อดีข้อเสียหลายประการ ในที่นี้ เราได้สรุปไว้บางประการด้านล่าง
ข้อดี
ข้อได้เปรียบหลักของเซลล์มะเร็งสายพันธุ์ A431 ได้แก่:
|
การเพิ่มการแสดงออกของ EGFR |
เซลล์ A431 มีการแสดงออกของตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGFR) ในระดับสูง เซลล์เหล่านี้ใช้เป็นกลุ่มควบคุมบวกในการศึกษาการส่งสัญญาณของ EGFR และผลกระทบของมันในมะเร็ง นอกจากนี้ยังใช้เพื่อประเมินการรักษาโรคมะเร็งใหม่ๆ |
|
การก่อให้เกิดเนื้องอก |
เซลล์ A431 เป็นเซลล์ก่อเนื้องอกและมีความสามารถในการก่อตัวเป็นเนื้องอก สามารถใช้เพื่อพัฒนาแบบจำลองมะเร็งในสัตว์ทดลอง ซึ่งเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการศึกษาพลวัตการเจริญเติบโตของเนื้องอกและประเมินวิธีการรักษามะเร็งใหม่ๆ |
ข้อเสีย
ข้อเสียของเซลล์ A431 คือ:
|
ความผิดปกติทางพันธุกรรม |
A431 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งที่ประกอบด้วย การกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมและการเปลี่ยนแปลงที่อาจทำให้แตกต่างจากลักษณะของเนื้องอกต้นกำเนิด |
|
การปนเปื้อนของจุลินทรีย์ |
A431 มีแนวโน้มที่จะปนเปื้อนจุลินทรีย์ โดยเฉพาะการปนเปื้อนจากแบคทีเรีย อย่างไรก็ตาม การรักษามาตรฐานของสภาวะการเพาะเลี้ยงแบบปลอดเชื้อสามารถช่วยป้องกันการปนเปื้อนดังกล่าวในเซลล์เพาะเลี้ยง A431 ได้ |