Fibroblastične celice človeške predkožke (HFFC)

700,00 €*

Številka izdelka: 300715

Opis	Človeške fibroblastne celice iz predkožice (HFFC) izhajajo iz fibroblastnega tkiva mladostne predkožice. Te celice so bistveno orodje v študiju človeške biologije, zlasti v raziskavah, povezanih z celjenjem ran, biologijo kože in celično staranje. Fibroblasti imajo ključno vlogo pri sintezi ekstracelularne matrice in kolagena, ki sta bistvena sestavna dela vezivnega tkiva. HFFC se pogosto uporabljajo v poskusih, ki raziskujejo mehanizme razvoja kože, preoblikovanja dermisa in celičnih odzivov na različne rastne faktorje in citokine. HFFC se odlikujejo po vretenasti morfologiji in sposobnosti hitre proliferacije in vitro, zaradi česar so primerni za različne eksperimentalne aplikacije, vključno s tkivnim inženirstvom, regenerativno medicino in presejanjem zdravil. Te celice so dragocene tudi v študijah, ki preučujejo učinke UV-sevanja na kožne celice, patofiziologijo fibrotičnih bolezni in proces staranja kože. Zaradi svojega neonatalnega izvora je manj verjetno, da so HFFC nakopičile mutacije v primerjavi z odraslimi fibroblasti, kar jih naredi idealni model za preučevanje primarnih celičnih funkcij.
Organizem	Človek
Tkivo	Predkožka

Morfologija	Fibroblast
Lastnosti rasti	Pripadajoče

Citiranje	Fibroblastične celice človeške predkožke (HFFC) (kataloška številka Cytion 300715)
NCBI_TaxID	9606

Medij za gojenje	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Dodatki	Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 10 ng/ml bFGF, 10 mikrogramov/l inzulina
Reagent za disociacijo	Accutase
Subkultiviranje	Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Sredstvo za zamrzovanje	Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo 90 % FBS + 10 % DMSO za ohranjanje viabilnosti ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100), ki vsebuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, ki ga povzroča krio.
Odmrzovanje in gojenje celic	Prepričajte se, da je viala ob dostavi globoko zamrznjena, saj se celice pošiljajo na suhem ledu, da se med prevozom ohranijo optimalne temperature. Po prejemu kriovial takoj shranite pri temperaturi pod -150 °C, da zagotovite ohranitev celične celovitosti, ali pa nadaljujte s korakom 3, če je potrebno takojšnje gojenje. Za takojšnje gojenje vialo hitro odtalite tako, da jo potopite v vodno kopel s čisto vodo in protimikrobnim sredstvom pri 37 °C ter 40-60 sekund nežno mešate, dokler ne ostane majhen ledeni kepica. Vse nadaljnje korake izvajajte v sterilnih pogojih v pretočni nape, pred odprtjem pa kriovial razkužite s 70 % etanolom. Previdno odprite razkuženo vialo in celično suspenzijo prenesite v 15-mililitrsko centrifugirno epruveto, ki vsebuje 8 ml gojišča sobne temperature, ter nežno premešajte. Mešanico centrifugirajte pri 300 x g 3 minute, da ločite celice, in previdno zavrzite supernatant, ki vsebuje ostanke zamrzovalnega gojišča. Pelet celic nežno ponovno suspendirajte v 10 ml svežega gojišča. Pri adherentnih celicah suspenzijo razdelite med dve bučki T25; pri suspenzijskih kulturah prenesite vse gojišče v eno bučko T25, da spodbudite učinkovito interakcijo in rast celic. Upoštevajte uveljavljene protokole subkultur za nadaljnjo rast in vzdrževanje celične linije ter tako zagotovite zanesljive rezultate poskusov.
Inkubacijska atmosfera	37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.
Prevleka za bučke	Za optimalno pritrditev in sposobnost preživetja po odmrznitvi priporočamo uporabo s kolagenom prevlečenih bučk ali plošč.
Postopek zamrzovanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji pošiljanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji shranjevanja	Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Sterilnost	Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence. Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Če nameravate celične linije Cytion uporabljati izključno za notranje raziskave na enem raziskovalnem mestu, izpolnite in podpišite našo pogodbo o prenosu materiala (MTA) in jo predložite skupaj z vašim naročilom.

Za vse komercialne namene – vključno z, vendar ne omejeno na, delo za plačilo, testiranje kakovosti, sproščanje izdelkov, diagnostično uporabo ali regulativne študije – izpolnite obrazec za nameravano uporabo, da bomo lahko pripravili ustrezno pogodbo, prilagojeno vašemu projektu.

Opomba: MTA velja le za določene celične linije. Če se to obvestilo in dokument MTA pojavita na strani izdelka, sporazum velja. Za celične linije, ki niso zajete v MTA, se sklic na sporazum ne prikaže. MTA ne velja za stranke v Ameriki, na Kitajskem ali Tajvanu. Za ustrezen sporazum se obrnite na našo ameriško podružnico.

Fibroblastične celice človeške predkožke (HFFC)

Splošne informacije

Značilnosti

Regulativni podatki

Biomolekularni podatki

Ravnanje s spletno stranjo

Nadzor kakovosti / Genetski profil / HLA

Sporazum o prenosu materiala