DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 je splošno priznano in široko uporabljano osnovno gojišče v celičnih kulturah za biološke raziskave. Služi kot temeljni vir hranilnih snovi za rast različnih linij sesalskih celic, zlasti če je dopolnjeno s fetalnim govejim serumom (FBS).
Ta edinstvena formulacija združuje Dulbeccov modificiran Eagleov medij (DMEM) in Hamov F-12 (Hamova mešanica hranil F-12) v natančnem razmerju 1:1. Dodatek L-glutamina dodatno izboljša njegovo sestavo.
DMEM, ki izhaja iz Eagleovega minimalnega esencialnega medija (EMEM), ponuja višjo koncentracijo aminokislin in vitaminov v primerjavi s svojim predhodnikom. Nasprotno pa Hamov F-12 temelji na Hamovem F-10 mediju in zagotavlja dopolnilni nabor esencialnih sestavin.
Za podporo optimalne rasti celic je običajna praksa, da se DMEM:Ham's F12 dopolni s FBS v tipični koncentraciji 5–10 %. Ta dodatek je potreben, saj mediju primanjkuje rastnih hormonov, lipidov in beljakovin, ki so ključni za celični razvoj.
DMEM:Ham's F12 vključuje sistem za uravnavanje pH in se pogosto dopolnjuje s fenol rdečim, indikatorjem pH. Gojene celice v DMEM:Ham's F12 ali katerem koli mediju, ki uporablja bikarbonatni puferski sistem, zahtevajo nadzorovano okolje s 5–10 % CO2 za ohranjanje ustreznih ravni pH.
Kontrola kakovosti
- Sterilno filtrirano
Shranjevanje in rok uporabnosti
- Shranjujte pri temperaturi od +2 °C do +8 °C, zaščiteno pred svetlobo.
- Po odprtju shranjujte pri 4 °C in porabite v 6–8 tednih.
Pogoji za pošiljanje
- Temperatura okolja
Vzdrževanje
- Hranite v hladilniku pri temperaturi od +2 °C do +8 °C v temi. Izogibajte se zamrzovanju in pogostemu segrevanju na +37 °C, saj to zmanjša kakovost izdelka.
- Medija ne segrevajte nad 37 °C in ne uporabljajte nekontroliranih virov toplote, kot so mikrovalovne pečice.
- Če nameravate uporabiti le del gojišča, odvzemite potrebno količino in jo pred uporabo segrejte na sobno temperaturo.
Sestava
| Kategorija | Sestavine | Koncentracija (mg/l) |
| Aminokisline | Glicin | 18,75 |
| L-alanin | 4,45 | |
| L-arginin HCl | 147,50 | |
| L-asparagin H₂O | 7,50 | |
| L-asparaginska kislina | 6,65 | |
| L-cistein HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cistin 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutaminska kislina | 7,35 | |
| L-glutamin | 365,00 | |
| L-histidin HCl H₂O | 31,48 | |
| L-izoleucin | 54,47 | |
| L-levcin | 59,05 | |
| L-lizin HCl | 91,25 | |
| L-metionin | 17,24 | |
| L-fenilalanin | 35,48 | |
| L-prolin | 17,25 | |
| L-serin | 26,25 | |
| L-treonin | 53,45 | |
| L-triptofan | 9,02 | |
| L-tirozin 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valin | 52,85 | |
| Vitamini | D-biotin | 0,0035 |
| Holin klorid | 8,98 | |
| D-kalcijev pantotenat | 2,24 | |
| Folna kislina | 2,66 | |
| mio-inozitol | 12,60 | |
| Nikotinamid | 2,02 | |
| Piridoksin HCl | 0,031 | |
| Piridoksal HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Tiamin HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Anorganske soli | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na2HPO4 | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Druge sestavine | D-glukoza | 3151,00 |
| Hipoksantin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolna kislina | 0,042 | |
| Lipoična kislina | 0,105 | |
| Fenol rdeča natrijeva sol | 8,63 | |
| Putrescin 2 HCl | 0,081 | |
| Natrijev piruvat | 55,00 | |
| Timidin | 0,365 |