Celice NCH612

1.080,00 €*

Izdelki se pošiljajo zamrznjeni v suhem ledu v kriotubah. Vsaka kriotuba običajno vsebuje 3 × 10 ⁶ celic za adhezivne linije ali 5 × 10⁶ celic za suspenzijske linije (podrobnosti so navedene v certifikatu o analizi serije).

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300121

Varnostni list

List izdelka

Sporazum s tretjo osebo

Opis	NCH612 je oligodendrocitna celična linija, ki izvira iz človeškega možganskega tkiva in služi kot ustrezen raziskovalni model za anaplastični oligodendrogliom (razred III po WHO). Ta celična linija vsebuje mutacijo IDH1 R132H, značilno genetsko spremembo, ki je pogosto povezana z oligodendrogliomi. Mutacija povzroča epigenetske spremembe, vključno s fenotipom gliomskega metilatorja otokov CpG (G-CIMP), kar prispeva k razvoju in napredovanju tumorja. NCH612 ima delno delecijo kromosomskih rokavov 1p in 19q, kar je genetska značilnost, ki jo pogosto najdemo pri oligodendrogliomih in je povezana z boljšo prognozo in odzivom na nekatere terapije. Študije so pokazale, da je NCH612 še posebej občutljiv na zaviralec metiltransferaze DNK desetiabin (DAC). Zdravljenje z DAC povzroči zmanjšano proliferacijo celic in nastajanje kolonij, predvsem zaradi znižanja regulacije TERT (telomerazne reverzne transkriptaze) in povečanja regulacije p21, inhibitorja ciklinsko odvisne kinaze, ki sodeluje pri odzivu na poškodbe DNK. Zanimivo je, da je ta občutljivost povezana z mutacijo IDH1 in kodno delecijo 1p/19q, saj so druge celične linije gliomov z mutacijo IDH1 brez te delecije, kot je NCH1681, odporne na DAC. Te ugotovitve kažejo, da bi lahko bila epigenetska zdravljenja, kot je DAC, še posebej učinkovita pri anaplastičnih oligodendrogliomih z mutacijo IDH1 in delecijo kode 1p/19q. Nadaljnje molekularne raziskave razkrivajo, da zdravljenje z DAC v celicah NCH612 povzroči obogatitev poti, povezanih z replikacijo DNK, uravnavanjem celičnega cikla in lizosomskim delovanjem, kar osvetljuje mehanizem delovanja zdravila. Zatiranje TERT z DAC poteka prek p21, kar poudarja ključno vlogo te poti pri odzivu na epigenetsko zdravljenje. Zaradi dobro opredeljenega genetskega in epigenetskega profila predstavlja NCH612 dragocen in vitro model za preučevanje biologije anaplastičnih oligodendrogliomov in za razvoj ciljanih terapij, namenjenih tumorjem z mutantnim IDH1 in kodifikacijo 1p/19q.
Organizem	Človek
Tkivo	Možgani
Bolezen	Anaplastični oligodendrogliom, WHO razred III, mutacija IDH1 (R132H)

Starost	39 let
Spol	Moški
Etnična pripadnost	Kavkaški
Lastnosti rasti	Sferoidna kultura

Citiranje	NCH612 (kataloška številka Cytion 300121)
Raven biološke varnosti	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_x913

Medij za gojenje	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Dodatki	Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 5 mg/L heparina, 20 ng/ml bFGF, 20 mikrogramov/L EGF, 5 mg/L insulina, 100 mg/L transferina, 5,2 mikrograma/L Na-selenita, 6,3 mikrograma/L progesterona, 161,1 mikrograma/L putrescina, 50 mg/L hidrokortinsona
Subkultiviranje	Pri subkultiviranju sferoidnih kultur začnite z mehansko disociacijo sferoidov s pipetiranjem gor in dol 5 do 10-krat z uporabo Eppendorfove pipete s 1000 μl filtrirnimi konicami. Nato mešanico centrifugirajte pri 300 g 5 minut pri sobni temperaturi, da se celice izločijo. Zavrzite supernatant in ponovno suspendirajte celično peleto v svežem gojišču. Resuspendirane celice prenesite v nove posode za gojenje, da spodbudite nadaljnjo tvorbo sferoidov. Ta pristop zagotavlja učinkovito razgradnjo sferoidov in jih pripravi za nadaljnjo rast v novem okolju
Gostota setve	1 x 10⁵ celic/ml
Obnova tekočin	Sveže gojišče je treba dodajati vsake 2 do 3 dni (2 do 5 ml, odvisno od velikosti bučke za gojenje celic).
Okrevanje po odtajanju	Počasi. Po odmrzovanju pustite celice, da si opomorejo od zamrzovanja vsaj 48 ur.
Sredstvo za zamrzovanje	Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo 50 % osnovno gojišče + 40 % FBS + 10 % DMSO ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100), ki vsebuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, ki ga povzroča krio.
Odmrzovanje in gojenje celic	Prepričajte se, da je viala ob dostavi globoko zamrznjena, saj se celice pošiljajo na suhem ledu, da se med prevozom ohranijo optimalne temperature. Po prejemu kriovial takoj shranite pri temperaturi pod -150 °C, da zagotovite ohranitev celične celovitosti, ali pa nadaljujte s korakom 3, če je potrebno takojšnje gojenje. Za takojšnje gojenje vialo hitro odtalite tako, da jo potopite v vodno kopel s čisto vodo in protimikrobnim sredstvom pri 37 °C ter 40-60 sekund nežno mešate, dokler ne ostane majhen ledeni kepica. Vse nadaljnje korake izvajajte v sterilnih pogojih v pretočni nape, pred odprtjem pa kriovial razkužite s 70 % etanolom. Previdno odprite razkuženo vialo in celično suspenzijo prenesite v 15-mililitrsko centrifugirno epruveto, ki vsebuje 8 ml gojišča sobne temperature, ter nežno premešajte. Mešanico centrifugirajte pri 300 x g 3 minute, da ločite celice, in previdno zavrzite supernatant, ki vsebuje ostanke zamrzovalnega gojišča. Pelet celic nežno ponovno suspendirajte v 10 ml svežega gojišča. Pri adherentnih celicah suspenzijo razdelite med dve bučki T25; pri suspenzijskih kulturah prenesite vse gojišče v eno bučko T25, da spodbudite učinkovito interakcijo in rast celic. Upoštevajte uveljavljene protokole subkultur za nadaljnjo rast in vzdrževanje celične linije ter tako zagotovite zanesljive rezultate poskusov.
Inkubacijska atmosfera	37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.
Prevleka za bučke	Nič
Postopek zamrzovanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji pošiljanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji shranjevanja	Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Sterilnost	Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence. Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
Aleli HLA	A: '02:01:01 B: '57:01:01, '57:01:01G C: '04:01:01 DRB1: '11:01:01 DQA1: '05:05:01 DQB1: '03:01:01 DPB1*: '04:02:01 E: '01:03:02

Upoštevajte, da ta celična linija ni na voljo v okviru standardnega sporazuma Cytion MTA, saj je zanjo potreben sporazum s tretjo stranjo in/ali se je treba pogajati s prvotnim izdajateljem licence.

Celice NCH612

Splošne informacije

Značilnosti

Regulativni podatki

Biomolekularni podatki

Ravnanje s spletno stranjo

Nadzor kakovosti / Genetski profil / HLA

Sporazum s tretjo osebo