Celice HMC3

550,00 €*

Izdelki se pošiljajo zamrznjeni v suhem ledu v kriotubah. Vsaka kriotuba običajno vsebuje 3 × 10 ⁶ celic za adhezivne linije ali 5 × 10⁶ celic za suspenzijske linije (podrobnosti so navedene v certifikatu o analizi serije).

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300102

Varnostni list

List izdelka

Potrdilo o analizi (CoA)

Sporazum o prenosu materiala

Opis	Celično linijo Human Microglial Clone 3 (HMC3) je leta 1995 razvila ekipa profesorja Tardieuja z imortalizacijo mikroglijskih celic iz človeških tkiv hrbtenjače in skorje, pridobljenih iz zarodkov, starih od 8 do 12 tednov, v odvisnosti od SV40. Te primarne celice, za katere je značilna počasna delitev in kompleksna morfologija, so bile pred imortalizacijo najprej gojene 10-15 dni. Celice HMC3 so ohranile več ključnih značilnosti primarnih mikroglijev, kot je raznoliko izražanje mieloidnih označevalcev, kot so CD68, CD11b in CD14, čeprav so se ravni izražanja zelo razlikovale glede na izbiro primarnega protitelesa, zlasti za CD68. Po imortalizaciji so celice HMC3 pokazale večjo stopnjo proliferacije, pri čemer se je čas podvojitve gibal med 24 in 48 urami, hkrati pa so ohranile številne fenotipske in morfološke značilnosti svojih primarnih kolegov. V primerjavi s primarnimi celicami je bil delež celic, pozitivnih na CD68 EBM/11, večji, fagocitna aktivnost pa manjša. Stabilnost antigenskega izražanja je bila potrjena v 35 prehodih, pri čemer so celice ostale pozitivne za NSE, CD68 in CD11b, vendar negativne za CD14, MHCII in CD4 v osnovnih pogojih. Vendar je izpostavljenost interferonu-γ (IFNγ) povečala izražanje MHCII, kar se bolj ujema z odzivi primarnih kultur na isto zdravljenje. Funkcionalno se je linija HMC3 razlikovala po tem, da je v primerjavi z drugimi kloni v osnovnih pogojih proizvajala višje ravni interlevkina-6 (IL-6). Kljub temu je neposredna primerjava s proizvodnjo citokinov v primarnih mikroglijskih celicah zaradi metodoloških razlik še vedno težavna. Odziv na stimulacijo z lipopolisaharidom (LPS) v teh imortaliziranih linijah je bil v primerjavi s primarnimi kulturami manjši. V skladu z značilnostmi primarnih mikroglij HMC3 in druge klonirane linije niso proizvajale tumorskega nekroznega faktorja alfa (TNFα) niti spontano niti po pro-vnetni stimulaciji, kar poudarja posebno lastnost človeških embrionalnih mikroglij.
Organizem	Človek
Tkivo	Plodovi možgani
Aplikacije	3D celična kultura, nevroznanost, nevroinflamacija
Sinonimi	Klon 3 človeških mikroglijev, CHME-3, CHME3

Starost	Plod
Spol	Neopredeljeno
Morfologija	Makrofagi
Vrsta celice	Mikroglijska celica
Lastnosti rasti	Pripadajoče

Citiranje	HMC3 (kataloška številka Cytion 300102)
Raven biološke varnosti	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_II76
Status GSO	GMO-S1: Ta celična linija mikroglije človeških fetalnih možganov (HMC3) vsebuje konstrukt SV40 T-Antigen, vnesen s transfekcijo, ki podpira imortalizacijo. Vstavek je stabilno prisoten v celicah, ki izvirajo iz mikroglije. Ta razvrstitev velja samo v Nemčiji in se lahko drugje razlikuje.

Virusi	Genetski material SV40 je stabilno integriran v genom celice. Pri tem ne prihaja do aktivne proizvodnje ali sproščanja popolnih virusnih delcev, kar zmanjšuje morebitne pomisleke glede biološke varnosti.

Medij za gojenje	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Dodatki	Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagent za disociacijo	Accutase
Čas podvojitve	24 in 48 ur
Subkultiviranje	Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Sredstvo za zamrzovanje	Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Odmrzovanje in gojenje celic	Prepričajte se, da je viala ob dostavi globoko zamrznjena, saj se celice pošiljajo na suhem ledu, da se med prevozom ohranijo optimalne temperature. Po prejemu kriovial takoj shranite pri temperaturi pod -150 °C, da zagotovite ohranitev celične celovitosti, ali pa nadaljujte s korakom 3, če je potrebno takojšnje gojenje. Za takojšnje gojenje vialo hitro odtalite tako, da jo potopite v vodno kopel s čisto vodo in protimikrobnim sredstvom pri 37 °C ter 40-60 sekund nežno mešate, dokler ne ostane majhen ledeni kepica. Vse nadaljnje korake izvajajte v sterilnih pogojih v pretočni nape, pred odprtjem pa kriovial razkužite s 70 % etanolom. Previdno odprite razkuženo vialo in celično suspenzijo prenesite v 15-mililitrsko centrifugirno epruveto, ki vsebuje 8 ml gojišča sobne temperature, ter nežno premešajte. Mešanico centrifugirajte pri 300 x g 3 minute, da ločite celice, in previdno zavrzite supernatant, ki vsebuje ostanke zamrzovalnega gojišča. Pelet celic nežno ponovno suspendirajte v 10 ml svežega gojišča. Pri adherentnih celicah suspenzijo razdelite med dve bučki T25; pri suspenzijskih kulturah prenesite vse gojišče v eno bučko T25, da spodbudite učinkovito interakcijo in rast celic. Upoštevajte uveljavljene protokole subkultur za nadaljnjo rast in vzdrževanje celične linije ter tako zagotovite zanesljive rezultate poskusov.
Inkubacijska atmosfera	37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.
Prevleka za bučke	Nič
Postopek zamrzovanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji pošiljanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji shranjevanja	Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Sterilnost	Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence. Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Številka parcele	Vrsta potrdila	Datum	Kataloška številka
300102-220524	Potrdilo o analizi	23. May. 2025	300102
300102-230623	Potrdilo o analizi	23. May. 2025	300102
300102-290125	Potrdilo o analizi	23. May. 2025	300102

Če nameravate celične linije Cytion uporabljati izključno za notranje raziskave na enem raziskovalnem mestu, izpolnite in podpišite našo pogodbo o prenosu materiala (MTA) in jo predložite skupaj z vašim naročilom.

Za vse komercialne namene – vključno z, vendar ne omejeno na, delo za plačilo, testiranje kakovosti, sproščanje izdelkov, diagnostično uporabo ali regulativne študije – izpolnite obrazec za nameravano uporabo, da bomo lahko pripravili ustrezno pogodbo, prilagojeno vašemu projektu.

Opomba: MTA velja le za določene celične linije. Če se to obvestilo in dokument MTA pojavita na strani izdelka, sporazum velja. Za celične linije, ki niso zajete v MTA, se sklic na sporazum ne prikaže. MTA ne velja za stranke v Ameriki, na Kitajskem ali Tajvanu. Za ustrezen sporazum se obrnite na našo ameriško podružnico.

Celice HMC3

Splošne informacije

Značilnosti

Regulativni podatki

Biomolekularni podatki

Ravnanje s spletno stranjo

Nadzor kakovosti / Genetski profil / HLA

Potrdilo o analizi (CoA)

Sporazum o prenosu materiala