RBL-2H3-celler – RBL-2H3:s betydelse för allergiska reaktioner och immunologiska studier
Cellinjen RBL-2H3 är en basofil leukemicellinje från råtta som används inom immunologisk forskning. Den fungerar som ett modellsystem för att studera mastcellers fysiologi, beteende och funktioner. Dessa celler används även för att studera allergiska reaktioner, immunologiska processer samt läkemedelsprövning och -utveckling.
- Odlingsmedium
- EMEM-medium innehållande 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 och EBSS-salt används för att odla RBL-2H3-cellerna. Mediet bör bytas ut 2 till 3 gånger per vecka.
- Fördubblingstid
- Fördubblingstiden för RBL-2H3-mastceller är cirka 50–60 timmar.
- Tillväxt
- RBL-2H3 är en vidhäftande cellinje.
- Biosäkerhetsnivå
- BSL-2
- Finns att beställa från
- Cytion — Beställ RBL-2H3
- RBL-2H3-celler: Ursprung och allmänna egenskaper
- RBL-2H3-celler: Odlingsinformation
- Fördelar och begränsningar hos basofilcellinjen RBL-2H3
- RBL-2H3-cellinjen: En hörnsten inom immunologisk forskning
- RBL-2H3-cellinjen: Viktiga vanliga frågor för forskare
- Referenser
- RBL-2H3-cellinjen för avancerad immunologisk forskning
- RBL-2H3-celler: Forskningspublikationer
- Resurser för RBL-2H3-cellinjen: protokoll, videor och mer
- Vanliga frågor
RBL-2H3-celler: Ursprung och allmänna egenskaper
Innan du använder en basofilcellinje i din forskning bör du känna till dess ursprung och allmänna egenskaper. I detta avsnitt av artikeln får du information om grunderna för RBL-2H3-celler. Till exempel: Vad är RBL-2H3-mastceller? Varför använda RBL-2H3-celler? Vad är RBL-2H3-celler vid basofil leukemi hos råttor? Hur ser RBL-2H3-cellernas morfologi ut? Är RBL-2H3-celler odödliga?
- RBL-2H3 är basofila leukemiceller som härstammar från basofila celler från Wistar-råttor och som isolerades 1978 vid National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology.
- RBL-2H3-celler har c-kit-receptortyrosinkinas och mastcellproteas II (RMCP-II)-receptorer, vilket gör dem till en potentiell mastcellsmodell. Därför kallas de vanligtvis mastceller trots att de härstammar från råttbasofiler [1].
- Vid aktivering frisätter de histamin och andra mediatorer och uttrycker IgE-receptorer med hög affinitet.
- RBL-2H3-celler uppvisar en fibroblastliknande morfologi.
RBL-2H3-celler: Information om odling
I detta avsnitt får du lära dig några viktiga aspekter av odling av cellinjen RBL-2H3. Du kommer att få veta: Vad är fördubblingstiden för RBL-2H3-celler? Vad är utsädesdensiteten för RBL-2H3-celler? Vad är odlingsprotokollet för RBL-2H3-celler? Vilket frysmedel används för RBL-2H3-cellinjen?
Viktiga punkter för odling av RBL-2H3-celler
Populationsfördubblingstid:
Fördubblingstiden för RBL-2H3-mastceller är cirka 50–60 timmar.
Adherent eller i suspension:
RBL-2H3 är en vidhäftande cellinje.
Subkultiveringsförhållande:
För RBL-2H3-celler hålls subkultiveringsförhållandet mellan 1:2 och 1:4. Adherenta celler tvättas med magnesium- och kalciumfri 1 x PBS-lösning. Passageringslösning Accutase tillsätts och cellerna hålls vid rumstemperatur i 10 minuter för att lossna från botten av odlingskärlet. Färskt medium tillsätts och cellerna centrifugeras. De skördade cellerna resuspenderas försiktigt i färskt medium och hälls i nya kolvar som innehåller tillväxtmedium.
Odlingsmedium:
EMEM-medium innehållande 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO₃ och EBSS-salt används för odling av RBL-2H3-cellerna. Mediet bör bytas ut 2 till 3 gånger per vecka.
Odlingsförhållanden:
RBL-2H3-celler odlas i en befuktad inkubator inställd på 37 °C och ansluten till en 5 % CO₂-källa.
Förvaring:
Cellerna förvaras i flytande kväves ångfas eller vid en temperatur under -150 °C i en elektrisk frys för att säkerställa cellernas livskraft på lång sikt.
Frysningsprocess och medium:
CM-1- eller CM-ACF-frysmedier används för att frysa RBL-2H3-celler med hjälp av en långsam frysprocess. Kortfattat möjliggör denna metod en temperatursänkning på 1 °C per minut och skyddar cellerna mot chock.
Upptining:
RBL-2H3-cellerna tinas i ett förinställt vattenbad (37 °C) i cirka 60 sekunder. Därefter överförs cellerna till färskt odlingsmedium och centrifugeras. Detta steg är nödvändigt för att avlägsna komponenter från frysmediet. Därefter resuspenderas cellpelleten i ett tillväxtmedium och cellerna överförs till en kolv för odling.
Biosäkerhetsnivå:
RBL-2H3-cellerna ska förvaras i laboratorier med biosäkerhetsnivå 1.
Publicerad: 2023 | Senast granskad: maj 2026
Fördelar och begränsningar hos basofilcellinjen RBL-2H3
RBL-2H3-celler används ofta inom immunologisk forskning. I detta avsnitt beskrivs deras främsta fördelar och begränsningar.
Fördelar
- Lätt att odla: RBL-2H3-celler kan enkelt odlas och underhållas i laboratoriemiljö. Detta underlättar kostnadseffektiva och reproducerbara experiment, vilket gör dem till ett populärt val för inledande studier inom immunologi.
Begränsningar
- Icke-humant ursprung: Eftersom RBL-2H3-cellerna härstammar från basofiler från råttor kanske de inte exakt efterliknar mänskliga biologiska processer, vilket kan begränsa deras tillämplighet i forskningsstudier specifika för människor. Detta kräver en försiktig tolkning av data när resultaten extrapoleras till mänskliga system.
- Förenklad mastcellsmodell: Även om dessa celler utgör en grundläggande modell för att studera mastcellernas funktioner, återspeglar de inte fullt ut den komplexa naturen hos mastcellernas interaktioner inom det mänskliga immunsystemet. Följaktligen kanske de inte på ett adekvat sätt modellerar mastcellernas mångfacetterade roller i immunreaktioner eller sjukdomstillstånd in vivo.
RBL-2H3-cellinjen: En hörnsten i immunologisk forskning
Forskning om basofiler och mastceller med hjälp av cellinjen RBL-2H3
Cellinjen RBL-2H3, som härstammar från Rattus norvegicus, fungerar som en viktig modell för att studera basofilers och mastcellers biologi. Dessa mastceller från råttor ger väsentliga insikter i mastcellernas frisättning av mediatorer, vilket är avgörande för att förstå allergiska tillstånd såsom allergisk rinit. Genom dessa celler undersöker forskare cellreceptordynamiken och uppkomsten av immunologiska synapser, vilka är centrala för immunsystemets respons på allergener. En intressant studie som publicerades 2019 använde cellinjen RBL-2H3 och undersökte mekanismerna bakom pseudoallergiska reaktioner som framkallas av en injektion med Qingkailing. Studien visade att PI3K-RAC1-signalkaskaden delvis framkallar denna allergiska reaktion i cellerna [2].
Dynamiken hos immunologiska synapser inom allergiforskningen
RBL-2H3-celler används i stor utsträckning inom immunologisk forskning och är särskilt effektiva för att undersöka dynamiken hos immunologiska synapser. Detta bidrar till att belysa kommunikationsprocesserna i immunsystemet, med tillämpningar inom studier av både mastceller i perifert blod och peritoneala mastceller. Sådan forskning är avgörande för en heltäckande förståelse av immunresponsen i både systemiska och lokaliserade sammanhang.
Läkemedelsscreening och toxicitetstestning
Vid läkemedelsscreening och toxicitetstestning utnyttjas RBL-cellernas reaktionsförmåga på olika stimuli, bland annat för att studera hur H₂O₂ hämmar IgE-medierade reaktioner. Dessa celler spelar en avgörande roll i utvecklingen av behandlingar för sjukdomar som streptokockinfektioner, där streptokocker av mitis-gruppen hämmar mastcellsaktivering. Utöver detta utvärderar forskare de toxiska effekterna av olika ämnen, däribland kemikalier, läkemedel och nanopartiklar, med hjälp av denna RBL 2H3-mc-modell. I en nyligen genomförd studie (2022) utvärderades exempelvis cytotoxiciteten hos mikroplast av polystyren på RBL-2H3-celler. Man fann att mikroplasten skadar RBL-2H3-cellernas organeller och främjar celldöd [3]. I en annan studie från 2021 utvärderades den antiallergiska och antiinflammatoriska potentialen hos ett naturligt ämne, neferin, med hjälp av RBL-2H3 mc-modellen. Studien visade att föreningen har goda antiallergiska och antiinflammatoriska egenskaper [4].
Avancerade metoder för immunologisk mätning
Den konsekventa och mätbara frisättningen av mediatorer från RBL-2H3-celler gör dem idealiska för enkel fluorimetri, vilket underlättar precisa och exakta mätningar som är avgörande för sjukdomsstudier och utvärdering av terapeutiska medel.
RBL-2H3-cellinjen, som härstammar från Rattus norvegicus, är en ovärderlig tillgång inom både grundforskning och tillämpad forskning inom immunologin. Den erbjuder stora möjligheter att fördjupa vår kunskap om och behandling av immunologiska sjukdomar.
Cellinjen RBL-2H3 för avancerad immunologisk forskning
RBL-2H3-celler: Forskningspublikationer
Här följer några intressanta forskningspublikationer om RBL-2H3-mastcellerna:
Narirutins hämmande effekt på degranulering av RBL-2H3-celler
Denna forskningsartikel publicerades i tidskriften Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Studien föreslog att narirutin, en naturlig förening, har en hämmande effekt på degranuleringen av RBL-2H3-celler genom att reglera NF-κB, MAPK och tyrosinkinas-signalvägen.
Denna forskning, publicerad i International Journal of Molecular Sciences (2020), visade att apigenin avsevärt dämpar allergiska och inflammatoriska reaktioner hos RBL-2H3- och RAW264.7-celler. Därför kan det fungera som ett potentiellt medel för att bekämpa immunrelaterade sjukdomar.
Denna forskningsartikel i International Journal of Molecular Sciences (2021) utvärderade de antiallergiska och antiinflammatoriska effekterna av ett naturläkemedel, saponarin, med hjälp av olika cellinjer, däribland RBL-2H3.
Denna studie, publicerad i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014), visade att extrakt av Benchalokawichian och vissa aktiva beståndsdelar har potentiella hämmande effekter på frisättningen av β-hexosaminidas från RBL-2H3-celler.
Denna artikel publicerades 2018 i tidskriften International Journal of Biological Macromolecules. Studien visade att Spirulina maxima, en naturprodukt, hämmar degranulering i RBL 2H3 genom att förhindra fosforylering av MAPK och AKT.
Resurser för RBL-2H3-cellinjen: protokoll, videor och mer
RBL-2H3 är en allmänt använd mastcellinje. Här nämns tillgängliga resurser som täcker odlings- och transfektionsprotokoll för RBL-2H3:
- RBL-2H3 MC-modell: Denna forskningsartikel innehåller protokoll för underhåll av RBL-2H3-odlingar och för transfektion av RBL-2H3.
Här är några resurser som förklarar odlingsprotokollet för RBL-2H3-celler:
- RBL-2H3-celler: Denna webbplats är till stor hjälp för att lära sig cellodlingsprotokoll för RBL-2H3-cellinjen. Dessutom innehåller den information om RBL-2H3-cellmedier och odlingsförhållanden.
Cellinjen RBL-2H3: Viktiga vanliga frågor för forskare
Referenser
- Passante, E. och N. Frankish, RBL-2H3-cellinjen: dess ursprung och lämplighet som modell för mastceller. Inflamm Res, 2009. 58(11): s. 737–45.
- Li, Q., m.fl., Pseudoallergisk reaktion orsakad av Qingkailing-injektion delvis via PI3K-Rac1-signalvägen i RBL-2H3-celler. Toxicology Research, 2019. 8(3): s. 353–360.
- Liu, L., et al., Mikro- (nano-)plaster av polystyren skadar organellerna i RBL-2H3-celler och främjar MOAP-1 för att inducera apoptos. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: s. 129550.
- Chiu, K.-M., m.fl., Antiallergiska och antiinflammatoriska effekter av neferin på RBL-2H3-celler. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): s. 10994.