Células MC3T3-E1 — O modelo de pré-osteoblastos de referência para a investigação em biologia óssea

Introdução

Células MC3T3-E1, também conhecidas pelos sinónimos Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1 e MC 3T3-E1 (número de acesso no Cellosaurus: CVCL_0409), representam uma das linhas celulares pré-osteoblásticas mais utilizadas na biologia óssea moderna. Estabelecidas a partir da calvária de ratos recém-nascidos por Kodama e colegas em 1981 e posteriormente caracterizadas por Sudo et al. em 1983, estas células espontaneamente imortalizadas foram selecionadas pela sua elevada atividade da fosfatase alcalina (ALP) no estado confluente. [1] A sua capacidade de evoluir através de fases de proliferação e diferenciação bem definidas — acabando por formar uma matriz óssea mineralizada in vitro — tornou-as uma ferramenta indispensável para o estudo da osteogénese, da remodelação óssea e dos efeitos de agentes farmacológicos, biomateriais e perturbações genéticas na função dos osteoblastos. Atualmente, as células MC3T3-E1 assumem um papel de destaque na investigação em áreas que abrangem a osteoporose, a ciência dos implantes, a engenharia de tecidos e a biologia espacial.

Pontos-chave

• A MC3T3-E1 é uma linha celular murina de pré-osteoblastos imortalizada espontaneamente, derivada da calvária de ratos recém-nascidos.
• As células passam por fases distintas de proliferação e diferenciação, culminando na formação de uma matriz mineralizada in vitro.
• A elevada atividade da ALP e a expressão de marcadores osteoblásticos (RUNX2, OCN, OPN, Col1A1) tornam-nos um modelo fiável de osteogénese.
• A partir da linha parental, foram estabelecidos vários subclones derivados com diferentes potenciais de diferenciação e mineralização.
• As células MC3T3-E1 são amplamente utilizadas em ensaios de biomateriais, na descoberta de fármacos, na investigação sobre a osteoporose e na engenharia de tecidos ósseos.
• A identidade das linhas celulares deve ser verificada regularmente através da análise de perfis STR ou SNP, a fim de evitar erros de identificação e contaminação cruzada. [2]

O que é o MC3T3-E1?

A MC3T3-E1 é uma linha celular clonal de pré-osteoblastos de origem murina, imortalizada espontaneamente, com o número de acesso Cellosaurus CVCL_0409. Foi derivada do tecido ósseo da calota craniana de um rato recém-nascido (com menos de um dia de vida) de sexo não especificado. Não foi identificada qualquer doença associada ao animal dador. A linha celular foi selecionada com base na elevada atividade da ALP no estado confluente, uma propriedade que prenunciava a sua robusta capacidade de osteogénese in vitro. Na fase de crescimento, as células MC3T3-E1 apresentam uma morfologia fibroblástica e formam culturas multicamadas. Após indução, diferenciam-se em osteoblastos, produzem uma matriz extracelular colagénica e, por fim, dão origem a nódulos mineralizados contendo células semelhantes a osteócitos incorporadas na matriz óssea. [1] O tempo de duplicação varia entre 24 e 48 horas em condições normais de cultura.

A análise por matriz SNP confirmou a origem da estirpe C57BL/6 das células MC3T3-E1 e tem sido utilizada para identificar alterações cariotípicas associadas a passagens a longo prazo. [3] Esta linha celular expressa marcadores-chave dos osteoblastos, incluindo RUNX2, sialoproteína óssea, osteocalcina e osteopontina, especialmente nos subclones em mineralização. [4] Uma série de subclones derivados — incluindo Subclone 14 do MC3T3-E1 As células — incluindo o Subclone 4 — foram isoladas da linha parental e apresentam vários graus de diferenciação e potencial de mineralização, tanto in vitro como in vivo.

Informações sobre cultura celular

MC3T3-E1 – alta confluência

Vantagens das células MC3T3-E1

As células MC3T3-E1 constituem um modelo bem definido e reprodutível de toda a sequência de desenvolvimento dos osteoblastos. Ao contrário dos osteoblastos primários da calota craniana, que são heterogéneos e difíceis de manter, as células MC3T3-E1 são derivadas clonalmente e podem ser expandidas de forma consistente em diferentes laboratórios. A sua capacidade de evoluir de pré-osteoblastos em proliferação para osteoblastos depositadores de matriz e, finalmente, para nódulos mineralizados com osteócitos incorporados torna-as especialmente adequadas para estudos temporais da osteogénese. O trabalho pioneiro de Yohay et al. definiu as fases distintas de proliferação e diferenciação das células MC3T3-E1 em cultura, estabelecendo-as como um modelo in vitro quantitativo do desenvolvimento dos osteoblastos. [5] Esse estudo demonstrou que as células MC3T3-E1 passam por uma sequência previsível de paragem do crescimento, maturação da matriz e mineralização — fases que refletem fielmente a ontogenia dos osteoblastos in vivo.

Outra vantagem é a disponibilidade de subclones bem caracterizados, que proporcionam flexibilidade experimental. Wang et al. isolaram uma série de subclones da linha parental MC3T3-E1, demonstrando que os subclones mineralizantes expressam seletivamente a sialoproteína óssea, a osteocalcina, e do recetor de PTH/PTHrP, enquanto a expressão da fosfatase alcalina se verificou tanto nos subclones mineralizantes como nos não mineralizantes. [4] Este recurso permite aos investigadores selecionar subclones com fenótipos definidos, adequados às suas necessidades experimentais. Além disso, as células respondem de forma robusta a uma ampla gama de estímulos osteogénicos — incluindo ácido ascórbico, beta-glicerofosfato, BMP-2, dexametasona e inúmeras moléculas pequenas —, tornando-as ideais para estudos farmacológicos e mecanísticos.

As células MC3T3-E1 são também altamente adequadas para manipulação molecular. Toleram a transfecção, a transdução viral e a edição genética baseada em CRISPR, e expressam vias de sinalização endógenas (Wnt/β-catenina, BMP/SMAD, PI3K/AKT) que são diretamente relevantes para a fisiopatologia óssea. A sua origem murina facilita a integração com modelos murinos in vivo de osteoporose e consolidação de fraturas, reforçando o valor translacional dos resultados obtidos in vitro.

Limitações das células MC3T3-E1

Apesar da sua utilização generalizada, as células MC3T3-E1 apresentam importantes limitações. Por se tratarem de uma linha imortalizada espontaneamente, podem acumular anomalias cariotípicas ao longo de passagens prolongadas. A análise por matriz de SNP revelou aneuploidia generalizada nas culturas de MC3T3-E1, e as alterações ao nível do genoma podem afetar a reprodutibilidade dos ensaios de diferenciação em números elevados de passagens. [3] A linhagem parental original também pode sofrer uma perda espontânea da capacidade de mineralização, tal como demonstrado por Baba, que isolou um subclone não mineralizante (MC3T3-NM4) da população parental MC3T3-E1 — uma descoberta que sublinha a necessidade de um acompanhamento cuidadoso da competência de diferenciação ao longo das passagens. [6]

O desempenho osteogénico variável dos subclones MC3T3-E1 disponíveis no mercado representa uma fonte adicional de variabilidade experimental. A investigação demonstrou que diferentes subclones (por exemplo, o Subclone 4 em comparação com o Subclone 14) apresentam cinéticas de mineralização e perfis de expressão de genes marcadores marcadamente diferentes, pelo que a comparação direta de resultados entre laboratórios que utilizam subclones diferentes deve ser feita com cautela. A composição do meio de cultura também influencia significativamente os resultados osteogénicos: estudos que avaliaram células MC3T3-E1 em diferentes meios de cultura relataram diferenças substanciais na atividade da ALP, na deposição de colagénio e na calcificação — o que destaca a importância da padronização do meio na conceção experimental.

Por fim, as células MC3T3-E1 são de origem murina, o que limita a sua relevância translacional direta para a previsão das respostas dos osteoblastos humanos. As diferenças específicas de espécie na farmacologia dos recetores, na sinalização das citocinas e na regulação genética implicam que os resultados devem ser validados em sistemas de osteoblastos humanos antes de qualquer extrapolação clínica. Recomenda-se vivamente a autenticação de rotina das linhas celulares através de perfis STR ou de métodos baseados em sequenciação de última geração, a fim de excluir a contaminação cruzada antes do início das experiências. [2]

Aplicações

Diferenciação dos osteoblastos e modelação da osteogénese

A aplicação mais fundamental das células MC3T3-E1 é como modelo quantitativo da diferenciação dos osteoblastos. O estudo de referência de Yohay et al. caracterizou diferentes fases proliferativas e de diferenciação das células MC3T3-E1 murinas em cultura, fornecendo um quadro temporal para compreender como estes pré-osteoblastos passam pelas fases de crescimento, maturação da matriz e mineralização. [5] Esse trabalho definiu a linha celular como um modelo in vitro adequado para a osteogénese e estabeleceu parâmetros de referência experimentais — tais como a atividade da ALP, a deposição da matriz de colagénio e a mineralização dos nódulos — que continuam a ser utilizados como padrão até hoje. A clareza destas fases de desenvolvimento tornou a MC3T3-E1 o padrão de referência em relação ao qual são avaliados novos protocolos osteogénicos e meios de diferenciação.

Estudos sobre vias de sinalização têm recorrido às células MC3T3-E1 para analisar o mecanismo molecular da osteogénese. Wang et al. demonstraram que a apelina-13 ativa a via BMP4/SMAD1/5/8 através do seu recetor APJ, regulando positivamente os marcadores osteogénicos ALP, osteocalcina, osteopontina e Col1A1, e aumentando a expressão de RUNX2 tanto ao nível do ARNm como ao nível proteico nas células MC3T3-E1. [7] A regulação da diferenciação por microARN também tem sido estudada: Zhai et al. demonstraram que o eixo miR-211-5p/FOXO3 promove a diferenciação osteogénica das células MC3T3-E1 e das BMSC através da ativação da via Wnt/β-catenina, com implicações na consolidação de fraturas osteoporóticas. [8] A investigação sobre a tensão de cisalhamento de fluidos utilizando células MC3T3-E1 revelou ainda que a autofagia mediada pela anexina A6 regula a diferenciação osteogénica induzida mecanicamente, uma descoberta relevante para a compreensão da fisiologia óssea sob carga. [9]

As células MC3T3-E1 têm sido utilizadas para formar esferóides tridimensionais que reproduzem melhor o microambiente dos osteoblastos in vivo. Wen et al. geraram esferóides espontâneos de MC3T3-E1 utilizando um sistema de cultura de baixa adesão e demonstraram um aumento significativo da atividade da ALP e da expressão de genes osteogénicos, em comparação com as culturas em monocamada. [10] Estes esferóides promoveram a regeneração do osso alveolar e inibiram a inflamação num modelo murino de autotransplante dentário, destacando a importância dos sistemas de cultura tridimensionais de MC3T3-E1 para aplicações de engenharia de tecidos.

Investigação sobre a osteoporose e descoberta de medicamentos

As células MC3T3-E1 servem como plataforma in vitro principal para a avaliação de candidatos a terapêuticas contra a osteoporose. Demonstrou-se que a quercetina, um flavonóide natural, atenua a disfunção dos osteoblastos em ratos com osteoporose, regulando a ferroptose através da via de sinalização Nrf2/SLC7A11/GPX4; a validação in vitro utilizando células MC3T3-E1 confirmou o papel desta via na sobrevivência e função dos osteoblastos. [11] Da mesma forma, o extrato proteico de chifre piloso (PAE) promoveu a viabilidade, a proliferação e a diferenciação osteogénica das células MC3T3-E1, ao mesmo tempo que ativou a via de sinalização Wnt/β-catenina, refletindo os seus efeitos benéficos na microarquitetura trabecular em ratas ovariectomizadas. [12]

Os polissacarídeos provenientes de plantas medicinais tradicionais também foram avaliados utilizando células MC3T3-E1 como componente in vitro de uma investigação mais ampla sobre a osteoporose. Yang et al. caracterizaram dois polissacarídeos de Psoralea corylifolia e demonstraram a sua capacidade de estimular a atividade osteogénica nas células MC3T3-E1, complementando os resultados in vivo que revelaram uma melhoria da densidade mineral óssea em ratos com osteoporose induzida por glicocorticóides. [13] Verificou-se que as nanopartículas de curcumina, combinadas com narlumosbart, potenciam de forma sinérgica a diferenciação dos osteoblastos nas células MC3T3-E1 através da via Wnt/β-catenina, proporcionando uma estratégia combinatória com nanopartículas para a reparação de traumatismos ósseos. [14]

A osteomielite, uma infeção óssea grave, tem sido estudada utilizando células MC3T3-E1 tratadas com a proteína A estafilocócica (SPA) como modelo de infeção in vitro. Chen et al. utilizaram a aleatorização mendeliana, combinada com estas experiências in vitro, para demonstrar que o metabolito circulante sulfato de p-cresol prejudica a proliferação e a diferenciação osteogénica das células MC3T3-E1, proporcionando novos insights mecanísticos sobre os fatores metabólicos responsáveis pela patogénese da osteomielite. [15] A inibição da ferroptose através da ferrostatina-1 também foi estudada em células MC3T3-E1, tendo os resultados sugerido que a supressão da morte celular por ferroptose aumenta a viabilidade dos osteoblastos e a atividade de formação óssea.

Biomateriais, Ciência dos Implantes e Engenharia do Tecido Ósseo

As células MC3T3-E1 constituem o padrão de referência para avaliar a biocompatibilidade e o potencial osteoindutor de novos biomateriais. Liu et al. desenvolveram uma estrutura de hidroxiapatite de carbonato (Tb-CHA) dopada com térbio e utilizaram células MC3T3-E1 para demonstrar que o material aumentava significativamente a proliferação e a diferenciação celular in vitro, tendo a validação in vivo subsequente num modelo de defeito da calota craniana de ratos confirmado as suas capacidades osteogénicas e angiogénicas. [16] A capacidade de correlacionar as respostas da linha celular MC3T3-E1 in vitro com os resultados da regeneração óssea in vivo torna esta linha celular especialmente valiosa na conceção iterativa de materiais substitutos ósseos.

A engenharia de superfícies de implantes de titânio tem-se baseado fortemente nas células MC3T3-E1 para quantificar o potencial de osseointegração. Liao e Li fabricaram um revestimento composto de epigalocatequina-3-galato (EGCG), hidroxiapatita (HAP) e nanopartículas de prata (AgNPs) em superfícies de titânio e demonstraram que este revestimento de EGCG/HAP/AgNPs melhorava simultaneamente a atividade antibacteriana e promovia a adesão, a proliferação e a diferenciação osteogénica das células MC3T3-E1. [17] Estes resultados ilustram a forma como as células MC3T3-E1 ajudam a otimizar os revestimentos de implantes, que têm de conciliar a eficácia antimicrobiana com a compatibilidade com as células do hospedeiro.

As nanopartículas de óxido de zinco (ZnO-NPs) representam outra classe de materiais biomédicos avaliados em células MC3T3-E1. Ryu et al. avaliaram sistematicamente os efeitos dependentes da concentração dos extratos de ZnO-NP na citocompatibilidade e na atividade osteogénica, constatando que as concentrações baixas promoviam respostas osteoblásticas, enquanto as concentrações mais elevadas eram citotóxicas. [18] Esta caracterização dependente da dose sublinha a importância de utilizar ensaios MC3T3-E1 padronizados ao estabelecer os limites de segurança e eficácia das estratégias de reparação óssea baseadas em nanomateriais. A tecnologia do plasma atmosférico frio (CAP) foi igualmente avaliada quanto à sua capacidade de estimular a diferenciação osteogénica das células MC3T3-E1 de forma dependente do tempo, abrindo caminho a potenciais aplicações na regeneração do osso alveolar. [19]

Microgravidade e Mecanobiologia

As células MC3T3-E1 proporcionaram conhecimentos fundamentais sobre a forma como a redução da carga mecânica e gravitacional afeta a biologia dos osteoblastos. Hughes-Fulford e Lewis lançaram osteoblastos MC3T3-E1 a bordo da missão STS-56 do vaivém espacial e demonstraram que as células ativadas em microgravidade apresentavam um crescimento prejudicado, apesar da estimulação sérica normal, com uma organização alterada do citoesqueleto e uma síntese reduzida de prostaglandinas, em comparação com os controlos em terra. [20] Estas descobertas forneceram uma base mecânica celular para a perda de densidade mineral óssea, amplamente documentada, que os astronautas sofrem durante voos espaciais de longa duração.

Trabalhos posteriores de Hughes-Fulford alargaram estas observações à expressão génica e à transdução de sinais, demonstrando que a microgravidade altera o programa transcricional dos osteoblastos MC3T3-E1 de formas que ajudam a explicar a redução da formação óssea na ausência de carga gravitacional. [21] Em conjunto, estes estudos de biologia espacial consolidaram as células MC3T3-E1 como o principal modelo in vitro para investigar as consequências celulares da microgravidade no esqueleto, com relevância direta para o desenvolvimento de contramedidas contra a perda óssea na medicina espacial.

Na Terra, os estudos de mecanobiologia têm recorrido ao sistema MC3T3-E1 para compreender como a tensão de cisalhamento do fluido — um indicador do fluxo intersticial nas redes lacunocanaliculares ósseas — regula a diferenciação dos osteoblastos. A investigação demonstrou que a autofagia mediada pela anexina A6 estabelece uma ligação entre a estimulação mecânica e a expressão de genes osteogénicos nas células MC3T3-E1, fornecendo detalhes moleculares sobre a forma como as células ósseas detetam e respondem à carga física. [9] Estas aplicações da mecanobiologia situam as células MC3T3-E1 na interface entre a biofísica e a medicina regenerativa.

Regeneração periodontal e do osso alveolar

A perda óssea associada à periodontite constitui um grande desafio clínico, e as células MC3T3-E1 tornaram-se uma ferramenta in vitro fundamental para testar estratégias de regeneração periodontal. Kong et al. desenvolveram um nanomaterial multifuncional à base de pontos de carbono (ASA-ALN-CDs), derivado da aspirina e do alendronato de sódio, que demonstrou uma potente atividade antibiofilme contra agentes patogénicos periodontais e promoveu a diferenciação osteogénica das células MC3T3-E1 em condições inflamatórias. [22] Num modelo de periodontite em ratos, o material reduziu a perda óssea alveolar e a inflamação através da inibição da via de sinalização do HIF-1α, tendo os dados in vitro obtidos com as células MC3T3-E1 fornecido um suporte mecânico direto para os efeitos observados in vivo.

Os estudos sobre plasma atmosférico frio centraram-se especificamente na regeneração do osso alveolar, através da exposição de células MC3T3-E1 a uma fonte de CAP de hélio personalizada. Negrescu et al. demonstraram que o tratamento com CAP modulava a sobrevivência celular e a diferenciação osteogénica de forma dependente do tempo, avaliada através de ensaios de células vivas/mortas, ensaios de viabilidade CCK-8, medições da atividade da ALP e caracterização morfológica. [19] Estes resultados posicionaram a CAP como uma terapia física adjuvante candidata para os defeitos do osso alveolar, sendo que as células MC3T3-E1 fornecem os indicadores quantitativos de diferenciação necessários para otimizar os parâmetros do tratamento.

A abordagem de cultura esferoidal tridimensional desenvolvida com células MC3T3-E1 tem relevância direta para a medicina regenerativa dentária. O sistema de esferóides com arcabouço de colagénio avaliado por Wen et al. num modelo de autotransplante dentário alcançou uma regeneração óssea alveolar superior e uma expressão génica anti-inflamatória superior em comparação com os controlos de células em monocamada, sugerindo que a atividade paracrina reforçada dos esferóides MC3T3-E1 pode traduzir-se em ganhos clinicamente significativos na cicatrização da alvéola dentária. [10]

Conclusão

As células MC3T3-E1 continuam a ser um modelo indispensável e amplamente validado para a investigação em biologia óssea. Desde a sua caracterização inicial como uma linha clonal de pré-osteoblastos capaz de mineralização in vitro até à sua atual aplicação em áreas de ponta, incluindo a bioimpressão 3D, a administração de fármacos com base em nanopartículas, a regeneração periodontal e a medicina espacial, estas células têm demonstrado uma versatilidade científica extraordinária. Os seus estágios de diferenciação bem definidos, a expressão robusta de marcadores e a capacidade de resposta a uma ampla gama de estímulos osteogénicos tornam-nas a linha celular de referência para avaliar novos biomateriais, identificar alvos terapêuticos na osteoporose e na osteomielite e analisar as vias de sinalização que regem a formação óssea. Quer esteja a investigar a ferroptose, a mecanobiologia ou revestimentos de implantes de última geração, as células MC3T3-E1 proporcionam a plataforma reprodutível e biologicamente relevante que a sua investigação exige. Explore as especificações completas ou encomende Células MC3T3-E1 diretamente para cytion.com.

Publicações principais

1. Sudo H, Kodama HA, Amagai Y (1983) Diferenciação e calcificação in vitro numa nova linha celular osteogénica clonal derivada da calvária de ratos recém-nascidos. The Journal of Cell Biology. PMID: 6826647
2. Chen YH, Connelly JP, Florian C (2023) Perfilagem de repetições em tandem curtas através de sequenciação de última geração para a autenticação de linhas celulares. Disease Models & Mechanisms. PMID: 37712227
3. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z (2014) A análise de perfis de SNP em matrizes de SNP de linhas celulares de ratinho identifica as suas estirpes de origem e revela contaminação cruzada e aneuploidia generalizada. BMC Genomics. PMID: 25277546
4. Wang D, Christensen K, Chawla K (1999) Isolamento e caracterização de subclones de pré-osteoblastos MC3T3-E1 com potencial distinto de diferenciação/mineralização in vitro e in vivo. Journal of Bone and Mineral Research. PMID: 10352097
5. Quarles LD, Yohay DA, Lever LW (1992) Fases distintas de proliferação e diferenciação das células murinas MC3T3-E1 em cultura: um modelo in vitro do desenvolvimento dos osteoblastos. Journal of Bone and Mineral Research. PMID: 1414487
6. Baba TT (2000) Restabelecimento das deposições minerais pela dexametasona na matriz de células osteoblásticas não mineralizantes subclonadas a partir de células MC3T3-E1. Calcified Tissue International. PMID: 11136541
7. Wang C, Li Z, Yang H (2026) A apelina-13 ativa a via BMP4/SMAD através da APJ para potenciar a diferenciação osteoblástica e a mineralização. Tissue & Cell. PMID: 42269418
8. Zhai H, Lin M, Lu C (2026) O eixo miR-211-5p/FOXO3 acelera a diferenciação osteogénica e a consolidação de fraturas ao mediar a via Wnt/β-catenina. Journal of Orthopaedic Surgery and Research. PMID: 42219493
9. Pei T, Su G, Yang J (2026) Correção: O esforço de cisalhamento do fluido regula a diferenciação osteogénica através da autofagia mediada pela anexina A6 nas células MC3T3-E1. International Journal of Molecular Sciences. PMID: 42196630
10. Wen Z, Li X, Yue L (2026) Os esferóides de células estaminais mesenquimais formados espontaneamente melhoram a regeneração do osso alveolar e inibem a inflamação após o autotransplante dentário. Regenerative Therapy. PMID: 42199333
11. Gong J, Ma Y, Huang J (2026) O extrato proteico de chifre piloso alivia a osteoporose e está associado à ativação da via de sinalização Wnt/β-catenina. Pharmaceuticals (Basileia, Suíça). PMID: 42198339
12. He L, Zheng Y, Zeng Z (2026) Efeito da quercetina na disfunção dos osteoblastos em ratos com osteoporose, através da regulação da ferroptose mediada pela via Nrf2/SLC7A11/GPX4. Cytotechnology. PMID: 42238059
13. Yang J, Tang Z, Chen C (2026) Caracterização estrutural e potencial anti-osteoporótico in vivo e in vitro de dois polissacarídeos de Psoralea corylifolia L. Carbohydrate Polymers. PMID: 42173575
14. Zhang H, Zhao Y (2026) As nanopartículas de curcumina, em combinação com o narlumosbart, regulam a via de sinalização wingless-type MMTV integration site (wnt)/β-catenina em células semelhantes a osteoblastos. Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences. PMID: 42170973
15. Chen X, Mo R, Yang S (2026) Citocinas inflamatórias e vias metabólicas na osteomielite: conclusões da aleatorização mendeliana e validação experimental. Advances in Clinical and Experimental Medicine. PMID: 42200571
16. Liu P, Shen J, Bian Y (2026) A estrutura de hidroxiapatite carbonatada impressa em 3D dopada com térbio melhora a regeneração óssea. Journal of Translational Medicine. PMID: 42260646
17. Liao J, Li Z (2026) Efeito antibacteriano e osteogénico do revestimento composto por EGCG/HAP/AgNPs na superfície de titânio. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. PMID: 42216990
18. Ryu JH, Mangal U, Kim JH (2026) Efeitos dependentes da dose das nanopartículas de óxido de zinco na resposta celular dos pré-osteoblastos. Scientific Reports. PMID: 42303653
19. Negrescu AM, Zampieri L, Martines E (2026) Modulação dependente do tempo de pré-osteoblastos MC3T3-E1 por um plasma frio de hélio: um estudo preliminar sobre a sua potencial relevância para a regeneração do osso alveolar. Biomedical Physics & Engineering Express. PMID: 42208566
20. Kong J, Li H, Guo X (2026) Eficácia terapêutica dos ASA-ALN-CDs na periodontite: do efeito antibiofilme e anti-inflamatório à regeneração do osso alveolar. ACS Biomaterials Science & Engineering. PMID: 42213513
21. Hughes-Fulford M, Lewis ML (1996) Efeitos da microgravidade na ativação do crescimento dos osteoblastos. Experimental Cell Research. PMID: 8612673
22. Hughes-Fulford, M. (2001) Alterações na expressão genética e na transdução de sinais em microgravidade. Journal of Gravitational Physiology. PMID: 12638602