Células PIEC
Informações gerais
| Descrição | PIEC (Células Endoteliais Ilíacas Suínas) é uma linha celular endotelial espontaneamente imortalizada derivada do endotélio da artéria ilíaca de um porco jovem. A linha celular exibe uma morfologia típica de paralelepípedos quando cultivada até a confluência e forma monocamadas aderentes em condições de cultura padrão. As PIECs mantêm características endoteliais essenciais, incluindo inibição de contacto, expressão de marcadores endoteliais, como o fator von Willebrand (vWF), e a capacidade de formar estruturas semelhantes a capilares em ensaios in vitro apropriados. Devido à sua origem vascular, as PIECs são amplamente utilizadas como modelo para estudar a biologia endotelial suína e as interações hospedeiro-patógeno. Funcionalmente, as PIECs apresentam características consistentes com as células endoteliais macrovasculares, incluindo a capacidade de resposta a estímulos inflamatórios e a capacidade de expressar moléculas de adesão envolvidas no recrutamento de leucócitos. Elas têm sido amplamente utilizadas na pesquisa virológica, particularmente para a propagação e estudo de vírus suínos, como o vírus da peste suína clássica (CSFV), o vírus da peste suína africana (ASFV) e o vírus da síndrome reprodutiva e respiratória suína (PRRSV). Sua alta permissividade a certas infecções virais e características de crescimento estável tornam-nas um sistema in vitro valioso para estudos de replicação viral, triagem antiviral e pesquisa de vacinas. Além das aplicações em doenças infecciosas, as PIECs servem como um modelo endotelial relevante em animais de grande porte para investigar a função de barreira vascular, ativação endotelial, angiogênese e vias de sinalização inflamatória. Como uma linha endotelial derivada de suínos, as PIECs fornecem relevância translacional para pesquisas cardiovasculares comparativas e estudos pré-clínicos, nos quais modelos suínos são comumente empregados. |
|---|---|
| Organismo | Porco |
| Tecido | Endotélio vascular |
Caraterísticas
| Morfologia | Epitelial |
|---|---|
| Propriedades de crescimento | Aderente |
Dados regulamentares
| Citação | PIEC (número de catálogo Cytion 305213) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 1 |
| NCBI_TaxID | 9823 |
| CellosaurusAcessão | CVCL_C0W5 |
Dados biomoleculares
Manuseamento
| Meio de cultura | RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a) |
|---|---|
| Suplementos | Completar o meio com 10% de FBS ativado pelo calor |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Subcultura | Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e, nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco. |
| Rácio de divisão | 1:2 a 1:4 |
| Renovação de fluidos | 2 a 3 vezes por semana |
| Congelar o meio | Como meio de criopreservação, utilize um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio. |
| Descongelamento e cultura de células |
|
| Atmosfera de incubação | 37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada. |
| Revestimento de frascos | Para uma fixação e viabilidade óptimas após a descongelação, recomendamos a utilização de frascos ou placas revestidos com colagénio. |
| Procedimento de congelação | As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado. |
| Condições de envio | As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido. |
Controlo de qualidade / Perfil genético / HLA
| Esterilidade | A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias. |
|---|
Certificado de análise (CoA)
| Número do lote | Tipo de certificado | Data | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 305213-070524 | Certificado de análise | 23. May. 2025 | 305213 |
Acordo de transferência de material
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