imWilms1 Cellen

€ 800,00*

De producten worden bevroren verzonden in cryobuisjes met droogijs. Elk cryobuisje bevat doorgaans 3 × 10 ⁶ cellen voor hechtende lijnen of 5 × 10⁶ cellen voor suspensielijnen (zie het batch-CoA voor meer informatie).

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

cryovial

Productnummer: 300412

Veiligheidsinformatieblad

Productblad

Certificaat van Analyse (CoA)

Overeenkomst materiaaloverdracht

Beschrijving	De Wilms1-cellijn is oorspronkelijk afgeleid van een primaire Wilms-tumor, verkregen van een patiënt bij wie grote bilaterale niertumoren werden vastgesteld, een karakteristieke verschijningsvorm van Wilms-tumor (nefroblastoom). Deze cellijn bevat een homozygote nonsensmutatie in het WT1-gen (c.149 C>A, p.S50X), wat leidt tot de productie van een afgekapt, niet-functioneel WT1-eiwit. WT1 is een cruciaal gen in de ontwikkeling van de nier en de mutatie is nauw geassocieerd met de pathogenese van Wilms tumor, vooral in tumoren met stromale differentiatie. Wilms1-cellen hebben een stabiel karyotype zonder significante chromosoomafwijkingen en worden gekenmerkt door een mesenchymaal fenotype, waarbij vimentine tot expressie komt en epitheliale markers zoals cytokeratine ontbreken. De lijn vertoont een beperkte maar significante capaciteit voor mesenchymale differentiatie, inclusief de mogelijkheid om te differentiëren in spierachtige cellen onder specifieke omstandigheden, waardoor het een cruciaal model is voor het bestuderen van de moleculaire gevolgen van WT1-mutaties. Om de beperkte levensduur van de primaire Wilms1-cellen te overwinnen, werd de imWilms1-cellijn gemaakt door een drievoudig gemuteerd SV40-groot T-antigeen (U19dl89-97tsA58) in de oorspronkelijke tumorcellen te introduceren, waardoor hun immortalisatie werd vergemakkelijkt. Door deze modificatie kunnen imWilms1-cellen zich onbeperkt vermenigvuldigen met behoud van chromosomale stabiliteit, waardoor ze een betrouwbaar model vormen voor langetermijnstudies. De geïmmortaliseerde imWilms1 cellen blijven dezelfde WT1 mutatie vertonen en behouden de mesenchymale kenmerken van de ouder Wilms1 lijn. Naast de genetische en fenotypische kenmerken is de imWilms1 cellijn uitgebreid geanalyseerd op zijn signaalwegactiviteit. Proteomische studies hebben de fosforylering en activering van verschillende receptortyrosinekinasen (RTK's) aangetoond, waaronder EGFR, PDGFRβ en AXL, met downstream activering van de MAPK-signaalroutes. De consistente activering van deze pathways in imWilms1 cellen onderstreept hun relevantie voor het verkennen van gerichte therapeutische strategieën in Wilms tumor. Over het geheel genomen dient imWilms1 als een robuust en langdurig model voor het onderzoeken van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan de ontwikkeling en progressie van Wilms tumoren, met name die welke worden aangedreven door WT1-mutaties en afwijkende signaalroutes.
Organisme	Mens
Weefsel	Nieren
Ziekte	Wilms tumor
Synoniemen	IM-WT-1

Leeftijd	10 maanden
Geslacht	Vrouw
Etniciteit	Kaukasisch
Morfologie	Spilvormig
Celtype	Wilms cellen
Groei eigenschappen	Aanhangend

Citeren	imWilms1 (Cytion catalogusnummer 300412)
Bioveiligheidsniveau	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccessie	CVCL_A5SN
Deposant	B. Royer-Pokora
GGO-status	GMO-S1: Deze imWilms1 menselijke Wilms tumorlijn bevat een triple-mutant SV40 T-antigen cassette die voorwaardelijke immortalisatie voor nefroblastoom onderzoek mogelijk maakt. Deze classificatie is alleen van toepassing binnen Duitsland en kan elders afwijken.

Mutatieprofiel	WT1 mutatiestatus: homozygoot c. 149 C>A, p.S50x, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1 mutatiestatus: heterozygoot TCT>TTT, p.S45F

Kweekmedium	MSCGM-kit (van Lonza)
Scheidingsreagens	Accutase
Subcultuur	Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofvernieuwing	1 tot 2 keer per week
Middel invriezen	Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Cellen ontdooien en kweken	Controleer of de flacon bij levering diepgevroren blijft, aangezien de cellen op droog ijs worden verzonden om optimale temperaturen tijdens het transport te behouden. Bewaar het cryoflesje na ontvangst onmiddellijk bij temperaturen lager dan -150 °C om de integriteit van de cellen te behouden, of ga verder met stap 3 als onmiddellijke kweek vereist is. Voor onmiddellijke kweek: ontdooi de flacon snel door deze onder te dompelen in een waterbad van 37 °C met schoon water en een antimicrobieel middel, waarbij u 40-60 seconden zachtjes schudt totdat er een klein ijsklontje overblijft. Voer alle volgende stappen uit onder steriele omstandigheden in een stromingskap en desinfecteer de cryoflacon met 70% ethanol voordat deze wordt geopend. Open voorzichtig de gedesinfecteerde flacon en breng de celsuspensie over in een centrifugebuis van 15 ml met 8 ml kweekmedium op kamertemperatuur en meng voorzichtig. Centrifugeer het mengsel gedurende 3 minuten bij 300 x g om de cellen te scheiden en gooi het supernatant met resterend vriesmedium voorzichtig weg. Resuspendeer de celpellet voorzichtig in 10 ml vers kweekmedium. Verdeel voor adherente cellen de suspensie over twee T25-kweekkolven; breng voor suspensiekweken al het medium over in één T25-kweekkolf om effectieve celinteractie en -groei te bevorderen. Houd u aan de vastgestelde subcultuurprotocollen voor continue groei en onderhoud van de cellijn, om betrouwbare experimentele resultaten te garanderen.
Incubatieatmosfeer	37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.
Kolfcoating	Geen
Invriesprocedure	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Verzendvoorwaarden	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Opslagomstandigheden	Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Steriliteit	Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
STR profiel	Amelogenine: x,x CSF1PO: 10,12 D13S317: 11,13 D16S539: 11,14 D5S818: 12,13,14 D7S820: 9,14 TH01: 9.3 TPOX: 8,9 vWA: 14,19 D3S1358: 14,17,18 D21S11: 30,31 D18S51: 15,18 Penta E: 5,14 Penta D: 13 D8S1179: 12,14 FGA: 22,25
HLA-allelen	A: '03:01:01, '24:02:01 B: '35:03:01, '38:01:01 C: '12:03:01 DRB1: '07:01:01, '14:54:01 DQA1: '01:04:01, '02:01:01 DQB1: '02:02:01, '05:03:01 DPB1*: '02:01:02G, '04:02:01G E: '01:03:01, '01:03:02

Kavelnummer	Type certificaat	Datum	Catalogusnummer
300412-221	Certificaat van Analyse	23. May. 2025	300412
300412-030624	Certificaat van Analyse	18. Aug. 2025	300412

Als u van plan bent Cytion-cellijnen uitsluitend te gebruiken voor intern onderzoek op één enkele onderzoekslocatie, vul dan onze materiaaloverdrachtsovereenkomst (MTA) in, onderteken deze en stuur deze samen met uw bestelling op.

Voor commerciële toepassingen, waaronder maar niet beperkt tot werk tegen betaling, kwaliteitscontroletests, productvrijgave, diagnostisch gebruik of regelgevende studies, vult u het formulier voor beoogd gebruik in, zodat wij een overeenkomst kunnen opstellen die is afgestemd op uw project.

Let op: de MTA is alleen van toepassing op bepaalde cellijnen. Als deze kennisgeving en het MTA-document op een productpagina worden weergegeven, is de overeenkomst van toepassing. Voor cellijnen die niet onder de MTA vallen, wordt geen verwijzing naar de overeenkomst weergegeven. De MTA is niet geldig voor klanten in Noord- en Zuid-Amerika, China of Taiwan. Neem contact op met onze Amerikaanse entiteit om de juiste overeenkomst te ontvangen.

imWilms1 Cellen

Algemene informatie

Kenmerken

Regelgevende gegevens

Biomoleculaire gegevens

Omgaan met

Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA

Certificaat van Analyse (CoA)

Overeenkomst materiaaloverdracht