Vero E6-cellen
Inzichten in de Vero E6-cellijn
Beschrijving | Vero E6 cellen, ook bekend als Vero C1008 of Vero 76 kloon E6, zijn een continue lijn van epitheelcellen afkomstig van de nieren van de Afrikaanse groene aap, Chlorocebus sabaeus. De Vero-kloon E6, een sublijn van Vero-cellen, staat vooral bekend om zijn nut voor virologisch onderzoek vanwege zijn hoge gevoeligheid voor een groot aantal virussen, waaronder coronavirussen zoals SARS-CoV en SARS-CoV-2, het Ebola-virus en het Zika-virus. De cellijn is van cruciaal belang voor de productie van vaccins, zoals die voor het vaccin tegen Japanse encefalitis, vanwege hun vermogen om virussen te kweken en te isoleren. De cellen hebben een cruciale rol gespeeld in de ontwikkeling van COVID-therapeutica, waaronder het testen van de polymeraseremmer remdesivir. Dankzij hun vermogen om de replicatie van een verscheidenheid aan virussen te ondersteunen, vergemakkelijken Vero E6-cellen het screenen van verbindingen en de evaluatie van antivirale werkzaamheid. Hun rol in klinische studies strekt zich uit tot de beoordeling van ontstekingsremmende medicijnen zoals dexamethason en de studie van genproducten zoals het P-glycoproteïne (pgp-eiwit) dat wordt gecodeerd door het pgp-gen. Vero E6-cellen missen het interferon-β-gen, wat deels hun hoge gevoeligheid voor virale infecties verklaart; door deze deficiëntie kunnen ze geen effectieve aangeboren antivirale respons ontwikkelen. Samengevat zijn Vero E6-cellen een waardevolle bron voor virologie en biogeneeskunde. Ze bieden een veelzijdig platform voor antivirale screening, de studie van replicatie in Vero en helpen bij het begrijpen van retrovirale sequenties. |
---|---|
Organisme | Chlorocebus sabaeus (Groene meerkat) |
Weefsel | Normale nier |
Kenmerken
Leeftijd | Volwassen |
---|---|
Morfologie | Epitheel |
Groei eigenschappen | Aanhangend |
Documentatie over Vero E6-cellen
Citeren | Vero E6 (Cytion catalogusnummer 305008) |
---|---|
Bioveiligheidsniveau | 1 |
Omgaan met Vero C1008 cellen
Kwaliteitscontrole op Vero 76 kloon E6-cellen
Kweekmedium | EMEM, w: 2 mM L-Glutamine, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: EBSS, w: 1 mM natriumpyruvaat, w: NEAA (Cytion artikelnummer 820100c) |
---|---|
Medium supplementen | Vul het medium aan met 10% FBS |
Oplossing voor passeren | Accutase |
Verdubbelingstijd | 22 uur |
Subcultuur | Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten. |
Splitsingsverhouding | 1: 2 tot 1: 4 |
Vloeistofvernieuwing | 2 tot 3 keer per week |
Middel invriezen | CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100) of CM-ACF (Cytion catalogusnummer 806100) |
Behandeling van gecryopreserveerde culturen |
|
Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA
Steriliteit | Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties. |
---|