TT-cellen
Algemene informatie
Beschrijving | TT cellen produceren continu hoge niveaus van calcitonine en CEA. Immunoreactief calcitonine bleek in de celkweek te worden geproduceerd bij niveaus van 3900 pg/miljoen cellen en 7700 pg/miljoen cellen, respectievelijk 24 en 72 uur na een mediumwissel. CEA bleek te accumuleren tot meer dan 27 ng/miljoen cellen over een periode van 72 uur. Chromosomale analyse van de cellijn en tumoren geïnduceerd in naakte muizen onthullen een aneuploïd menselijk karyotype met verschillende merkerchromosomen.De eerste karakteriseringsstudies van de TT cellijn werden uitgevoerd met behulp van vroege passage TT cellen gekweekt in RPMI 1640 medium aangevuld met 15% foetaal runderserum en 1mM L-glutamine.Het is niet bekend of de neuropeptiden die door deze cellijn geproduceerd worden wanneer deze gekweekt wordt in RPMI 1640 medium ook geproduceerd worden door de cellen wanneer deze gekweekt worden in Ham's F-12K medium. Chromosomale analyse van de cellijn en tumoren geïnduceerd in naakte muizen onthullen een aneuploïd menselijk karyotype met verschillende markerchromosomen. |
---|---|
Organisme | Mens |
Weefsel | Schildklier, merg |
Ziekte | Erfelijk schildklier medullair carcinoom, multipele endocriene neoplasie type 2 |
Synoniemen | MTC-TT |
Kenmerken
Leeftijd | 77 jaar |
---|---|
Geslacht | Vrouw |
Etniciteit | Europese |
Morfologie | Epitheel |
Groei eigenschappen | Aanhangend |
Identificatiemiddelen / Bioveiligheid / Citeren
Citeren | TT (Cytion catalogusnummer 305027) |
---|---|
Bioveiligheidsniveau | 1 |
Expressie / Mutatie
Eiwitexpressie | Calcitonine, carcino-embryonisch antigeen (CEA) |
---|---|
Tumorigeen | Ja |
Omgaan met
Kweekmedium | Ham's F12K-medium, w: 2,0 mM L-glutamine, w: 2,0 mM natriumpyruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion-artikelnummer 820608a) |
---|---|
Medium supplementen | Vul het medium aan met 10% FBS |
Oplossing voor passeren | Accutase |
Subcultuur | Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten. |
Splitsingsverhouding | 1:2 tot 1:4 |
Vloeistofvernieuwing | 2 tot 3 keer per week |
Middel invriezen | CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100) of CM-ACF (Cytion catalogusnummer 806100) |
Behandeling van gecryopreserveerde culturen |
|
Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA
Steriliteit | Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties. |
---|---|
STR profiel |
Amelogenine: x,x
CSF1PO: 10,13
D13S317: 11
D16S539: 12,13
D5S818: 12,13
D7S820: 10,12
TH01: 6,9
TPOX: 8,11
vWA: 16,18
D3S1358: 15
D21S11: 29,32.2
D18S51: 12
Penta E: 7,13
Penta D: 13,13
D8S1179: 15,16
FGA: 21,25
D6S1043: 12,13
D2S1338: 17,23
D12S391: 15,21
D19S433: 14,15
|