RKO Cellen
Algemene informatie
Beschrijving | RKO-cellen zijn een menselijke colorectaalcarcinoomcellijn die veel gebruikt wordt in onderzoek naar darmkanker. Ze zijn afkomstig van een matig goed gedifferentieerd adenocarcinoom van de dikke darm en vallen op door hun wild-type p53-status, wat niet gebruikelijk is bij veel kankercellijnen. Deze eigenschap maakt RKO-cellen bijzonder waardevol voor het bestuderen van p53-functies en de cellulaire mechanismen van DNA-herstel en apoptose in de context van colorectale kanker. RKO cellen vertonen een epitheliale morfologie en worden gekenmerkt door hun genetische stabiliteit en responsiviteit op een verscheidenheid aan genetische en farmacologische manipulaties. Ze worden gebruikt in studies die zich richten op de moleculaire routes die betrokken zijn bij de progressie van kanker, waaronder celcyclusregulatie, signaaltransductie en metastase. RKO cellen geven inzicht in de rol van verschillende genen en omgevingsfactoren in de ontwikkeling van colorectale kanker en bieden een platform voor het testen van de werkzaamheid van medicijnen tegen kanker. Daarnaast worden RKO-cellen gebruikt om de complexe interacties tussen kankercellen en hun micro-omgeving te onderzoeken, evenals de immuunrespons op tumorcellen. Hun gevoeligheid voor chemotherapeutische middelen en bestraling maakt ze geschikt voor gebruik bij het ontdekken en ontwikkelen van medicijnen, waardoor potentiële therapeutische doelen kunnen worden geïdentificeerd en nieuwe behandelstrategieën voor dikkedarmkanker kunnen worden geëvalueerd. In het algemeen zijn RKO-cellen een fundamentele bron van onderzoek naar dikkedarmkanker, die aanzienlijk bijdraagt aan ons begrip van de moleculaire biologie van de ziekte en helpt bij de ontwikkeling van effectievere behandelingen. |
---|---|
Organisme | Mens |
Weefsel | Kolon |
Ziekte | Coloncarcinoom |
Kenmerken
Etniciteit | Afrikaans |
---|---|
Morfologie | Epitheel |
Groei eigenschappen | Aanhangend |
Identificatiemiddelen / Bioveiligheid / Citeren
Citeren | RKO (Cytion catalogusnummer 305035) |
---|---|
Bioveiligheidsniveau | 1 |
Expressie / Mutatie
Uitgedrukte receptoren | Urokinase receptor (u-PAR) |
---|---|
Tumorigeen | Ja |
Omgaan met
Kweekmedium | EMEM, w: 2 mM L-Glutamine, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: EBSS, w: 1 mM natriumpyruvaat, w: NEAA (Cytion artikelnummer 820100c) |
---|---|
Medium supplementen | Vul het medium aan met 10% FBS |
Oplossing voor passeren | Accutase |
Subcultuur | Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten. |
Splitsingsverhouding | 1:2 tot 1:4 |
Vloeistofvernieuwing | 2 tot 3 keer per week |
Middel invriezen | CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100) of CM-ACF (Cytion catalogusnummer 806100) |
Behandeling van gecryopreserveerde culturen |
|
Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA
Steriliteit | Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties. |
---|---|
STR profiel |
Amelogenine: x,x
CSF1PO: 8,10
D13S317: 8,11
D16S539: 12,13
D5S818: 11,13
D7S820: 8,10
TH01: 6,10
TPOX: 11
vWA: 15,16,17,22
D3S1358: 16,19
D21S11: 27,29,30
D18S51: 11,12
Penta E: 11,13
Penta D: 10,11
D8S1179: 9,13,14
FGA: 20,21,22,23
D1S1656: 14,17.3
D6S1043: 14,19
D2S1338: 16
D12S391: 15,19,20
D19S433: 14
|