PIEC-cellen

€ 800,00*

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

Productnummer: 305213

Veiligheidsinformatieblad

Productblad

Certificaat van Analyse (CoA)

Overeenkomst materiaaloverdracht

Beschrijving	PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) is een spontaan geïmmortaliseerde endotheelcellijn afkomstig van het endotheel van de iliacale slagader van een jong varken. De cellijn vertoont een typische kassei-morfologie wanneer deze tot confluentie wordt gekweekt en vormt onder standaard kweekomstandigheden hechtende monolaagjes. PIEC's behouden belangrijke endotheliale kenmerken, waaronder contactremming, expressie van endotheliale markers zoals von Willebrand-factor (vWF) en het vermogen om capillaire structuren te vormen in geschikte in-vitrotests. Vanwege hun vasculaire oorsprong worden PIEC's veel gebruikt als model voor het bestuderen van de endotheliale biologie van varkens en interacties tussen gastheer en ziekteverwekker. Functioneel vertonen PIEC's kenmerken die overeenkomen met macrovasculaire endotheelcellen, waaronder responsiviteit op inflammatoire stimuli en het vermogen om adhesiemoleculen tot expressie te brengen die betrokken zijn bij de rekrutering van leukocyten. Ze worden op grote schaal gebruikt in virologisch onderzoek, met name voor de vermeerdering en studie van varkensvirussen zoals het klassieke varkenspestvirus (CSFV), het Afrikaanse varkenspestvirus (ASFV) en het varkensreproductie- en respiratoire syndroomvirus (PRRSV). Door hun hoge vatbaarheid voor bepaalde virale infecties en stabiele groeikenmerken zijn ze een waardevol in-vitrosysteem voor studies naar virale replicatie, antivirale screening en vaccinonderzoek. Naast toepassingen op het gebied van infectieziekten dienen PIEC's als een relevant endotheelmodel voor grote dieren voor het onderzoeken van de vasculaire barrièrefunctie, endotheliale activering, angiogenese en inflammatoire signaalwegen. Als een van varkens afkomstige endotheellijn bieden PIEC's translationele relevantie voor vergelijkend cardiovasculair onderzoek en preklinische studies waarbij vaak varkensmodellen worden gebruikt.
Organisme	Varken
Weefsel	Vasculair endotheel

Morfologie	Epitheel
Groei eigenschappen	Aanhangend

Citeren	PIEC (Cytion catalogusnummer 305213)
Bioveiligheidsniveau	1
NCBI_TaxID	9823
CellosaurusAccessie	CVCL_C0W5

Kweekmedium	RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Supplementen	Vul het medium aan met hitte-geïnactiveerde 10% FBS
Scheidingsreagens	Accutase
Subcultuur	Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding	1:2 tot 1:4
Vloeistofvernieuwing	2 tot 3 keer per week
Middel invriezen	Gebruik als cryoconserveringsmedium volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Cellen ontdooien en kweken	Controleer of de flacon bij levering diepgevroren blijft, aangezien de cellen op droog ijs worden verzonden om optimale temperaturen tijdens het transport te behouden. Bewaar het cryoflesje na ontvangst onmiddellijk bij temperaturen lager dan -150 °C om de integriteit van de cellen te behouden, of ga verder met stap 3 als onmiddellijke kweek vereist is. Voor onmiddellijke kweek: ontdooi de flacon snel door deze onder te dompelen in een waterbad van 37 °C met schoon water en een antimicrobieel middel, waarbij u 40-60 seconden zachtjes schudt totdat er een klein ijsklontje overblijft. Voer alle volgende stappen uit onder steriele omstandigheden in een stromingskap en desinfecteer de cryoflacon met 70% ethanol voordat deze wordt geopend. Open voorzichtig de gedesinfecteerde flacon en breng de celsuspensie over in een centrifugebuis van 15 ml met 8 ml kweekmedium op kamertemperatuur en meng voorzichtig. Centrifugeer het mengsel gedurende 3 minuten bij 300 x g om de cellen te scheiden en gooi het supernatant met resterend vriesmedium voorzichtig weg. Resuspendeer de celpellet voorzichtig in 10 ml vers kweekmedium. Verdeel voor adherente cellen de suspensie over twee T25-kweekkolven; breng voor suspensiekweken al het medium over in één T25-kweekkolf om effectieve celinteractie en -groei te bevorderen. Houd u aan de vastgestelde subcultuurprotocollen voor continue groei en onderhoud van de cellijn, om betrouwbare experimentele resultaten te garanderen.
Incubatieatmosfeer	37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.
Kolfcoating	Voor een optimale hechting en levensvatbaarheid na het ontdooien raden we aan met collageen gecoate kolven of platen te gebruiken.
Invriesprocedure	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Verzendvoorwaarden	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Opslagomstandigheden	Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Steriliteit	Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kavelnummer	Type certificaat	Datum	Catalogusnummer
305213-070524	Certificaat van Analyse	23. May. 2025	305213

Als u van plan bent Cytion-cellijnen uitsluitend te gebruiken voor intern onderzoek op één enkele onderzoekslocatie, vul dan onze materiaaloverdrachtsovereenkomst (MTA) in, onderteken deze en stuur deze samen met uw bestelling op.

Voor commerciële toepassingen, waaronder maar niet beperkt tot werk tegen betaling, kwaliteitscontroletests, productvrijgave, diagnostisch gebruik of regelgevende studies, vult u het formulier voor beoogd gebruik in, zodat wij een overeenkomst kunnen opstellen die is afgestemd op uw project.

Let op: de MTA is alleen van toepassing op bepaalde cellijnen. Als deze kennisgeving en het MTA-document op een productpagina worden weergegeven, is de overeenkomst van toepassing. Voor cellijnen die niet onder de MTA vallen, wordt geen verwijzing naar de overeenkomst weergegeven. De MTA is niet geldig voor klanten in Noord- en Zuid-Amerika, China of Taiwan. Neem contact op met onze Amerikaanse entiteit om de juiste overeenkomst te ontvangen.

PIEC-cellen

Algemene informatie

Kenmerken

Regelgevende gegevens

Biomoleculaire gegevens

Omgaan met

Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA

Certificaat van Analyse (CoA)

Overeenkomst materiaaloverdracht