SW-620-cellen – Invloed op onderzoek en experimenten naar dikke darmkanker
SW-620-cellen vormen de menselijke colorectale kankercellijn van Dukes-stadium C. Ze bezitten een hoog tumorigenisch en metastatisch potentieel. Daarom worden ze op grote schaal gebruikt in kanker- en toxicologisch onderzoek. In dit artikel worden de fundamentele aspecten van de dikke darmkankercellijn SW-620 belicht.
- Groeimedium
- Voor de optimale groei van SW-620-cellen wordt DMEM-medium gebruikt, aangevuld met 10% foetaal runderserum, 4,5 g/l glucose, 4 mM L-glutamine, 1,5 g/l NaHCO₃ en 1,0 mM natriumpyruvaat. Het medium moet twee keer per week worden ververst.
- Verdubbelingstijd
- De verdubbelingstijd van de SW-620-cellen varieert van 20 tot 26 uur.
- Groeitype
- De SW-620-cellijn is hechtend. De cellen vormen monolaagjes op het oppervlak van het kweekvat.
- Bioveiligheidsniveau
- BSL-1
- Verkrijgbaar bij
- Cytion — Bestel SW-620
Herkomst en algemene kenmerken van de SW-620-cellen
De oorsprong en algemene kenmerken vormen de belangrijkste informatie over een cellijn. Kennis hierover is essentieel voor onderzoekers die overwegen deze in hun onderzoek te gebruiken. In dit deel van het artikel worden de belangrijkste kenmerken en de oorsprong van de SW-620-cellijn toegelicht. U komt voornamelijk het volgende te weten: Wat is de SW-620-cellijn? Wat zijn de kenmerken van de SW-620-cellijn? Wat is de oorsprong van SW-620? Wat is de celgrootte van SW-640? En wat is het verschil tussen SW-620 en SW-480?
- SW-620, een celijn van colorectaal carcinoom, is afkomstig van de gemediateerde lymfeklierlaesie van een 51-jarige blanke man met colonadenocarcinoom [1]. Deze celijn is gedeponeerd door A. Leibovitz en collega’s.
- SW-620-cellen hebben een epitheliale morfologie. Ze bestaan uit kleine, ronde en bipolaire cellen die overeenkomen met microvilli.
- De SW-620-cellen hebben een diameter van 14,4 ± 0,3 μm.
- Deze colonkankercellen hebben een hyperdiploïd karyotype. Het modale aantal chromosomen voor SW-620-cellen is 50, wat kan variëren van 45 tot 53.
SW-480 versus SW-620
SW-480 en SW-620 zijn colorectale kankercellijnen. SW-480 is afgeleid van een primaire tumor, terwijl SW-620 is opgezet vanuit een uitgezaaide lymfeklier. Bovendien verschillen de xenotransplantaten die uit deze cellijnen zijn ontwikkeld van elkaar. SW-620-xenotransplantaten produceren laagjes tumorcellen, terwijl SW-480-xenotransplantaten klierachtige structuren vormen [2]. Beide cellijnen hebben identieke mutatieprofielen.
SW-620-cellen: Informatie over het kweken
Het is van essentieel belang om de basisprincipes van het kweken van een cellijn te begrijpen, aangezien dit leidt tot een juiste omgang met en onderhoud van de cellen. In dit gedeelte worden enkele belangrijke punten voor het kweken van SW-620 genoemd die u kunnen helpen bij het volgende: Wat is het SW-620-kweekmedium? Wat is de verdubbelingstijd van SW-620? Hoe kweekt u SW-620-cellen?
Belangrijke punten voor het kweken van SW-620-cellen
Verdubbelingstijd:
De verdubbelingstijd van SW-620 varieert van 20 tot 26 uur.
Hechtend of in suspensie:
De SW-620-cellijn is hechtend. De cellen vormen monolaagjes op het oppervlak van het kweekvat.
Subcultiveringsverhouding:
SW-620-cellen worden gesubcultiveerd met een splitsingsverhouding van 1:3. De hechtende cellen worden gespoeld met fosfaat-zoutoplossing (1X) zonder magnesium en calcium. Vervolgens wordt de passageringoplossing, Accutase, toegevoegd en worden de cellen gedurende 8 tot 10 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd. Er wordt vers medium toegevoegd en de cellen worden gecentrifugeerd. Daarna worden de geoogste cellen zorgvuldig opnieuw gesuspendeerd in een groeimedium en verdeeld over nieuwe flessen voor verdere groei.
Groeimedium:
Voor de optimale groei van SW-620-cellen wordt DMEM-medium gebruikt, aangevuld met 10% foetaal runderserum, 4,5 g/L glucose, 4 mM L-glutamine, 1,5 g/L NaHCO₃ en 1,0 mM natriumpyruvaat. Het medium moet twee keer per week worden ververst.
Kweekomstandigheden:
SW-620-darmkankercellen worden gekweekt in een bevochtigde incubator bij een temperatuur van 37 °C en met 5% CO₂.
Opslag:
Na invriezen worden SW-620-cellen bewaard bij een temperatuur van minder dan -150 °C in ultralage-temperatuurvriezers of in de dampfase van vloeibare stikstof.
Invriesproces en medium:
CM-1 of CM-ACF is een ideaal invriesmedium voor SW-620-cellen. Voor het invriezen van SW-620-cellen wordt een langzaam invriesproces gebruikt. Hierbij daalt de temperatuur slechts met 1 °C per minuut, waardoor de levensvatbaarheid van de cellen behouden blijft.
Ontdooiproces:
Ingevroren SW-620-cellen worden gedurende 40 tot 60 seconden ontdooid in een waterbad dat vooraf is ingesteld op 37 °C. Na het ontdooien wordt kweekmedium toegevoegd en worden de cellen gecentrifugeerd om resten van het invriesmedium te verwijderen. Vervolgens wordt het verkregen celpellet opnieuw gesuspendeerd in een groeimedium en worden de cellen in een nieuwe kweekfles overgebracht voor verdere groei.
Bioveiligheidsniveau:
Voor het werken met SW-620-culturen is een laboratorium van bioveiligheidsniveau 1 (BSL-1) vereist.
Voordelen van SW-620-cellen
Voordelen
- Modellering van coloncarcinoom: SW-620-cellen fungeren als een cruciaal model voor coloncarcinoom, waardoor diepgaand onderzoek naar tumor- en metastasemechanismen mogelijk is, met name in xenotransplantaatmodellen.
- Kankeronderzoek en therapieën: Deze cellen vergemakkelijken het onderzoek naar de biologie van kanker, de werkzaamheid van chemotherapie en mechanismen van celdood, waaronder anoikis.
- CD133-expressie: De expressie van CD133 in SW-620-cellen biedt inzicht in de biologie van kankerstamcellen en de implicaties daarvan voor tumorontwikkeling en therapieresistentie.
- Toepassingen van flowcytometrie: Flowcytometrische analyse van deze cellen maakt het mogelijk om celpopulaties, apoptoseniveaus en proliferatie te beoordelen.
Onderzoekstoepassingen van de SW-620-cellijn
De onderzoeksgebieden waarop SW-620-cellen veelbelovende toepassingen vinden, worden hieronder besproken:
- Kankeronderzoek: SW-620 is een onmisbaar celmodel voor het bestuderen van de biologie van colorectale kanker. Onderzoekers gebruiken dit in-vitromodel om moleculaire mechanismen te onderzoeken die de groei, invasie en migratie van kankercellen aansturen. Daarnaast kan het worden gebruikt om mutaties in de SW-620-cellijn te bestuderen, zoals p53, APC en KRAS. In 2021 is onderzoek uitgevoerd naar het effect van de KRAS-mutatie in de SW-620-cellijn op de gevoeligheid voor het nieuwe geneesmiddel FL118. Ze constateerden dat overexpressie van KRAS de door FL118 geïnduceerde apoptose van colorectale cellen versterkt, terwijl het uitschakelen ervan deze juist vermindert. Deze resultaten kunnen helpen bij het voorspellen van het gebruik van FL118 bij patiënten met coloncarcinoom die een KRAS-mutatie hebben [3].
- Screening en ontwikkeling van geneesmiddelen: De SW-620-cellijn wordt op grote schaal gebruikt voor het screenen en testen van potentiële kandidaat-geneesmiddelen tegen colonkanker. Onderzoekers gebruiken deze cellen om de cytotoxiciteit en werkzaamheid van geneesmiddelen te evalueren, wat kan leiden tot de ontwikkeling van gerichte behandelingsmethoden. Zo werd in een studie de werking tegen colorectale kanker van afzonderlijke essentiële-olieverbindingen uit kaneel en kruidnagel onderzocht met behulp van de SW-620-cellijn [4].
- Onderzoek naar uitzaaiingen: Vanwege het hoge uitzaaiingspotentieel kunnen SW-620-cellen worden gebruikt om de moleculaire routes te onderzoeken die ten grondslag liggen aan de uitzaaiing van kankercellen. Zo ontdekten Zhou Yang en zijn collega’s de rol van het Grainy-head-like 2 (GRHL2)-gen in de progressie en metastase van dikke darmkanker. Zij stelden dat de expressie van het GRHL2-gen de progressie en metastase van colorectale kanker remt door onderdrukking van de epitheliale-naar-mesenchymale overgang (EMT) [5].
Beveilig uw SW620-cellijn
SW-620-cellen: Publicaties
In dit gedeelte worden enkele interessante en meest geciteerde onderzoekspublicaties over de SW-620-cellen belicht.
Deze studie, gepubliceerd in Molecular Carcinogenesis (2017), stelde dat behandeling met het polyfenol urolithine A autofagie induceert in de colorectale kankercellijn SW620. Het remde tevens de uitzaaiing van kankercellen.
Dit artikel in Oncology Letters (2018) onderzocht het antimetastatische potentieel van tetrandrine, een bis-benzylisochinoline-alkaloïde, met behulp van SW-620-cellen.
Dit artikel is gepubliceerd in *Biochemical and Biophysical Research Communications* (2018). Hierin wordt gesteld dat het CDCA3-gen (Cell division cycle associated 3) in colorectale kankercellen opgereguleerd is en de proliferatie ervan bevordert via activering van de NF-κB-signaalroute.
In een studie in het International Journal of Molecular Sciences (2021) werd het synergetische effect onderzocht van een bispecifiek antilichaam (ABL001) en chemotherapeutische geneesmiddelen op de tumorprogressie in een SW620-xenotransplantaat.
Dit artikel is gepubliceerd in Cells (2018). Hierin werd het extract van Bacopa monnieri, Bacopaside II, onderzocht op zijn antitumoractiviteiten in SW-620- en andere colorectale kankercellen.
Bronnen voor de SW-620-cellijn: protocollen, video’s en meer
Hieronder volgen enkele online bronnen over de SW-620-darmkankercellen.
- Transfectie van SW-620: Dit artikel beschrijft kort het protocol voor stabiele transfectie van de SW-620-cellijn.
De volgende link bevat het protocol voor het kweken van SW-620-cellen.
- SW-620-celkweekprotocol: Deze link biedt basisinformatie over de SW-620-cellijn. Het helpt u ook bij het leren van het protocol voor het subcultiveren van SW-620-cellen en het omgaan met cryogeen bewaarde en prolifererende SW-620-culturen.
- Protocollen voor celkweek: Deze video is een uitstekende bron om protocollen te leren voor het passageren, invriezen en ontdooien van hechtende cellen.
Veelgestelde vragen over SW620 cellen
SW620 cellen zijn menselijke colorectale adenocarcinoomcellen verkregen uit de lymfekliermetastase van een patiënt met darmkanker, waardoor ze belangrijk zijn voor kankeronderzoek.
SW620 cellen hebben over het algemeen een diameter van 15 tot 30 micrometer, hoewel dit kan variëren afhankelijk van de kweekomstandigheden.
SW620-cellen vertonen verschillende mutaties, onder andere in het TP53-gen. Deze mutaties kunnen de celmorfologie beïnvloeden, wat leidt tot verschillende vormen en groottes binnen de populatie.
SW620- en SW480-cellen zijn beide afkomstig van adenocarcinomen van de dikke darm, maar SW620-cellen zijn afkomstig van uitzaaiingen, terwijl SW480-cellen afkomstig zijn van de primaire tumor. Dit verschil kan hun genetische opbouw, gedrag in kweek en respons op behandelingen beïnvloeden.
SW620 cellen zijn essentieel bij het bestuderen van tumorigenese, vooral vanwege hun vermogen om tumoren te vormen in xenograft muismodellen en hun expressie van kankerstamcelmarkers zoals CD133.
Ja, SW620 cellen worden gebruikt om celdoodroutes te bestuderen, waaronder apoptose en anoikis, als ze reageren op verschillende kankertherapeutica en omgevingscondities.
Het hoge uitzaaipotentieel van SW620 cellen en hun oorsprong uit een uitgezaaide lymfeklier maken ze tot een relevant model voor het bestuderen van de verspreiding van darmkanker.
Met flowcytometrie kunnen onderzoekers de eigenschappen van SW620 cellen analyseren, waaronder CD133 expressiepatronen en de mate van apoptose of gevoeligheid voor anoikis.
SW620 cellen hebben een hoog tumorigene potentieel wanneer ze in immunodeficiënte xenograft muismodellen worden gebracht, waardoor ze waardevol zijn voor in vivo studies naar kankerprogressie.
Referenties
- Siekmann, W., et al., Effect van lidocaïne en ropivacaïne op primaire (SW480) en gemetastaseerde (SW620) colonkankercellijnen. Oncol Lett, 2019. 18(1): p. 395-401.
- Hewitt, R.E., et al., Validatie van een model voor de progressie van colonkanker. J Pathol, 2000. 192(4): p. 446-54.
- Thangaiyan, R., et al., Subtypes van Kras-mutaties beïnvloeden op verschillende manieren de gevoeligheid van colorectale kankercellen voor FL118, een nieuwe remmer van survivine, Mcl-1, XIAP, cIAP2 en MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): p. 7458.
- Petrocelli, G., et al., Moleculen in essentiële oliën van planten voor de preventie en behandeling van colorectale kanker (CRC). Molecules, 2021. 26(4): p. 885.
- Yang, Z., et al., GRHL2 remt de progressie en uitzaaiing van colorectale kanker door de epitheliale-mesenchymale overgang te onderdrukken. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): p. 1195-1205.