RBL-2H3-cellen – Het belang van RBL-2H3 bij allergische reacties en immunologisch onderzoek
De RBL-2H3-cellijn is een van ratten afkomstige basofiele leukemiecellijn die wordt gebruikt in immunologisch onderzoek. Deze dient als modelsysteem voor het bestuderen van de fysiologie, het gedrag en de functies van mestcellen. Deze cellen worden ook ingezet voor onderzoek naar allergische reacties, immunologische processen en het testen en ontwikkelen van geneesmiddelen.
- Groeimedium
- Voor het kweken van de RBL-2H3-cellen wordt EMEM-medium gebruikt dat 10% FBS, 2 mM L-glutamine, 2,2 g/L NaHCO₃ en EBSS-zout bevat. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden ververst.
- Verdubbelingstijd
- De verdubbelingstijd van de RBL-2H3-mestcellen bedraagt ongeveer 50–60 uur.
- Groeitype
- De RBL-2H3 is een hechtende cellijn.
- Bioveiligheidsniveau
- BSL-2
- Verkrijgbaar bij
- Cytion — Bestel RBL-2H3
- RBL-2H3-cellen: Herkomst en algemene kenmerken
- RBL-2H3-cellen: Informatie over het kweken
- Voordelen en beperkingen van de RBL-2H3-basofielcellijn
- RBL-2H3-cellijn: een hoeksteen in immunologisch onderzoek
- RBL-2H3-cellijn: essentiële veelgestelde vragen voor onderzoekers
- Referenties
- RBL-2H3-cellijn voor geavanceerd immunologisch onderzoek
- RBL-2H3-cellen: Onderzoekspublicaties
- Bronnen voor de RBL-2H3-cellijn: protocollen, video's en meer
- Veelgestelde vragen
RBL-2H3-cellen: oorsprong en algemene kenmerken
Voordat u een basofiele cellijn in uw onderzoek gebruikt, is het belangrijk om de oorsprong en algemene kenmerken ervan te kennen. In dit deel van het artikel vindt u basisinformatie over RBL-2H3-cellen. Bijvoorbeeld: Wat zijn RBL-2H3-mestcellen? Waarom zou u RBL-2H3-cellen gebruiken? Wat zijn RBL-2H3-cellen bij basofiele leukemie bij ratten? Wat is de morfologie van RBL-2H3-cellen? Zijn RBL-2H3-cellen onsterfelijk?
- RBL-2H3 zijn basofiele leukemiecellen die in 1978 zijn afgeleid van basofiele cellen van Wistar-ratten in het Laboratorium voor Immunologie van het National Institute of Dental Research.
- RBL-2H3-cellen bezitten c-kit-receptortyrosinekinase en mastcelprotease II (RMCP-II)-receptoren, waardoor ze een potentieel model voor mestcellen vormen. Daarom worden ze gewoonlijk mestcellen genoemd, ondanks hun oorsprong uit basofielen van ratten [1].
- Bij activering geven ze histamine en andere mediatoren af en brengen ze IgE-receptoren met hoge affiniteit tot expressie.
- RBL-2H3-cellen vertonen een fibroblastachtige morfologie.
RBL-2H3-cellen: Informatie over het kweken
In dit gedeelte leert u enkele belangrijke aspecten van het kweken van de RBL-2H3-cellijn. U komt te weten: Wat is de verdubbelingstijd van RBL-2H3-cellen? Wat is de zaaidichtheid van RBL-2H3-cellen? Wat is het kweekprotocol voor RBL-2H3-cellen? Wat is het invriesmedium voor de RBL-2H3-cellijn?
Belangrijke punten voor het kweken van RBL-2H3-cellen
Verdubbelingstijd van de populatie:
De verdubbelingstijd van RBL-2H3-mestcellen bedraagt ongeveer 50-60 uur.
Hechtend of in suspensie:
De RBL-2H3 is een hechtende cellijn.
Subcultiveringsverhouding:
Voor RBL-2H3-cellen wordt de subcultiveringsverhouding tussen 1:2 en 1:4 gehouden. Hechtende cellen worden gewassen met een magnesium- en calciumvrije 1x PBS-oplossing. Er wordt Accutase aan de subcultiveringsoplossing toegevoegd en de cellen worden 10 minuten bij kamertemperatuur gehouden om los te komen van de bodem van het kweekvat. Er wordt vers medium toegevoegd en de cellen worden gecentrifugeerd. De geoogste cellen worden zorgvuldig opnieuw gesuspendeerd in vers medium en overgebracht naar nieuwe flessen met groeimedium.
Groeimedium:
Voor de kweek van de RBL-2H3-cellen wordt EMEM-medium gebruikt dat 10% FBS, 2 mM L-glutamine, 2,2 g/L NaHCO₃ en EBSS-zout bevat. Het medium moet 2 tot 3 keer per week worden ververst.
Groeiomstandigheden:
RBL-2H3-cellen worden gekweekt in een bevochtigde incubator die is ingesteld op een temperatuur van 37 °C en is aangesloten op een 5% CO₂-bron.
Opslag:
De cellen worden bewaard in de dampfase van vloeibare stikstof of bij een temperatuur van minder dan -150 °C in een elektrische vriezer om de levensvatbaarheid van de cellen op lange termijn te waarborgen.
Invriesproces en medium:
CM-1- of CM-ACF-invriesmedium wordt gebruikt om RBL-2H3-cellen in te vriezen via een langzaam invriesproces. Kort gezegd maakt deze methode een temperatuurdaling van 1 °C per minuut mogelijk en beschermt deze de cellen tegen temperatuurschokken.
Ontdooiproces:
RBL-2H3-cellen worden gedurende ongeveer 60 seconden ontdooid in een vooraf ingesteld waterbad (37 °C). Daarna worden de cellen toegevoegd aan vers kweekmedium en gecentrifugeerd. Deze stap is essentieel om componenten van het invriesmedium te verwijderen. Vervolgens wordt het celpellet opnieuw gesuspendeerd in een groeimedium en worden de cellen in een kolf gedoseerd voor kweek.
Bioveiligheidsniveau:
De RBL-2H3-cellen moeten worden gekweekt in laboratoria van bioveiligheidsniveau 1.
Gepubliceerd: 2023 | Laatst herzien: mei 2026
Voordelen en beperkingen van de RBL-2H3-basofielcellijn
RBL-2H3-cellen worden veelvuldig gebruikt in immunologisch onderzoek. In dit hoofdstuk worden de belangrijkste voordelen en beperkingen ervan beschreven.
Voordelen
- Eenvoudig te kweken: RBL-2H3-cellen kunnen eenvoudig worden gekweekt en in stand gehouden in een laboratoriumomgeving. Dit maakt kosteneffectief en reproduceerbaar onderzoek mogelijk, waardoor ze een populaire keuze zijn voor inleidende studies in de immunologie.
Beperkingen
- Niet-menselijke oorsprong: Omdat RBL-2H3-cellen afkomstig zijn van basofielen van ratten, bootsen ze menselijke biologische processen mogelijk niet nauwkeurig na, wat hun toepasbaarheid in mensspecifiek onderzoek kan beperken. Dit vereist een voorzichtige interpretatie van gegevens bij het extrapoleren van resultaten naar menselijke systemen.
- Vereenvoudigd mestcelmodel: Hoewel deze cellen een basismodel bieden voor het bestuderen van mestcelfuncties, geven ze de complexe aard van mestcelinteracties binnen het menselijke immuunsysteem niet volledig weer. Bijgevolg geven ze mogelijk geen adequaat beeld van de veelzijdige rollen van mestcellen bij immuunreacties of ziektebeelden in vivo.
RBL-2H3-cellijn: een hoeksteen in immunologisch onderzoek
Onderzoek naar basofielen en mestcellen met behulp van de RBL-2H3-cellijn
De RBL-2H3-cellijn, afkomstig van Rattus norvegicus, fungeert als een belangrijk model voor het bestuderen van de biologie van basofielen en mestcellen. Deze mestcellen van ratten bieden essentiële inzichten in de afgifte van mediatoren door mestcellen, wat cruciaal is voor het begrijpen van allergische aandoeningen zoals allergische rhinitis. Via deze cellen onderzoeken wetenschappers de dynamiek van celreceptoren en de totstandkoming van immunologische synapsen, die centraal staan in de reactie van het immuunsysteem op allergenen. Een interessante studie, gepubliceerd in 2019, maakte gebruik van de RBL-2H3-cellijn en onderzocht de mechanismen achter pseudo-allergische reacties die worden veroorzaakt door een injectie met Qingkailing. Uit de studie bleek dat de PI3K-RAC1-signaalcascade deze allergische reactie in cellen gedeeltelijk opwekt [2].
Dynamiek van immunologische synapsen in allergieonderzoek
RBL-2H3-cellen worden op grote schaal ingezet in immunologisch onderzoek en zijn bijzonder geschikt voor het bestuderen van de dynamiek van immunologische synapsen. Dit draagt bij aan het ophelderen van de communicatieprocessen van het immuunsysteem, met toepassingen in het onderzoek naar zowel perifere bloed- als peritoneale mestcellen. Dergelijk onderzoek is van cruciaal belang voor een uitgebreid begrip van de immuunrespons in zowel systemische als lokale contexten.
Geneesmiddelenscreening en toxiciteitstesten
Bij het screenen en testen van geneesmiddelen wordt gebruikgemaakt van de reactie van RBL-cellen op verschillende prikkels, waaronder het onderzoek naar hoe H₂O₂ door IgE gemedieerde reacties remt. Deze cellen spelen een essentiële rol bij de ontwikkeling van behandelingen voor ziekten zoals streptokokkeninfecties, waarbij streptokokken van de mitis-groep de activering van mestcellen remmen. Daarnaast evalueren onderzoekers de toxische effecten van diverse stoffen, waaronder chemicaliën, geneesmiddelen en nanodeeltjes, met behulp van dit RBL 2H3-mc-model. Zo werd in een recent onderzoek (2022) de cytotoxiciteit van polystyreen-microplastics op RBL-2H3-cellen beoordeeld. Men ontdekte dat microplastics de organellen van RBL-2H3-cellen beschadigen en celdood bevorderen [3]. Een andere studie uit 2021 evalueerde het anti-allergische en ontstekingsremmende potentieel van een natuurlijk product, neferine, met behulp van het RBL-2H3-mc-model. Uit de studie bleek dat de verbinding goede anti-allergische en ontstekingsremmende eigenschappen heeft [4].
Geavanceerde methoden voor immunologische metingen
De consistente en meetbare afgifte van mediatoren door RBL-2H3-cellen maakt deze cellen ideaal voor eenvoudige fluorimetrie, wat nauwkeurige en betrouwbare metingen mogelijk maakt die cruciaal zijn voor ziekteonderzoek en de beoordeling van therapeutische middelen.
De RBL-2H3-cellijn, afkomstig van Rattus norvegicus, is van onschatbare waarde voor zowel fundamenteel als toegepast onderzoek op het gebied van de immunologie. Deze biedt uitgebreide mogelijkheden voor het vergroten van onze kennis en het verbeteren van de behandeling van immunologische aandoeningen.
RBL-2H3-cellijn voor geavanceerd immunologisch onderzoek
RBL-2H3-cellen: Onderzoekspublicaties
Hieronder volgen enkele interessante onderzoekspublicaties over de RBL-2H3-mestcellen:
Remmende werking van narirutine op de degranulatie van RBL-2H3-cellen
Dit onderzoeksartikel is gepubliceerd in het tijdschrift Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). De studie suggereert dat narirutine, een natuurlijke stof, remmende effecten heeft op de degranulatie van RBL-2H3-cellen door regulering van NF-κB, MAPK en de tyrosinekinase-signaalroute.
Dit onderzoek, gepubliceerd in het International Journal of Molecular Sciences (2020), stelde dat de verbinding apigenine de allergische en ontstekingsreacties van RBL-2H3- en RAW264.7-cellen aanzienlijk onderdrukt. Daarom kan het dienen als een potentieel middel voor de bestrijding van immuungerelateerde ziekten.
Dit onderzoeksartikel in het International Journal of Molecular Sciences (2021) evalueerde de anti-allergische en ontstekingsremmende effecten van een natuurproduct, saponarine, met behulp van verschillende cellijnen, waaronder RBL-2H3.
Uit dit onderzoek, gepubliceerd in Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014), bleek dat extracten van Benchalokawichian en enkele actieve bestanddelen mogelijk remmende effecten hebben op de afgifte van β-hexosaminidase door RBL-2H3-cellen.
Dit artikel verscheen in 2018 in het International Journal of Biological Macromolecules. Uit het onderzoek bleek dat spirulina maxima, een natuurproduct, de degranulatie van RBL-2H3 remt door de fosforylatie van MAPK’s en AKT te voorkomen.
Bronnen voor de RBL-2H3-cellijn: protocollen, video’s en meer
RBL-2H3 is een veelgebruikte mestcel-cellijn. Hieronder worden de beschikbare bronnen vermeld met betrekking tot kweek- en transfectieprotocollen voor RBL-2H3:
- RBL-2H3-mestcelmodel: Dit onderzoeksartikel bevat protocollen voor het onderhouden van RBL-2H3-culturen en voor de transfectie van RBL-2H3.
Hier volgen enkele bronnen waarin het kweekprotocol voor de RBL-2H3-cellijn wordt uitgelegd:
- RBL-2H3-cellen: Deze website is nuttig om meer te weten te komen over de protocollen voor het kweken van de RBL-2H3-cellijn. Daarnaast bevat de website informatie over RBL-2H3-celmedia en kweekomstandigheden.
RBL-2H3-cellijn: essentiële veelgestelde vragen voor onderzoekers
Referenties
- Passante, E. en N. Frankish, De RBL-2H3-cellijn: haar herkomst en geschiktheid als model voor de mestcel. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseudo-allergische reactie veroorzaakt door een Qingkailing-injectie, gedeeltelijk via de PI3K-Rac1-signaalroute in RBL-2H3-cellen. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Micro- (nano-)plasticdeeltjes van polystyreen beschadigen de organellen van RBL-2H3-cellen en stimuleren MOAP-1 om apoptose te induceren. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Anti-allergische en ontstekingsremmende effecten van neferine op RBL-2H3-cellen. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.