L1210 Cellen
Algemene informatie
Beschrijving | L1210 lymfocytische leukemiecellen van de muis zijn afkomstig uit het ascitische vocht van vrouwelijke muizen van 8 maanden oud. |
---|---|
Organisme | Muis |
Weefsel | Hematopoëtisch |
Ziekte | Leukemie |
Synoniemen | L 1210, L-1210, Leukemie 1210, Leukemie 1210, Leukemie L1210 |
Kenmerken
Leeftijd | 8 maanden |
---|---|
Geslacht | Vrouw |
Celtype | Lymfoblast |
Groei eigenschappen | Ophanging |
Identificatiemiddelen / Bioveiligheid / Citeren
Citeren | L1210 (Cytion catalogusnummer 400257) |
---|---|
Bioveiligheidsniveau | 1 |
Expressie / Mutatie
Tumorigeen | Ja, in naaktmuizen en DBA-muizen |
---|---|
Virussen | MAP-test negatief: Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis. |
Omgaan met
Kweekmedium | DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a) |
---|---|
Medium supplementen | Vul het medium aan met 10% FBS |
Verdubbelingstijd | 10 tot 12 uur |
Subcultuur | Houd culturen in stand door regelmatig medium toe te voegen of te vervangen. Begin culturen met een dichtheid van 2 x 10^5 cellen/ml en houd de celconcentratie binnen het bereik van 1 x 10^5 tot 1 x 10^6 cellen/ml voor optimale groei |
Splitsingsverhouding | Een verhouding van 1:4 wordt aanbevolen |
Dichtheid zaaien | 1 x 10^6 cellen/ml |
Vloeistofvernieuwing | Elke 3 tot 4 dagen |
Herstel door bevriezing | Snel |
Middel invriezen | CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100) of CM-ACF (Cytion catalogusnummer 806100) |
Behandeling van gecryopreserveerde culturen |
|
Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA
Steriliteit | Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties. |
---|
Required products
Wat DMEM onderscheidt van andere media is de unieke samenstelling. Het bevat een indrukwekkende verviervoudiging van de aminozuur
- en vitamineconcentratie in vergelijking met het originele Eagle's Minimal Essential Medium. DMEM werd oorspronkelijk ontwikkeld met lage glucose (1 g/L) en natriumpyruvaat, maar wordt vaak gebruikt met hogere glucosewaarden, al dan niet met natriumpyruvaat. DMEM bevat met name geen eiwitten, lipiden of groeifactoren, waardoor aanvulling noodzakelijk is. Voor optimale groei wordt DMEM vaak aangevuld met 10% foetaal runderserum (FBS). Daarnaast maakt DMEM gebruik van een natriumbicarbonaat buffersysteem (3,7 g/L), waarbij een omgeving van 5-10% CO2 nodig is om een fysiologische pH te handhaven.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) staat hoog aangeschreven onder de gedefinieerde media voor cel
- en weefselkweek en voorziet in de groeibehoeften van verschillende aanhangende celfenotypen. Het overtreft het originele Eagle's Medium, ontwikkeld in de jaren 1950 voor het kweken van kippeneieren, door de verbeterde aanvullende formulering die bekend staat als Dulbecco's modificatie. Deze modificatie verhoogt het gehalte aan geselecteerde aminozuren en vitaminen aanzienlijk, tot wel vier keer in vergelijking met het oorspronkelijke medium.
Op het gebied van celkweek speelt DMEM een essentiële rol als groeimedium voor verschillende celtypen, waaronder primaire cellen, stamcellen en getransformeerde cellen. Onderzoekers gebruiken de aangepaste versie van DMEM ook voor een breed scala aan onderzoekstoepassingen, zoals het ontdekken van medicijnen, weefselmanipulatie en het bestuderen van celsignaalroutes.
Kwaliteitscontrole
pH = 7,2 +/
- 0,02 bij 20-25°C.
Elk lot is getest op steriliteit en afwezigheid van mycoplasma en bacteriën.
Onderhoud
Koel bewaren bij +2°C tot +8°C in het donker. Invriezen en opwarmen tot +37°C minimaliseren de kwaliteit van het product.
Verwarm het medium niet tot meer dan 37° C en gebruik geen oncontroleerbare warmtebronnen (bijv. magnetronapparatuur).
Als slechts een deel van het medium wordt gebruikt, haal dan deze hoeveelheid uit de fles en warm het op bij kamertemperatuur.
Houdbaarheid voor elk medium behalve het basismedium is 8 weken vanaf de productiedatum.
Samenstelling
Bestanddelen
mg/L
Anorganische zouten
Watervrij calciumchloride
200,00
IJzer(III)nitraat x 9H2O
0,10
Watervrij magnesiumsulfaat
97,66
Kaliumchloride
400,00
Natriumchloride
6.400,00
Natriumdiwaterstoffosfaatwatervrij
108,69
Andere componenten
D(+)-Glucose watervrij
4.500,00
Natriumpyruvaat
110,00
Fenol rood
15,00
NaHCO3
1.500,00
Aminozuren
L-Arginine x HCl
84,00
L-Cystine x 2HCl
62,58
L-Glutamine
584,00
Glycine
30,00
L-Histidine x HCl xH2O
42,00
L-Isoleucine
104,80
L-Leucine
104,80
L-Lysine x HCl
146,20
L-Methionine
30,00
L-Fenylalanine
66,00
L-Serine
42,00
L-Threonine
95,20
L-Tryptofaan
16,00
L-Tyrosine x Na
103,79
L-Valine
93,60
Vitaminen
D-Calcium pantothenaat
4,00
Choline chloride
4,00
Foliumzuur
4,00
myo-Inositol
7,00
Nicotinamide
4,00
Pyridoxine x HCl
4,00
Riboflavine
0,40
Thiamine x HCl
4,00
In biologisch onderzoek is de cryopreservatie van cellen van zoogdieren een hulpmiddel van onschatbare waarde. Succesvolle preservatie van cellen is een topprioriteit, aangezien het verlies van een cellijn door contaminatie of onjuiste opslagomstandigheden leidt tot tijd
- en geldverlies en uiteindelijk tot vertraging van onderzoeksresultaten. Zodra de cellen zijn overgebracht van een celgroeimedium naar een vriesmedium, worden de cellen meestal op een gereguleerde snelheid ingevroren en opgeslagen in vloeibare stikstofdamp of bij minder dan -130°C in een mechanische diepvriezer. Het invriesmedium CM-1 maakt cryopreservatie van cellen bij temperaturen onder -130°C (of in vloeibare stikstof) mogelijk, waardoor er in wezen geen extra, dure ultralage vriezer nodig is en er geen tijdrovende en veeleisende invriesprocessen met gecontroleerde snelheid meer nodig zijn. Verzamel de cellen, zuig het groeimedium op, resuspendeer in CM-1, breng ze over in een cryoflacon en bewaar de flacon bij temperaturen onder -130 °C.
Lange houdbaarheid
CM-1 is een serumbevattend, gebruiksklaar cryoconserveringsmedium dat tot een jaar in de koelkast kan worden bewaard.
Vertrouwd door honderden onderzoekers
Ons geavanceerde celvriesmedium CM-1 is een marktleider in Duitsland en Europa en onderscheidt zich door talrijke publicaties met honderden verschillende cellijnen wereldwijd. We hebben het getest met meer dan 1000 cellijnen uit onze eigen celbank.
Geoptimaliseerde ingrediënten
CM-1 bevat geen serumproducten. Serumbevattende cryoconserveringsmediums beschermen de cellen optimaal tijdens het invriezen en hebben het voordeel van hoge recovery rates. Aangezien CM-1 is getest met een groot aantal cellijnen, kun je er zeker van zijn dat je cellen altijd goed herstellen.
Bevat FBS, DMSO, glucose, zouten
Buffercapaciteit pH = 7,2 tot 7,6
Toepassingen en validatie
De cellen die bewaard worden in ons CM-1 vriesmedium kunnen gebruikt worden voor celtelling, levensvatbaarheid en cryopreservatie, celkweek, zoogdiercelcultuur, genexpressieanalyse en genotypering, in vitro transcriptie en polymerasekettingreacties. De werkzaamheid van elke batch wordt geëvalueerd met CHO-K1-cellen. Elke batch wordt getest op pH, osmolaliteit, steriliteit en endotoxinen om een hoge kwaliteit te garanderen.
Fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) is een veelzijdige bufferoplossing die wordt gebruikt in veel biologische en chemische toepassingen en bij weefselverwerking. Onze PBS-oplossing is geformuleerd met ingrediënten van hoge kwaliteit om een constante pH te garanderen tijdens experimenten. De osmolariteit en ionenconcentraties van onze PBS-oplossing zijn afgestemd op die van het menselijk lichaam, waardoor het isotoon is en niet giftig voor de meeste cellen.
Samenstelling van onze PBS-oplossing
Onze PBS-oplossing is een op pH aangepast mengsel van ultrazuivere fosfaatbuffers en zoutoplossingen. Bij een 1X werkconcentratie bevat het 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 8 mM Na2HPO4 en 2 mM KH2PO4. We hebben deze samenstelling gekozen op basis van CSHL protocollen en Molecular cloning by Sambrook, wat gevestigde standaarden zijn in de onderzoeksgemeenschap.
Toepassingen van onze PBS-oplossing
Onze PBS-oplossing is ideaal voor een breed scala aan toepassingen in biologisch onderzoek. De isotone en niet-toxische eigenschappen maken het perfect voor het verdunnen van stoffen en het spoelen van celcontainers. Onze PBS-oplossing met EDTA kan ook gebruikt worden om vastzittende en samengeklonterde cellen los te maken. Het is echter belangrijk op te merken dat tweewaardige metalen zoals zink niet aan PBS kunnen worden toegevoegd, omdat dit tot precipitatie kan leiden. In dergelijke gevallen worden Good's buffers aanbevolen. Bovendien is aangetoond dat onze PBS-oplossing een aanvaardbaar alternatief is voor virale transportmedia voor het transport en de opslag van RNA-virussen, zoals SARS-CoV-2.
Opslag van onze PBS-oplossing
Onze PBS-oplossing kan worden bewaard bij kamertemperatuur, waardoor het gemakkelijk te gebruiken en te gebruiken is.
Samengevat
Samengevat is onze PBS-oplossing een essentieel onderdeel van veel biologische en chemische experimenten. De isotone en niet-toxische eigenschappen maken het geschikt voor talloze toepassingen, van celkweek tot virale transportmedium. Door te kiezen voor onze PBS-oplossing van hoge kwaliteit kunnen onderzoekers hun experimenten optimaliseren en nauwkeurige en betrouwbare resultaten garanderen.
Samenstelling
Bestanddelen
mg/L
Anorganische zouten
Kaliumchloride
200,00
Kaliumdiwaterstoffosfaat
200,00
Natriumchloride
8,000.00
natriumwaterstoffosfaat watervrij
1,150.00