KC-cellen
Algemene informatie
| Beschrijving | KC (Kc167) is een embryonale cellijn van Drosophila melanogaster, afkomstig van een vrouwelijk embryo in het stadium van dorsale sluiting, geregistreerd in Cellosaurus onder de code CVCL_Z833. De lijn is oorspronkelijk opgezet en wordt op grote schaal gebruikt in de celbiologie van Drosophila, bij genetische screens en in de functionele genomica. Kc167-cellen zijn geïmmortaliseerd met SV40 en groeien semi-adherent, waarbij ze een gemengde populatie vormen van aanhechtende en los zwevende cellen. Ze behoren tot de best gekarakteriseerde Drosophila-cellijnen en lenen zich volledig voor RNAi-gemedieerde genuitschakeling, waardoor ze een hoeksteenmodel vormen voor genoombrede RNAi-screenings in de biologie van ongewervelde dieren. KC-cellen zijn toepasbaar in de Drosophila-celbiologie, genoombrede RNAi- en CRISPR-screenings, onderzoek naar signaaltransductieroutes (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), onderzoek naar aangeboren immuniteit en vergelijkende studies van evolutionair geconserveerde routes. Het volledig gesequenteerde en geannoteerde Drosophila-genoom, in combinatie met uitgebreide openbare databases van RNAi-reagentia (bijv. DRSC/TRiP), maakt KC-cellen bijzonder krachtig voor onbevooroordeelde functionele genomische ontdekkingen. Vanwege de SV40-immortalisatie geldt de BSL-2-classificatie. KC-cellen worden gekweekt in Schneider’s Drosophila-medium, aangevuld met 2 mM glutamine en 10% FBS. Belangrijk is dat Drosophila-cellijnen worden gekweekt bij 25 °C in omgevingslucht zonder CO₂ (niet bij 37 °C / 5% CO₂ zoals bij zoogdiercellen). Cellen worden gepasseerd door middel van voorzichtige resuspensie en verdunning (semi-adherente groei). Het medium wordt om de 2–3 dagen ververst of de cellen worden verdund. |
|---|---|
| Organisme | Drosophila melanogaster (fruitvlieg) |
| Weefsel | Embryo |
| Ziekte | Normaal |
| Uitgezaaide plaats | Embryo (stadium van dorsale sluiting) |
| Toepassingen | Celbiologie van Drosophila; genoombrede RNAi-screens; CRISPR-screens; signaaltransductie (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); aangeboren immuniteit; functionele genomica bij ongewervelden |
| Synoniemen | KC, K C |
Kenmerken
| Leeftijd | Fase van de dorsale sluiting |
|---|---|
| Geslacht | Vrouw |
| Morfologie | Semi-adherent, epitheelachtig |
| Celtype | Embryonale cellen |
| Groei eigenschappen | halfhechtend |
Regelgevende gegevens
| Citeren | KC (Cytion-catalogusnummer 300604) |
|---|---|
| Bioveiligheidsniveau | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| CellosaurusAccessie | CVCL_Z833 |
| GGO-status | GMO-S2: Deze Drosophila-cellijn bevat een stabiel geïntegreerde SV40-immortalisatiecassette. BSL-2-beveiliging is vereist. Deze classificatie geldt uitsluitend binnen Duitsland en kan elders afwijken. |
Biomoleculaire gegevens
| Virusgevoeligheid | SV40-virus dat cellen onsterfelijk maakt |
|---|
Omgaan met
| Kweekmedium | Schneider-medium voor Drosophila + 2 mM glutamine + 10% foetaal runderserum (FBS). |
|---|---|
| Supplementen | Voeg aan het medium 2 mM glutamine en 10% FBS toe |
| Scheidingsreagens | Niet vereist (halfvast; voorzichtig opnieuw in suspensie brengen) |
| Verdubbelingstijd | ongeveer 24 tot 48 uur |
| Subcultuur | Pipetteer de kweek voorzichtig om de halfhechtende cellen weer in suspensie te brengen. Breng een geschikt volume over naar een nieuwe kolf en voeg vers, voorverwarmd Schneider-medium toe. Verdun tot een dichtheid van 5 × 10⁵ tot 1 × 10⁶ cellen/ml. Incubeer bij 25 °C in omgevingslucht zonder CO₂. |
| Splitsingsverhouding | 1 tot en met 3 |
| Dichtheid zaaien | 5 × 10⁵ tot 1 × 10⁶ cellen/ml |
| Vloeistofvernieuwing | Om de 2 tot 3 dagen |
| Middel invriezen | Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen. |
| Cellen ontdooien en kweken |
|
| Incubatieatmosfeer | 25 °C, omgevingslucht (geen CO₂ nodig). |
| Verzendvoorwaarden | Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats. |
| Opslagomstandigheden | Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof. |
Kwaliteitscontrole en moleculaire analyse
Overeenkomst materiaaloverdracht
Als u van plan bent Cytion-cellijnen uitsluitend te gebruiken voor intern onderzoek op één enkele onderzoekslocatie, vul dan onze materiaaloverdrachtsovereenkomst (MTA) in, onderteken deze en stuur deze samen met uw bestelling op.
Voor commerciële toepassingen, waaronder maar niet beperkt tot werk tegen betaling, kwaliteitscontroletests, productvrijgave, diagnostisch gebruik of regelgevende studies, vult u het formulier voor beoogd gebruik in, zodat wij een overeenkomst kunnen opstellen die is afgestemd op uw project.
Let op: de MTA is alleen van toepassing op bepaalde cellijnen. Als deze kennisgeving en het MTA-document op een productpagina worden weergegeven, is de overeenkomst van toepassing. Voor cellijnen die niet onder de MTA vallen, wordt geen verwijzing naar de overeenkomst weergegeven. De MTA is niet geldig voor klanten in Noord- en Zuid-Amerika, China of Taiwan. Neem contact op met onze Amerikaanse entiteit om de juiste overeenkomst te ontvangen.