Hep-66.3A-cellen

€ 800,00*

De producten worden bevroren verzonden in cryobuisjes met droogijs. Elk cryobuisje bevat doorgaans 3 × 10 ⁶ cellen voor hechtende lijnen of 5 × 10⁶ cellen voor suspensielijnen (zie het batch-CoA voor meer informatie).

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

cryovial

Productnummer: 400206

Veiligheidsinformatieblad

Productblad

Overeenkomst materiaaloverdracht

Beschrijving	De hepatoomcellijn Hep-66.4A is afgeleid van een levertumor bij muizen, specifiek van de C57BL/6J muizenstam. Deze cellijn wordt gekarakteriseerd door zijn hepatocytische oorsprong, bevestigd door middel van intermediaire filamenteiwitanalyse. Hep-66.4A brengt eenvoudige keratines K8 en K18 tot expressie, die typerend zijn voor normale levercellen, evenals vimentine en keratine K19 in verschillende mate. Deze eiwitpatronen bevestigen de hepatocytische aard van de cellijn en de classificatie als hepatoomlijn. De Hep-66.4A cellijn vertoont een overwegend epitheliale morfologie, wat zijn oorsprong uit hepatocyten weerspiegelt. Dit morfologische fenotype komt overeen met het eiwitexpressieprofiel. DNA-fingerprintanalyse van Hep-66.4A onthulde geen belangrijke structurele afwijkingen, wat duidt op een zekere mate van genomische stabiliteit. Er werden echter enkele veranderingen in de relatieve intensiteit van specifieke banden waargenomen met toenemende passagegetallen, wat duidt op een geringe genomische variabiliteit gedurende langere kweekperioden. Ondanks de afwezigheid van detecteerbare p53-mutaties in de primaire muizenlevertumoren, werden in sommige hepatoomlijnen afwijkingen gevonden tijdens in vitro vermeerdering. De Hep-66.4A cellijn werd geanalyseerd op mutaties in de p53 en c-Ha-ras genen. De afwezigheid van detecteerbare mutaties in het p53-gen in deze lijn tijdens vroege passages suggereert een stabiele genetische achtergrond. Deze cellijn dient als waardevol model voor het bestuderen van hepatocellulair carcinoom en biedt inzicht in de cellulaire en moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan levertumorigenese.
Organisme	Muis
Weefsel	Lever
Ziekte	Hepatocellulair carcinoom
Synoniemen	HEP-66.3A, 66.3A

Ras/soort	C57BL/6J
Leeftijd	Volwassen
Geslacht	Vrouw
Morfologie	Epitheelachtig
Groei eigenschappen	Aanhangend

Citeren	Hep-66.3A (Cytion catalogusnummer 400206)
Bioveiligheidsniveau	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccessie	CVCL_5771

Eiwitexpressie	Keratine 8, Keratine 18, Vimentine
Tumorigeen	Ja, in B6C3F1 muizen
Mutatieprofiel	P53 wt

Kweekmedium	DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Supplementen	Vul het medium aan met 10% FBS
Scheidingsreagens	Accutase
Subcultuur	Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding	Een verhouding van 1:4 tot 1:8 wordt aanbevolen
Vloeistofvernieuwing	Om de 3 tot 5 dagen
Middel invriezen	Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Cellen ontdooien en kweken	Controleer of de flacon bij levering diepgevroren blijft, aangezien de cellen op droog ijs worden verzonden om optimale temperaturen tijdens het transport te behouden. Bewaar het cryoflesje na ontvangst onmiddellijk bij temperaturen lager dan -150 °C om de integriteit van de cellen te behouden, of ga verder met stap 3 als onmiddellijke kweek vereist is. Voor onmiddellijke kweek: ontdooi de flacon snel door deze onder te dompelen in een waterbad van 37 °C met schoon water en een antimicrobieel middel, waarbij u 40-60 seconden zachtjes schudt totdat er een klein ijsklontje overblijft. Voer alle volgende stappen uit onder steriele omstandigheden in een stromingskap en desinfecteer de cryoflacon met 70% ethanol voordat deze wordt geopend. Open voorzichtig de gedesinfecteerde flacon en breng de celsuspensie over in een centrifugebuis van 15 ml met 8 ml kweekmedium op kamertemperatuur en meng voorzichtig. Centrifugeer het mengsel gedurende 3 minuten bij 300 x g om de cellen te scheiden en gooi het supernatant met resterend vriesmedium voorzichtig weg. Resuspendeer de celpellet voorzichtig in 10 ml vers kweekmedium. Verdeel voor adherente cellen de suspensie over twee T25-kweekkolven; breng voor suspensiekweken al het medium over in één T25-kweekkolf om effectieve celinteractie en -groei te bevorderen. Houd u aan de vastgestelde subcultuurprotocollen voor continue groei en onderhoud van de cellijn, om betrouwbare experimentele resultaten te garanderen.
Incubatieatmosfeer	37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.
Kolfcoating	Geen
Invriesprocedure	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Verzendvoorwaarden	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Opslagomstandigheden	Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Steriliteit	Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
STR profiel	M_18-3: 16,18 M_4-2: 20.3,21.3 M_6-7: 12,17 M_3-2: 14 M_19-2: 12,13 M_7-1: 26,26.2 M_1-1: 10,16 M_8-1: 16 M_2-1: 9,15 M_15-3: 22.3,25.3 M_6-4: 18 M_11-2: 16 M_1-2: 16,20 M_17-2: 15 M_12-1: 16,17 M_5-5: 15,16 M_X-1: 28 M_13-1: 17 Mens D4/D8: -

Als u van plan bent Cytion-cellijnen uitsluitend te gebruiken voor intern onderzoek op één enkele onderzoekslocatie, vul dan onze materiaaloverdrachtsovereenkomst (MTA) in, onderteken deze en stuur deze samen met uw bestelling op.

Voor commerciële toepassingen, waaronder maar niet beperkt tot werk tegen betaling, kwaliteitscontroletests, productvrijgave, diagnostisch gebruik of regelgevende studies, vult u het formulier voor beoogd gebruik in, zodat wij een overeenkomst kunnen opstellen die is afgestemd op uw project.

Let op: de MTA is alleen van toepassing op bepaalde cellijnen. Als deze kennisgeving en het MTA-document op een productpagina worden weergegeven, is de overeenkomst van toepassing. Voor cellijnen die niet onder de MTA vallen, wordt geen verwijzing naar de overeenkomst weergegeven. De MTA is niet geldig voor klanten in Noord- en Zuid-Amerika, China of Taiwan. Neem contact op met onze Amerikaanse entiteit om de juiste overeenkomst te ontvangen.

Hep-66.3A-cellen

Algemene informatie

Kenmerken

Regelgevende gegevens

Biomoleculaire gegevens

Omgaan met

Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA

Overeenkomst materiaaloverdracht