HaCaT-cellen
Essentiële feiten over Hacat cellen
| Beschrijving | HaCaT-cellen zijn een centraal model in dermatologisch onderzoek en bieden inzicht in de complexe mechanismen van huidbiologie en -pathologie. De spontaan geïmmortaliseerde HaCaT-cellijn is afgeleid van volwassen menselijke epidermale cellen en behoudt het vermogen om te prolifereren en differentiatie te ondergaan, vergelijkbaar met basale keratinocyten in vivo. HaCaT-cellen dienen als een robuust platform voor het onderzoeken van het epidermale differentiatieproces en het bestuderen van de epidermale differentiatiemarkers die essentieel zijn voor het behoud van de huidintegriteit. De gevoeligheid van HaCaT-cellen voor apoptose en hun gevoeligheid voor apoptose-inducerende stoffen wordt uitgebreid bestudeerd, vooral in de context van cytotoxische stoffen zoals RIPL. Onderzoekers beoordelen de cytotoxiciteit van deze middelen en de mate van cytotoxiciteit met behulp van HaCaT-cellen, waarbij technieken zoals fluorescentiemicroscopie worden gebruikt om cellulaire veranderingen te visualiseren. Onderzoekers hebben HaCaT-cellen gebruikt om de effecten van verschillende stoffen te onderzoeken, waaronder antimicrobiële substraten en hun invloed op de levensvatbaarheid van de cellen. Deze cellen zijn een uitstekend substraat voor het testen van antimicrobiële biomaterialen en antimicrobiële atelocollageensubstraten, cruciaal voor huidherstel en medische toepassingen. De HaCaT epidermale lijn speelt ook een cruciale rol bij het bestuderen van cellulaire senescentie, cytokines en genexpressieprofielen gerelateerd aan veroudering en chronische ziekten. De transcriptieprofielen van HaCaT-cellen, inclusief de rol van κB en microRNA's, geven inzicht in de reguleringsmechanismen op moleculair niveau. De HaCaT keratinocytenlijn, met hun kenmerken als epidermale keratinocyten, biedt een handelbaar systeem voor het ontleden van de ingewikkelde wisselwerking tussen epidermale cellen en het immuunsysteem, in het bijzonder de rol van keratinocyten in ziektetoestanden. Ze maken het mogelijk om epigenetische modificaties en hun invloed op de differentiatie van keratinocyten te onderzoeken, waaronder de vorming van de hoornlaag, een belangrijk kenmerk van de barrièrefunctie van de huid. Samengevat zijn HaCaT-cellen een onmisbaar model in dermatologisch onderzoek, dat een dieper inzicht in de biologie en pathologie van de huid mogelijk maakt door hun gelijkenis met basale keratinocyten en hun vermogen om celgroei en differentiatie te ondergaan. Hun toepassing varieert van het bestuderen van epidermale differentiatie en antimicrobiële effecten tot het onderzoeken van cellulaire reacties zoals apoptose, waardoor ze een hoeksteen vormen in celbiologie en biomedisch onderzoek. |
|---|---|
| Organisme | Mens |
| Weefsel | Huid |
Details
| Leeftijd | 62 jaar |
|---|---|
| Geslacht | Mannelijk |
| Etniciteit | Kaukasisch |
| Celtype | Keratinocyten met een diameter van 20-25 micrometer. |
| Groei eigenschappen | Aanhangend |
Documentatie
| Citeren | HaCaT (Cytion catalogusnummer 300493) |
|---|---|
| Bioveiligheidsniveau | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccessie | CVCL_0038 |
| Deposant | DKFZ, Heidelberg |
Genetica van de HaCaT keratinocytencellijn
| Tumorigeen | Geen |
|---|---|
| Karyotype | Aneuploïd (hypotetraploïd) |
Omgaan met de Hacat-cellijn
| Kweekmedium | DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a) |
|---|---|
| Supplementen | Vul het medium aan met 10% FBS |
| Scheidingsreagens | Het 1:1 mengsel van EDTA (voorraad: 0,05%) en trypsine (voorraad: 0,1%) moet telkens vóór het losmaken van de cellen worden bereid met PBS zonder Ca2+ en Mg2+ om een fysiologische osmolariteit te verkrijgen. Kant-en-klare mengsels van trypsine/EDTA worden niet aanbevolen, omdat dit kan leiden tot klontering van cellen. Als alternatief kan TrypLE Express (Life Technologies) in plaats van trypsine/EDTA worden gebruikt. Het protocol van de fabrikant moet worden gevolgd. |
| Verdubbelingstijd | De verdubbelingstijd van HaCaT-cellen is 28 uur. |
| Subcultuur |
|
| Splitsingsverhouding | Een verhouding van 1:5 tot 1:10 wordt aanbevolen |
| Dichtheid zaaien | 1 x 104 cellen/cm2 |
| Vloeistofvernieuwing | 2 keer per week |
| Middel invriezen | Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen. |
| Cellen ontdooien en kweken |
|
| Incubatieatmosfeer | 37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer. |
| Kolfcoating | Voor een optimale hechting en levensvatbaarheid na het ontdooien raden we aan met collageen gecoate kolven of platen te gebruiken. |
| Invriesprocedure | Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats. |
| Verzendvoorwaarden | Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats. |
| Opslagomstandigheden | Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof. |
Kwaliteit
| Steriliteit | Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties. |
|---|---|
| STR profiel |
Amelogenine: x,x
CSF1PO: 9,11
D13S317: 10,12
D16S539: 9,12
D5S818: 12
D7S820: 9,11
TH01: 9.3
TPOX: 11,12
vWA: 16,17
D3S1358: 16
D21S11: 28,30.2
D18S51: 12
Penta E: 7,12
Penta D: 11,13
D8S1179: 14
FGA: 24
D1S1656: 11,12
D2S1338: 17,25
D12S391: 18,23
D19S433: 13,14
|
| HLA-allelen |
A*: '31:01:02
B*: '40:01:02, '51:01:01
C*: '03:04:01, '15:02:01
DRB1*: '04:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '03:01:01, '06:02:01
DPB1*: '03:01:01, '04:01:01
E: '01:03:01, '01:03:02
|
Certificaat van Analyse (CoA)
| Kavelnummer | Type certificaat | Datum | Catalogusnummer |
|---|---|---|---|
| 300493-250324 | Certificaat van Analyse | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190723 | Certificaat van Analyse | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190124 | Certificaat van Analyse | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225SF | Certificaat van Analyse | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225 | Certificaat van Analyse | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-040424 | Certificaat van Analyse | 23. May. 2025 | 300493 |