HUVEC, één donor
Algemene informatie
Beschrijving | Humane navelstreng-endotheelcellen (HUVEC's) zijn primaire cellen afkomstig van de endotheellaag van aderen in de menselijke navelstreng. HUVECs zijn een centraal model in vasculair biologisch onderzoek vanwege hun vermogen om veel aspecten van de biologie van endotheelcellen in vivo na te bootsen. Deze cellen worden uitgebreid gebruikt om endotheelfuncties te bestuderen, waaronder angiogenese, ontsteking en mechanismen van vasculaire permeabiliteit. HUVECs vertonen verschillende cruciale endotheelmarkers, zoals von Willebrand factor, CD31 en endotheliaal stikstofoxidesynthase (eNOS), wat hun endotheliale oorsprong en functionaliteit bevestigt. Ze zijn ook in staat buisachtige structuren te vormen wanneer ze gekweekt worden op Matrigel, wat hun potentieel voor angiogenesestudies aantoont. Het vermogen van HUVECs om te reageren op cytokinen en groeifactoren maakt ze een uitstekend systeem voor het onderzoeken van cellulaire reacties die geassocieerd worden met vaatziekten zoals atherosclerose, hypertensie en trombose. Bovendien kan hun reactie op schuifspanning bestudeerd worden in dynamische stromingsmodellen, wat inzicht geeft in de effecten van bloedstroming op endotheelgedrag. In farmacologisch onderzoek worden HUVECs vaak gebruikt om de werkzaamheid en toxiciteit van vasculaire doelwitten te evalueren. Door hun eenvoudige isolatie en relatief eenvoudige kweek zijn ze een waardevol hulpmiddel voor zowel academisch onderzoek als farmaceutische ontwikkeling. Deze eigenschappen onderstrepen het belang van HUVECs voor een beter begrip van vasculaire gezondheid en ziekte. |
---|---|
Organisme | Mens |
Weefsel | Navelstrengader |
Toepassingen | Humane navelstreng-endotheelcellen (HUVEC's) worden veel gebruikt in verschillende biomedische onderzoeksgebieden omdat ze snel kunnen woekeren en differentiëren in verschillende soorten endotheelcellen, die bloedvaten bekleden. HUVECs hebben veel onderzoeks- en medicijnontdekkingstoepassingen, waaronder wondgenezing, angiogenese, weefselmanipulatie, ontsteking, oncologie, farmacologie, vasculaire modellering en transfectie. |
Synoniemen | Humane navelstreng-endotheelcellen |
Kenmerken
Etniciteit | Kaukasisch |
---|---|
Morfologie | Endotheel |
Celtype | Primaire cellen |
Groei eigenschappen | Monolaag, adherent |
Identificatiemiddelen / Bioveiligheid / Citeren
Citeren | HUVEC, samengevoegd (Cytion catalogusnummer 300605) |
---|---|
Bioveiligheidsniveau | 1 |
Expressie / Mutatie
Eiwitexpressie | Cytoplasmatisch VWF/Factor VIII > 95% positief door immunofluorescentie. Cytoplasmatische opname van Di-I-Ac-LDL > 95% positief door immunofluorescentie. Cytoplasmatisch PECAM1 > 95% positief door immunofluorescentie |
---|---|
Virussen | Negatief voor HIV-1, HBV en HCV |
Omgaan met
Kweekmedium | Endotheelcelgroeimedium (Cytion artikelnummer 820731) |
---|---|
Oplossing voor passeren | Accutase |
Subcultuur | Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten. |
Splitsingsverhouding | Een verhouding van 1:2 tot 1:4 wordt aanbevolen |
Vloeistofvernieuwing | Om de 2 tot 3 dagen |
Middel invriezen | CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100) of CM-ACF (Cytion catalogusnummer 806100) |
Behandeling van gecryopreserveerde culturen |
|
Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA
Steriliteit | Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties. |
---|
Geschikte producten
In biologisch onderzoek is de cryopreservatie van cellen van zoogdieren een hulpmiddel van onschatbare waarde. Succesvolle preservatie van cellen is een topprioriteit, aangezien het verlies van een cellijn door contaminatie of onjuiste opslagomstandigheden leidt tot tijd
- en geldverlies en uiteindelijk tot vertraging van onderzoeksresultaten. Zodra de cellen zijn overgebracht van een celgroeimedium naar een vriesmedium, worden de cellen meestal op een gereguleerde snelheid ingevroren en opgeslagen in vloeibare stikstofdamp of bij minder dan -130°C in een mechanische diepvriezer. Het invriesmedium CM-1 maakt cryopreservatie van cellen bij temperaturen onder -130°C (of in vloeibare stikstof) mogelijk, waardoor er in wezen geen extra, dure ultralage vriezer nodig is en er geen tijdrovende en veeleisende invriesprocessen met gecontroleerde snelheid meer nodig zijn. Verzamel de cellen, zuig het groeimedium op, resuspendeer in CM-1, breng ze over in een cryoflacon en bewaar de flacon bij temperaturen onder -130 °C.
Lange houdbaarheid
CM-1 is een serumbevattend, gebruiksklaar cryoconserveringsmedium dat tot een jaar in de koelkast kan worden bewaard.
Vertrouwd door honderden onderzoekers
Ons geavanceerde celvriesmedium CM-1 is een marktleider in Duitsland en Europa en onderscheidt zich door talrijke publicaties met honderden verschillende cellijnen wereldwijd. We hebben het getest met meer dan 1000 cellijnen uit onze eigen celbank.
Geoptimaliseerde ingrediënten
CM-1 bevat geen serumproducten. Serumbevattende cryoconserveringsmediums beschermen de cellen optimaal tijdens het invriezen en hebben het voordeel van hoge recovery rates. Aangezien CM-1 is getest met een groot aantal cellijnen, kun je er zeker van zijn dat je cellen altijd goed herstellen.
Bevat FBS, DMSO, glucose, zouten
Buffercapaciteit pH = 7,2 tot 7,6
Toepassingen en validatie
De cellen die bewaard worden in ons CM-1 vriesmedium kunnen gebruikt worden voor celtelling, levensvatbaarheid en cryopreservatie, celkweek, zoogdiercelcultuur, genexpressieanalyse en genotypering, in vitro transcriptie en polymerasekettingreacties. De werkzaamheid van elke batch wordt geëvalueerd met CHO-K1-cellen. Elke batch wordt getest op pH, osmolaliteit, steriliteit en endotoxinen om een hoge kwaliteit te garanderen.
In biologisch onderzoek is de cryopreservatie van cellen van zoogdieren een hulpmiddel van onschatbare waarde. Succesvolle preservatie van cellen is een topprioriteit, aangezien het verlies van een cellijn door contaminatie of onjuiste opslagomstandigheden leidt tot tijd
- en geldverlies en uiteindelijk tot vertraging van onderzoeksresultaten. Zodra de cellen zijn overgebracht van een celgroeimedium naar een vriesmedium, worden de cellen meestal op een gereguleerde snelheid ingevroren en opgeslagen in vloeibare stikstofdamp of bij minder dan -130°C in een mechanische diepvriezer. Het invriesmedium CM-1 maakt cryopreservatie van cellen bij temperaturen onder -130°C (of in vloeibare stikstof) mogelijk, waardoor er in wezen geen extra, dure ultralage vriezer nodig is en er geen tijdrovende en veeleisende invriesprocessen met gecontroleerde snelheid meer nodig zijn. Verzamel de cellen, zuig het groeimedium op, resuspendeer in CM-1, breng ze over in een cryoflacon en bewaar de flacon bij temperaturen onder -130 °C.
Lange houdbaarheid
CM-1 is een serumbevattend, gebruiksklaar cryoconserveringsmedium dat tot een jaar in de koelkast kan worden bewaard.
Vertrouwd door honderden onderzoekers
Ons geavanceerde celvriesmedium CM-1 is een marktleider in Duitsland en Europa en onderscheidt zich door talrijke publicaties met honderden verschillende cellijnen wereldwijd. We hebben het getest met meer dan 1000 cellijnen uit onze eigen celbank.
Geoptimaliseerde ingrediënten
CM-1 bevat geen serumproducten. Serumbevattende cryoconserveringsmediums beschermen de cellen optimaal tijdens het invriezen en hebben het voordeel van hoge recovery rates. Aangezien CM-1 is getest met een groot aantal cellijnen, kun je er zeker van zijn dat je cellen altijd goed herstellen.
Bevat FBS, DMSO, glucose, zouten
Buffercapaciteit pH = 7,2 tot 7,6
Toepassingen en validatie
De cellen die bewaard worden in ons CM-1 vriesmedium kunnen gebruikt worden voor celtelling, levensvatbaarheid en cryopreservatie, celkweek, zoogdiercelcultuur, genexpressieanalyse en genotypering, in vitro transcriptie en polymerasekettingreacties. De werkzaamheid van elke batch wordt geëvalueerd met CHO-K1-cellen. Elke batch wordt getest op pH, osmolaliteit, steriliteit en endotoxinen om een hoge kwaliteit te garanderen.
In biologisch onderzoek is de cryopreservatie van cellen van zoogdieren een hulpmiddel van onschatbare waarde. Succesvolle preservatie van cellen is een topprioriteit, aangezien het verlies van een cellijn door contaminatie of onjuiste opslagomstandigheden leidt tot tijd
- en geldverlies en uiteindelijk tot vertraging van onderzoeksresultaten. Zodra de cellen zijn overgebracht van een celgroeimedium naar een vriesmedium, worden de cellen meestal op een gereguleerde snelheid ingevroren en opgeslagen in vloeibare stikstofdamp of bij minder dan -130°C in een mechanische diepvriezer. Het invriesmedium CM-1 maakt cryopreservatie van cellen bij temperaturen onder -130°C (of in vloeibare stikstof) mogelijk, waardoor er in wezen geen extra, dure ultralage vriezer nodig is en er geen tijdrovende en veeleisende invriesprocessen met gecontroleerde snelheid meer nodig zijn. Verzamel de cellen, zuig het groeimedium op, resuspendeer in CM-1, breng ze over in een cryoflacon en bewaar de flacon bij temperaturen onder -130 °C.
Lange houdbaarheid
CM-1 is een serumbevattend, gebruiksklaar cryoconserveringsmedium dat tot een jaar in de koelkast kan worden bewaard.
Vertrouwd door honderden onderzoekers
Ons geavanceerde celvriesmedium CM-1 is een marktleider in Duitsland en Europa en onderscheidt zich door talrijke publicaties met honderden verschillende cellijnen wereldwijd. We hebben het getest met meer dan 1000 cellijnen uit onze eigen celbank.
Geoptimaliseerde ingrediënten
CM-1 bevat geen serumproducten. Serumbevattende cryoconserveringsmediums beschermen de cellen optimaal tijdens het invriezen en hebben het voordeel van hoge recovery rates. Aangezien CM-1 is getest met een groot aantal cellijnen, kun je er zeker van zijn dat je cellen altijd goed herstellen.
Bevat FBS, DMSO, glucose, zouten
Buffercapaciteit pH = 7,2 tot 7,6
Toepassingen en validatie
De cellen die bewaard worden in ons CM-1 vriesmedium kunnen gebruikt worden voor celtelling, levensvatbaarheid en cryopreservatie, celkweek, zoogdiercelcultuur, genexpressieanalyse en genotypering, in vitro transcriptie en polymerasekettingreacties. De werkzaamheid van elke batch wordt geëvalueerd met CHO-K1-cellen. Elke batch wordt getest op pH, osmolaliteit, steriliteit en endotoxinen om een hoge kwaliteit te garanderen.
- een zacht alternatief voor trypsine
Accutase is een oplossing voor celdissociatie die een revolutie teweegbrengt in de celkweekindustrie. Het is een mix van proteolytische en collagenolytische enzymen die de werking van trypsine en collagenase nabootst. In tegenstelling tot trypsine bevat Accutase geen zoogdier
- of bacteriële componenten en is het veel zachter voor cellen, waardoor het een ideale oplossing is voor het routinematig losmaken van cellen van standaard weefselkweekplastiek en plastic met adhesiecoating. In deze blogpost verkennen we de voordelen en toepassingen van Accutase en hoe het de celkweekwereld verandert.
Voordelen van Accutase
Accutase heeft verschillende voordelen ten opzichte van traditionele trypsineoplossingen. Ten eerste kan het worden gebruikt wanneer zachte en efficiënte onthechting van een aanhangende cellijn nodig is, waardoor het een directe vervanging is voor trypsine. Ten tweede werkt Accutase uitstekend op embryonale en neuronale stamcellen en is aangetoond dat het de levensvatbaarheid van deze cellen behoudt na passage. Ten derde behoudt Accutase de meeste epitopen voor daaropvolgende flowcytometrie-analyse, waardoor het ideaal is voor celoppervlakmarkeranalyse.
Bovendien hoeft Accutase niet te worden geneutraliseerd wanneer adherente cellen worden gepasseerd. De toevoeging van meer media nadat de cellen zijn gesplitst, verdunt Accutase zodat het niet langer in staat is om cellen los te maken. Hierdoor is er geen inactiveringsstap nodig en besparen celkweektechnici tijd. Tot slot hoeft Accutase niet te worden gealiquoteerd en is een flesje 2 maanden stabiel in de koelkast.
Toepassingen van Accutase
Accutase is een directe vervanging voor trypsine-oplossing en kan worden gebruikt voor het passeren van cellijnen. Daarnaast presteert Accutase goed bij het losmaken van cellen voor de analyse van veel celoppervlakmarkers met flowcytometrie en voor celsortering. Andere downstreamtoepassingen van de behandeling met Accutase zijn analyse van celoppervlakmarkers, virusgroeitests, celproliferatie, migratie van tumorcellen, routinematige celpassage, opschalen van de productie (bioreactor) en flowcytometrie.
Samenstelling van Accutase
Accutase bevat geen zoogdier
- of bacteriële componenten en is een natuurlijk enzymmengsel met proteolytische en collagenolytische enzymactiviteit. Het is geformuleerd in een veel lagere concentratie dan trypsine en collagenase, waardoor het minder giftig en zachter is, maar net zo effectief.
Werkzaamheid van Accutase
Het is aangetoond dat Accutase efficiënt is in het losmaken van primaire en stamcellen en een hoge levensvatbaarheid van de cellen behoudt in vergelijking met enzymen van dierlijke oorsprong zoals trypsine. 100% van de cellen is na 10 minuten hersteld en het kan geen kwaad om cellen tot 45 minuten in Accutase te laten, dankzij de autodigestie van Accutase.
Samengevat
Samengevat is Accutase een krachtige oplossing die het spel in de celkweek verandert. Met zijn zachte aard, efficiëntie en veelzijdigheid is Accutase het ideale alternatief voor trypsine. Als u op zoek bent naar een betrouwbare en efficiënte oplossing voor het losmaken van cellen, dan is Accutase de oplossing voor u.
Fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) is een veelzijdige bufferoplossing die wordt gebruikt in veel biologische en chemische toepassingen en bij weefselverwerking. Onze PBS-oplossing is geformuleerd met ingrediënten van hoge kwaliteit om een constante pH te garanderen tijdens experimenten. De osmolariteit en ionenconcentraties van onze PBS-oplossing zijn afgestemd op die van het menselijk lichaam, waardoor het isotoon is en niet giftig voor de meeste cellen.
Samenstelling van onze PBS-oplossing
Onze PBS-oplossing is een op pH aangepast mengsel van ultrazuivere fosfaatbuffers en zoutoplossingen. Bij een 1X werkconcentratie bevat het 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 8 mM Na2HPO4 en 2 mM KH2PO4. We hebben deze samenstelling gekozen op basis van CSHL protocollen en Molecular cloning by Sambrook, wat gevestigde standaarden zijn in de onderzoeksgemeenschap.
Toepassingen van onze PBS-oplossing
Onze PBS-oplossing is ideaal voor een breed scala aan toepassingen in biologisch onderzoek. De isotone en niet-toxische eigenschappen maken het perfect voor het verdunnen van stoffen en het spoelen van celcontainers. Onze PBS-oplossing met EDTA kan ook gebruikt worden om vastzittende en samengeklonterde cellen los te maken. Het is echter belangrijk op te merken dat tweewaardige metalen zoals zink niet aan PBS kunnen worden toegevoegd, omdat dit tot precipitatie kan leiden. In dergelijke gevallen worden Good's buffers aanbevolen. Bovendien is aangetoond dat onze PBS-oplossing een aanvaardbaar alternatief is voor virale transportmedia voor het transport en de opslag van RNA-virussen, zoals SARS-CoV-2.
Opslag van onze PBS-oplossing
Onze PBS-oplossing kan worden bewaard bij kamertemperatuur, waardoor het gemakkelijk te gebruiken en te gebruiken is.
Samengevat
Samengevat is onze PBS-oplossing een essentieel onderdeel van veel biologische en chemische experimenten. De isotone en niet-toxische eigenschappen maken het geschikt voor talloze toepassingen, van celkweek tot virale transportmedium. Door te kiezen voor onze PBS-oplossing van hoge kwaliteit kunnen onderzoekers hun experimenten optimaliseren en nauwkeurige en betrouwbare resultaten garanderen.
Samenstelling
Bestanddelen
mg/L
Anorganische zouten
Kaliumchloride
200,00
Kaliumdiwaterstoffosfaat
200,00
Natriumchloride
8,000.00
natriumwaterstoffosfaat watervrij
1,150.00
- en onderhoudsfase.
Definitie van endotheelcel groeimedium
Een in vitro celkweeksysteem heeft een bepaalde oplossing nodig die Endothelial Cell Growth Media wordt genoemd om de endotheelcellen die nodig zijn voor het experiment in stand te houden. Endotheelcellen in het lichaam worden blootgesteld aan een omgeving die wordt nagebootst door het medium, inclusief noodzakelijke en niet-essentiële aminozuren, vitaminen, hormonen, groeifactoren en sporenmineralen. Deze nutriëntrijke vloeistof is essentieel voor het behoud van het fenotype en de functie van het endotheel omdat het de celproliferatie stimuleert. Wereldwijd vertrouwen onderzoekers en wetenschappers op het CLS Endothelial Cell Growth Medium omdat het zowel effectief als eenvoudig is.
Belang van onderzoek naar endotheelcellen
Het aanleggen van bloedvaten, het regelen van de bloeddruk en wondgenezing zijn slechts enkele fysiologische processen waarin endotheelcellen een sleutelrol spelen. Om de bloedvaten in balans te houden, kunnen deze cellen reageren op chemische en mechanische prikkels. Om de oorzaken van hypertensie, atherosclerose en trombose volledig te begrijpen, is onderzoek naar endotheelcellen cruciaal. Onderzoek naar endotheelcellen kan ook licht werpen op de medische behandeling van deze ziekten. Het CLS Endothelial Cell Growth Medium, dat een stabiele en uniforme omgeving biedt voor de ontwikkeling en proliferatie van endotheelcellen, is een onmisbaar hulpmiddel gebleken bij dit soort onderzoek.
Kwaliteitsgarantie
Hoogwaardige in-vitro celkweekmedia zijn essentieel voor het verkrijgen van consistente en herhaalbare resultaten. Kwaliteitscontrole testen worden uitgevoerd op elke CLS Endothelial Cell Growth Media batch om de uniformiteit en effectiviteit te garanderen. De steriliteit, afwezigheid van mycoplasma en bacteriën, en pH-niveaus van elke batch worden onderzocht. Om een gezonde celontwikkeling en -proliferatie te bevorderen, wordt de pH van het medium op 7,2 +/
- 0,02 gehouden en wordt de temperatuur tussen 20 en 25 graden Celsius gehouden. Om er zeker van te zijn dat de kweek vrij is van verontreiniging die de nauwkeurigheid van de bevindingen zou kunnen beïnvloeden, wordt het medium ook gecontroleerd op microbiologische verontreinigingen zoals schimmels, bacteriën en mycoplasma.
Onderhoud en disclaimer
De houdbaarheidsdatum van CLS Endothelial Cell Growth Media is zes weken na de productiedatum. Het medium moet worden bewaard bij een temperatuur tussen +2°C en +8°C, uit de buurt van licht, en mag nooit worden ingevroren of verwarmd boven 37°C om de kwaliteit te behouden. In het verlengde hiervan is het cruciaal om magnetrons en andere ongereguleerde warmtebronnen die de integriteit van het product in gevaar kunnen brengen, te vermijden. Een deel van het medium kan uit de verpakking worden gehaald en op kamertemperatuur worden gebracht als slechts een kleine hoeveelheid wordt gebruikt. CLS Endothelial Cell Growth Medium is een beproefde en betrouwbare methode voor het kweken van endotheelcellen vanwege de strenge kwaliteitscontroles die worden gebruikt bij de productie.
Het CLS groeimedium voor endotheelcellen is niet bedoeld voor klinisch of diagnostisch gebruik; het is primair ontworpen voor in vitro gebruik. Het verkrijgen van nauwkeurige en betrouwbare resultaten uit het medium vereist strikte naleving van de richtlijnen en kwaliteitscontrolemethoden van de fabrikant.
Toepassingen van het medium
Het CLS Endothelial Cell Growth Medium heeft zijn nut bewezen in verschillende biologische studies. Aangezien dit medium kan worden gebruikt om endotheelcellen te kweken, kan het worden gebruikt om de endotheelfunctie en -functiestoornissen in orgaansystemen in vitro te simuleren. Dit is vooral nuttig voor het bestuderen van de bloed-hersenbarrière of weefselengineered bloedvaten. Dit is essentieel om ziekteprocessen te begrijpen en effectieve behandelingen te ontwikkelen.
Endotheelcellen, vooral HUVEC-cellen, worden veel gebruikt in angiogenese-onderzoek, wondgenezingsonderzoek en kankeronderzoek, dus het medium is ook aangepast om hun proliferatie te bevorderen. Nauwkeurige en herhaalbare resultaten zijn afhankelijk van de consistentie en hoge kwaliteit van het medium dat wordt gebruikt om deze cellen te ontwikkelen, en de CLS Endothelial Cell Growth Media voldoet aan beide eisen.