E11 Cellen

€ 800,00*

De producten worden bevroren verzonden in cryobuisjes met droogijs. Elk cryobuisje bevat doorgaans 3 × 10 ⁶ cellen voor hechtende lijnen of 5 × 10⁶ cellen voor suspensielijnen (zie het batch-CoA voor meer informatie).

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

Niet meer beschikbaar

Productnummer: 400494

Veiligheidsinformatieblad

Productblad

Certificaat van Analyse (CoA)

Overeenkomst met derden

Beschrijving	De E11-cellijn is een zeer gespecialiseerde muriene cellijn die is ontwikkeld voor geavanceerd onderzoek naar de podocytenfunctie en mechanismen van nieraandoeningen. De E11 cellen zijn afgeleid van de glomeruli van transgene muizen die een temperatuursgevoelige variant van het SV40 groot T-antigeen tot expressie brengen. Ze werken onder de regulatie van de IFN-g-induceerbare H-2kb promotor. Dit unieke genetische kader vergemakkelijkt de conditionele proliferatie van de cellen, afhankelijk van de omgevingstemperatuur, wat overeenkomt met de gecontroleerde expressie van het T-antigeen. Een van de onderscheidende kenmerken van de E11 cellijn is de fenotypische stabiliteit bij uitgebreide passaging. E11-cellen hebben een consistente expressie en cellulaire karakteristieken gedurende meer dan 40 passages en zijn daardoor van onschatbare waarde gebleken voor langetermijnstudies zonder het veelvoorkomende probleem van fenotypische drift dat bij veel gekweekte cellijnen optreedt. Deze stabiliteit verbetert hun gebruik in herhaalde en uitgebreide biologische experimenten die consistent celgedrag vereisen. Op het gebied van eiwitexpressie vertoont de E11 cellijn een robuust profiel dat essentieel is voor podocyt-specifieke studies. De cellen brengen consequent nephrine tot expressie, een essentieel onderdeel van de spleetmembraanstructuur in podocyten, naast een verscheidenheid aan andere podocyt-specifieke eiwitten zoals podocine, CD2AP en synaptopodine. Deze uitgebreide eiwitexpressie vergemakkelijkt de studie van podocytenbiologie in een gecontroleerde in vitro omgeving, die de omstandigheden in vivo nauwkeurig nabootst. Het vermogen van E11 cellen om uitgebreide cel-cel contacten te vormen onderstreept verder hun geschiktheid voor het modelleren van nierfiltratie barrière functionaliteiten.
Organisme	Muis
Weefsel	Nieren

Ras/soort	(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58)
Leeftijd	Volwassen
Geslacht	Ongespecificeerd
Celtype	Podocyten
Groei eigenschappen	Aanhangend

Citeren	E11 (Cytion catalogusnummer 400494)
Bioveiligheidsniveau	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccessie	CVCL_5737
GGO-status	GMO-S1: Deze Immorto-muispodocytenlijn bevat een temperatuurgevoelig SV40 T-antigeenconstruct dat voorwaardelijke immortalisatie mogelijk maakt. Deze classificatie is alleen van toepassing binnen Duitsland en kan elders afwijken.

Eiwitexpressie	WT1, Lmx1b, nephrin, NEPHI, FAT, P-cadherine, CD2AP, ZO-I, podocalyxine, podoplanine, synpo, podocine, TRPC6 en GAPDH.

Kweekmedium	RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Supplementen	Vul het medium aan met 10% FBS
Scheidingsreagens	Accutase
Subcultuur	Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding	Een verhouding van 1:3 of 1:5 (bij 33 graden Celsius) wordt aanbevolen Onder differentiatieomstandigheden, dat wil zeggen incubatie van niet tot confluente culturen bij 38 graden Celsius, stopt de celproliferatie binnen de eerste twee weken en na ongeveer vier weken
Dichtheid zaaien	Inoculeer T75-celkweekflessen met 1x 10⁴ cellen/cm² voor het proliferatieproces. Houd de cellen op 33 graden Celsius / 5% CO₂, totdat de fles voor ongeveer 75% confluent is.
Vloeistofvernieuwing	2 tot 3 keer per week
Middel invriezen	Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Cellen ontdooien en kweken	Controleer of de flacon bij levering diepgevroren blijft, aangezien de cellen op droog ijs worden verzonden om optimale temperaturen tijdens het transport te behouden. Bewaar het cryoflesje na ontvangst onmiddellijk bij temperaturen lager dan -150 °C om de integriteit van de cellen te behouden, of ga verder met stap 3 als onmiddellijke kweek vereist is. Voor onmiddellijke kweek: ontdooi de flacon snel door deze onder te dompelen in een waterbad van 37 °C met schoon water en een antimicrobieel middel, waarbij u 40-60 seconden zachtjes schudt totdat er een klein ijsklontje overblijft. Voer alle volgende stappen uit onder steriele omstandigheden in een stromingskap en desinfecteer de cryoflacon met 70% ethanol voordat deze wordt geopend. Open voorzichtig de gedesinfecteerde flacon en breng de celsuspensie over in een centrifugebuis van 15 ml met 8 ml kweekmedium op kamertemperatuur en meng voorzichtig. Centrifugeer het mengsel gedurende 3 minuten bij 300 x g om de cellen te scheiden en gooi het supernatant met resterend vriesmedium voorzichtig weg. Resuspendeer de celpellet voorzichtig in 10 ml vers kweekmedium. Verdeel voor adherente cellen de suspensie over twee T25-kweekkolven; breng voor suspensiekweken al het medium over in één T25-kweekkolf om effectieve celinteractie en -groei te bevorderen. Houd u aan de vastgestelde subcultuurprotocollen voor continue groei en onderhoud van de cellijn, om betrouwbare experimentele resultaten te garanderen.
Incubatieatmosfeer	33°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.
Kolfcoating	Geen
Invriesprocedure	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Verzendvoorwaarden	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Opslagomstandigheden	Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Steriliteit	Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kavelnummer	Type certificaat	Datum	Catalogusnummer
400494-1014SF	Certificaat van Analyse	23. May. 2025	400494

Houd er rekening mee dat deze cellijn niet beschikbaar is onder een standaard MTA van Cytion, omdat hiervoor een overeenkomst met een derde partij nodig is en/of er moet worden onderhandeld met de oorspronkelijke licentiegever.

E11 Cellen

Algemene informatie

Kenmerken

Regelgevende gegevens

Biomoleculaire gegevens

Omgaan met

Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA

Certificaat van Analyse (CoA)

Overeenkomst met derden