CTX-cellen

CTX (ook aangeduid als CTX0E03) is een voorwaardelijk onsterfelijk gemaakte menselijke neurale stamcellijn, afkomstig van het corticale neuro-epitheel van een menselijke foetus in het eerste trimester. De lijn is gegenereerd door retrovirale integratie van een c-mycER^TAM-fusietransgen, dat celproliferatie alleen stimuleert in aanwezigheid van 4-hydroxytamoxifen (4-OHT). Bij afwezigheid van 4-OHT en in mitogeenvrij medium ondergaan CTX0E03-cellen een groeistilstand en differentiëren ze zich tot neuronen en astrocyten, waarbij ze hun multipotente differentiatievermogen behouden. De lijn is klonaal, heeft een normaal menselijk karyotype (46,XY) en is ontwikkeld onder GMP-conforme omstandigheden met het oog op mogelijke klinische toepassing.

CTX0E03 is geëvalueerd in preklinische modellen van ischemische beroerte (MCAo-ratmodel), waarbij geïmplanteerde cellen een aanzienlijk herstel van de sensomotorische functie bevorderden. De lijn is in klinische proeven voor beroertebehandeling opgenomen. Ze wordt ook gebruikt als in-vitro-model voor neurale stamcelbiologie, differentiatie van corticale neuronen, onderzoek naar de ziekte van Alzheimer (Abeta-toxiciteitsstudies) en neurofarmacologische screening. Het voorwaardelijke onsterfelijkmakingssysteem maakt CTX0E03 bijzonder geschikt voor veiligheids- en werkzaamheidsstudies, aangezien de proliferatie kan worden uitgeschakeld door 4-OHT vóór de transplantatie te verwijderen.

CTX0E03 wordt gekweekt in DMEM/F12, aangevuld met N2-supplement, EGF (20 ng/ml) en FGF-2 (20 ng/ml) met 4-OHT (1 μM) op met laminine gecoate oppervlakken bij 37 °C in 5% CO₂. Voor differentiatie worden de groeifactoren en 4-OHT verwijderd. De lijn is ingedeeld in bioveiligheidsniveau 1 (GMO-S1 in Duitsland vanwege het geïntegreerde c-mycERTAM-transgen). Gebruikers dienen zich te houden aan de geldende GGO-voorschriften in hun rechtsgebied.