CHO-PD-L1-cellen

€ 1.900,00*

De producten worden bevroren verzonden in cryobuisjes met droogijs. Elk cryobuisje bevat doorgaans 3 × 10 ⁶ cellen voor hechtende lijnen of 5 × 10⁶ cellen voor suspensielijnen (zie het batch-CoA voor meer informatie).

Prijzen excl. btw plus verzendkosten

cryovial

Productnummer: 305975

Veiligheidsinformatieblad

Productblad

Overeenkomst met derden

Beschrijving	Disclaimer: De weergegeven prijzen voor cellijnen gelden uitsluitend voor academische/non-profitklanten. Voor commerciële entiteiten bedraagt de prijs ongeveer € 6.250. Als u een commerciële entiteit vertegenwoordigt of niet zeker weet tot welke categorie u behoort, neem dan contact met ons op. CHO-PD-L1-cellen zijn recombinante Chinese hamster-ovariumcellen (CHO-cellen) die zijn gemodificeerd om op stabiele wijze humaan programmed death-ligand 1 (PD-L1; CD274/B7-H1) tot expressie te brengen, een immuuncheckpointligand die een centrale rol speelt bij de onderdrukking van door T-cellen gemedieerde immuunreacties. PD-L1 is een type I-transmembraaneiwit dat voornamelijk een interactie aangaat met het geprogrammeerde celdood-eiwit 1 (PD-1/CD279) op geactiveerde immuuncellen, wat leidt tot remming van de proliferatie van T-cellen, de productie van cytokines en cytotoxische activiteit. Afwijkende PD-L1-expressie is een veelvoorkomend mechanisme van immuunontwijking bij meerdere solide tumoren en hematologische maligniteiten, waardoor PD-L1-expresserende recombinante celmodellen zeer relevant zijn voor immuno-oncologisch onderzoek en de ontwikkeling van therapieën. CHO-PD-L1-cellen worden op grote schaal gebruikt voor de ontwikkeling en karakterisering van immuuncheckpointremmers, waaronder monoklonale antilichamen, bispecifieke antilichamen, fusie-eiwitten en gemanipuleerde celtherapieën die gericht zijn op de PD-1/PD-L1-signaalas. De stabiele en gecontroleerde expressie van PD-L1 maakt kwantitatieve evaluatie mogelijk van de bindingsaffiniteit van antilichamen, receptorbezetting, blokkerende activiteit, internalisatie en de kinetica van de ligand-receptorinteractie. Deze cellen zijn ook geschikt voor de ontwikkeling van flowcytometrie-assays, reporterbioassays, T-celactiveringsstudies en high-throughput screeningplatforms die zijn ontworpen om de werkzaamheid van checkpointblokkade of de vorming van immuunsynapsen te beoordelen. Omdat CHO-cellen een robuust expressiesysteem met een relatief lage achtergrond bieden, worden ze vaak geselecteerd voor het genereren van gestandaardiseerde assays en toepassingen voor biologische kwaliteitscontrole.
Organisme	Chinese hamster
Weefsel	Eierstok
Ziekte	Eierstokcellen van de Chinese hamster, niet-neoplastisch; genetisch gemodificeerd voor PD-L1 (CD274/B7-H1)-oppervlakte-expressie
Toepassingen	Antilichaamscreening; ontwikkeling van op PD-L1 gerichte immuuntherapie; onderzoek naar checkpointremmers; onderzoek naar immuunontwijking door tumoren; flowcytometrie

Leeftijd	Volwassen
Geslacht	Vrouw
Morfologie	Epitheelachtig
Celtype	Epitheelcellen
Groei eigenschappen	Hechting/suspensie

Citeren	CHO-PD-L1 (Cytion-catalogusnummer 305975)
Bioveiligheidsniveau	1
NCBI_TaxID	10029
CellosaurusAccessie	CVCL_A8X1
GGO-status	GMO-S1: Deze CHO-cellijn bevat een CD274-expressiecassette die analyses van de receptorfunctie mogelijk maakt. Deze classificatie geldt uitsluitend binnen Duitsland en kan elders afwijken.

Oppervlakte antigenen	PD-L1 (CD274/B7-H1)
Uitgedrukte receptoren	PD-1/CD279

Kweekmedium	Voor adherente culturen: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a) Voor suspensieculturen: CHO Growth Medium A (van InSCREENeX; InSCREENeX catalogusnummer INS-ME-1039)
Supplementen	Voor adherente culturen: Vul het medium aan met 5% FBS. Geneticine (G418-Sulfat) toevoegen tot een eindconcentratie van 0,5 mg/ml.
Scheidingsreagens	Voor adherente culturen: Trypsine-EDTA
Verdubbelingstijd	ongeveer 14-16 uur
Subcultuur	Voor routinematige adherente celkweek: Zuig het oude kweekmedium van de adherente cellen af en was ze met PBS om eventueel achtergebleven medium te verwijderen. Voeg na het opzuigen van de PBS het juiste volume trypsine/EDTA-oplossing toe op basis van de grootte van het kweekvat (bijv. 1 ml voor een T25-kolf, 3 ml voor een T75-kolf) en incubeer bij kamertemperatuur of 37 °C gedurende 5-10 minuten, of totdat de cellen loskomen. Controleer de onthechting onder een microscoop en tik zo nodig voorzichtig op het vat om de cellen los te maken. Voeg na het losmaken volledig medium toe om de trypsine/EDTA te inactiveren, resuspendeer de cellen voorzichtig en breng een aliquot van de celsuspensie over in een nieuw kweekvat met vers medium. Plaats het kweekvat in een incubator die is ingesteld op 37°C met 5%_CO2 en ververs het medium elke 2-3 dagen.
Splitsingsverhouding	1 tot en met 5
Dichtheid zaaien	2 tot 5 x 10⁴ cellen/cm²
Vloeistofvernieuwing	2 tot 3 keer per week
Herstel na de dooi	Splits de cellen na het ontdooien in een verhouding van 1:2 tot 1:3 in T25-flesjes en laat de cellen minstens 24 uur bijkomen van het vriesproces en zich hechten (voor adherente culturen).
Middel invriezen	Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Cellen ontdooien en kweken	Controleer of de flacon bij levering diepgevroren blijft, aangezien de cellen op droog ijs worden verzonden om optimale temperaturen tijdens het transport te behouden. Bewaar het cryoflesje na ontvangst onmiddellijk bij temperaturen lager dan -150 °C om de integriteit van de cellen te behouden, of ga verder met stap 3 als onmiddellijke kweek vereist is. Voor onmiddellijke kweek: ontdooi de flacon snel door deze onder te dompelen in een waterbad van 37 °C met schoon water en een antimicrobieel middel, waarbij u 40-60 seconden zachtjes schudt totdat er een klein ijsklontje overblijft. Voer alle volgende stappen uit onder steriele omstandigheden in een stromingskap en desinfecteer de cryoflacon met 70% ethanol voordat deze wordt geopend. Open voorzichtig de gedesinfecteerde flacon en breng de celsuspensie over in een centrifugebuis van 15 ml met 8 ml kweekmedium op kamertemperatuur en meng voorzichtig. Centrifugeer het mengsel gedurende 3 minuten bij 300 x g om de cellen te scheiden en gooi het supernatant met resterend vriesmedium voorzichtig weg. Resuspendeer de celpellet voorzichtig in 10 ml vers kweekmedium. Verdeel voor adherente cellen de suspensie over twee T25-kweekkolven; breng voor suspensiekweken al het medium over in één T25-kweekkolf om effectieve celinteractie en -groei te bevorderen. Houd u aan de vastgestelde subcultuurprotocollen voor continue groei en onderhoud van de cellijn, om betrouwbare experimentele resultaten te garanderen.
Incubatieatmosfeer	37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.
Verzendvoorwaarden	Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
Opslagomstandigheden	Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Steriliteit	Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Houd er rekening mee dat deze cellijn niet beschikbaar is onder een standaard MTA van Cytion, omdat hiervoor een overeenkomst met een derde partij nodig is en/of er moet worden onderhandeld met de oorspronkelijke licentiegever.

CHO-PD-L1-cellen

Algemene informatie

Kenmerken

Regelgevende gegevens

Biomoleculaire gegevens

Omgaan met

Kwaliteitscontrole / Genetisch profiel / HLA

Overeenkomst met derden