Wilms3 ląstelės
800,00 €*
Produktai yra siunčiami užšaldyti sausojo ledo kriotubose. Kiekvienoje kriotuboje paprastai yra 3 × 10 6 ląstelių adhezyvinių linijų atveju arba 5 × 106 ląstelių suspensijos linijų atveju (išsami informacija pateikta partijos CoA).
Bendra informacija
| Aprašymas | Wilms3 ląstelių linija buvo sukurta iš pirminio Vilmso naviko, kuris buvo diagnozuotas pediatriniam pacientui ir kuriam buvo būdinga somatinė WT1 mutacija. Skirtingai nuo daugelio kitų Vilmso naviko ląstelių linijų, "Wilms3" turi heterozigotinę WT1 geno mutaciją (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), dėl kurios susidaro sutrumpintas WT1 baltymas. Šis dalinis WT1 funkcijos praradimas yra susijęs su stromos arba mezenchiminio fenotipo navikų vystymusi. Tačiau WT1 mutacija Wilms3 nėra homozigotinė, o tai dar labiau apsunkina tyrimą, nes ji išlaiko tam tikrą WT1 funkciją, kuri gali skirtingai paveikti naviko biologiją, palyginti su ląstelių linijomis, visiškai praradusiomis WT1. Wilms3 taip pat turi CTNNB1 geno mutaciją, ypač pažeidžiančią 41 treoniną (p.T41A), kuris atlieka svarbų vaidmenį Wnt signalų kelyje. Ši mutacija stabilizuoja β-kateniną, neleidžia jam skaidytis ir lemia konstitucinį Wnt kelio aktyvavimą. Nuolatinis Wnt signalo aktyvavimas skatina ląstelių proliferaciją ir prisideda prie Wilms3 navikų susidarymo, todėl šis virusas yra pagrindinis CTNNB1 mutacijų poveikio iš dalies veikiančio WT1 fono kontekste tyrimo modelis. Fenotipiškai Wilms3 ląstelės pasižymi mezenchimine morfologija, jose ekspresuojamas vimentinas ir trūksta citokeratino, o tai atitinka pirminio naviko stromos savybes. Šios ląstelės pasižymi ribotu diferenciacijos potencialu, o tam tikromis sąlygomis gali pereiti tam tikrą mezenchiminę diferenciaciją. Atlikus Wilms3 proteominę analizę paaiškėjo, kad aktyvuotos kelios receptorių tirozino kinazės (RTK), įskaitant PDGFRβ ir AXL, kurios palaiko ląstelių išlikimą ir proliferaciją. Be to, suaktyvėja tolesni signaliniai keliai, tokie kaip MAPK ir PI3K/AKT, todėl sustiprėja piktybinės Wilms3 ląstelių savybės. Išskirtinis Wilms3 aspektas yra dalinis WT1 funkcionalumas, kuris leidžia suprasti, kaip WT1 mutacijos prisideda prie Wilms naviko biologijos, kai mutacija nėra visiška. WT1 ir Wnt signalų sąveika Wilms3 sistemoje suteikia vertingą galimybę ištirti šių kelių niuansų vaidmenį naviko vystymuisi. Apskritai Wilms3 yra svarbus modelis, kuriuo galima tirti molekulinius mechanizmus, lemiančius Wilms naviko atsiradimą, kai yra dalinis WT1 praradimas ir konstitucinis Wnt kelio suaktyvėjimas. |
|---|---|
| Organizmas | Žmogus |
| Audiniai | Inkstai |
| Liga | Vilmso navikas |
| Paraiškos | In vitro ląstelių kultūros modelis. Biocheminiai tyrimai |
Charakteristikos
| Amžius | 11-12 mėnesių |
|---|---|
| Lytis | Vyras |
| Etniškumas | Kaukaziečių |
| Morfologija | Verpstės formos |
| Ląstelės tipas | Vilmso ląstelės |
| Augimo savybės | Prigludęs |
Reguliavimo duomenys
| Citavimas | Wilms3 (Cytion katalogo numeris 300414) |
|---|---|
| Biologinės saugos lygis | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A5SF |
Biomolekuliniai duomenys
| Mutacijų profilis | WT1 mutacijos būklė: homozigotinė c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1 mutacijos būklė: laukinis tipas |
|---|
Tvarkymas
| Kultūros terpė | MSCGM rinkinys (iš "Lonza") |
|---|---|
| Disociacijos reagentas | Accutase |
| Subkultūrinimas | Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė. |
| Užšaldyti terpę | Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas. |
| Ląstelių atšildymas ir kultivavimas |
|
| Inkubacijos atmosfera | 37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje. |
| Flakono danga | Nėra |
| Užšaldymo procedūra | Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą. |
| Pristatymo sąlygos | Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą. |
| Laikymo sąlygos | Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą. |
Kokybės kontrolė / Genetinis profilis / HLA
| Sterilumas | Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus. Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos. |
|---|---|
| HLA aleliai |
A*: '03:01:01
B*: '35:01:01, '35:03:01
C*: '04:01:01
DRB1*: '04:03:01, '11:04:01
DQA1*: '03:01:01, '05:05:01
DQB1*: '03:01:01, '03:02:01
DPB1*: '01:01:01, '04:01:01
E: '01:03:02, '01:06:01
|
Analizės sertifikatas (CoA)
| Partijos numeris | Sertifikato tipas | Data | Katalogo numeris |
|---|---|---|---|
| 300414-221 | Analizės sertifikatas | 23. May. 2025 | 300414 |
Medžiagų perdavimo sutartis
Jei ketinate naudoti Cytion ląstelių linijas tik vidiniams tyrimams vienoje tyrimų vietoje, užpildykite ir pasirašykite mūsų medžiagų perdavimo sutartį (MTA) ir pateikite ją kartu su užsakymu.
Bet kokiam komerciniam naudojimui, įskaitant, bet neapsiribojant, mokamais paslaugų darbais, kokybės kontrolės bandymais, produktų išleidimu, diagnostiniu naudojimu ar reguliavimo tyrimais, užpildykite numatomo naudojimo formą, kad galėtume parengti jūsų projektui pritaikytą sutartį.
Atkreipkite dėmesį: MTA taikoma tik tam tikroms ląstelių linijoms. Jei šis pranešimas ir MTA dokumentas yra pateikti produkto puslapyje, sutartis yra taikoma. Ląstelių linijoms, kurioms MTA netaikoma, nuoroda į sutartį nebus rodoma. MTA negalioja klientams Amerikoje, Kinijoje ar Taivane. Norėdami gauti atitinkamą sutartį, susisiekite su mūsų JAV padaliniu.