Jurkat ląstelės — aukščiausio lygio T ląstelių modelis imunologijos ir leukemijos tyrimams

Įvadas

Jurkato ląstelės, taip pat žinoma sinonimais JM, JM-Jurkat, Jurkat-FHCRC, FHCRC-11 ir FCCH1024, yra viena iš plačiausiai biomedicininiuose tyrimuose naudojamų žmogaus T ląstelių linijų. Ši linija, sukurta 1970-ųjų viduryje iš vaiko, sergančio vaikystės T-limfoblastine leukemija (taip pat klasifikuojama kaip pirmtakinių T-ląstelių ūminė limfoblastinė leukemija), periferinio kraujo, pirmą kartą buvo aprašyta Schneiderio, Schwenko ir kolegų 1975 ir 1977 m. paskelbtuose reikšminguose straipsniuose. [1][2] Per penkis dešimtmečius Jurkat ląstelės tapo nepakeičiamu įrankiu tyrinėjant T ląstelių receptorių (TCR) signalizaciją, apoptozę, citokinų gamybą ir T ląstelių piktybinių navikų molekulinę biologiją. Dėl jų aktyvaus augimo suspensijos kultūroje, gerai apibūdinto imunofenotipo ir išsamių omikos duomenų jos tapo pagrindiniu etaloniniu modeliu imunologijos, onkologijos ir vaistų kūrimo srityse.

Svarbiausi dalykai

• Jurkat ląstelės (Cellosaurus, kataloginis numeris CVCL_0065) – tai iš periferinio kraujo gauta nemirtinga žmogaus T-limfocitų leukemijos ląstelių linija.
• Jie išreiškia CD3, CD4 ir CD45 paviršinius žymenis ir turi funkcionalų T ląstelių receptorių kompleksą.
• Šioje linijoje yra gerai apibūdintos mutacijos BAX, TP53, NOTCH1, PTEN/INPP5D, MSH2, ir MSH6, todėl šis tipas priskiriamas mikrosatelitų nestabilumo aukšto lygio (MSI-high) kategorijai.
• Jurkat ląstelės atlieka pagrindinį vaidmenį TCR signalizacijos tyrimuose ir padėjo suformuoti didžiąją dalį dabartinių žinių apie T ląstelių aktyvacijos kelius.
• Jos yra tinkamiausias modelis apoptozės tyrimams, leukemijos vaistų bandymams ir naujosios CAR-T ląstelių technologijos plėtrai.
• Apie šią liniją viešai prieinami išsamūs daugialypės omikos duomenys, įskaitant proteomikos, fosfoproteomikos, DNR metilinimo ir jautrumo vaistams profilius.

Kas yra Jurkat ląstelių linija?

Jurkat linija buvo išskirta iš 14-mečio berniuko, sergančio vaikystės T-limfoblastine leukemija (prekursorinių T-ląstelių ūmine limfoblastine leukemija), periferinio kraujo. Šią ląstelių liniją sukūrė Schneideris ir Schwenkas, kurie 1975 m. pirmą kartą ją aprašė kaip „JM“ ląstelių liniją, įrodydami, kad T ląstelių žymenys pasireiškia per visą ląstelių ciklą. [1] Vėlesnis tyrimas patvirtino, kad šis pavyzdys yra EBV genomo neigiamas ir priklauso T ląstelių linijai. [2][3] Ankstyvieji Kaplano ir Petersono antigeniniai tyrimai parodė, kad šioje ląstelių linijoje aptikti su T ląstelių limfoma susiję antigenai taip pat buvo randami virkštelės kraujo limfocituose, o tai susiejo šį modelį su fiziologine T ląstelių biologija. [4]

Imunofenotipiškai Jurkat ląstelės ekspresuoja CD3, CD4 ir CD45, pasižymi pertvarkytu T ląstelių receptoriumi ir neekspresuoja c-kit, o tai atitinka limfoidinę kilmę. [5][6] TCR geno pertvarkymo profilis yra aiškiai apibrėžtas ir naudojamas kaip etaloninis standartas klonalumo diagnostikoje. [7] Citogenetiškai ši linija yra hipotetraploidinė, pasižymi būdinga 2 chromosomos trumposios rankos delecija ir atitinka „MSI-high“ statusą. [8] Pagrindinės somatinės mutacijos apima funkcijos praradimo mutacijas MSH2 (nesąmonė) ir MSH6 (rėmo poslinkis) ir BAX, heterozigotinis NOTCH1 mutacija, heterozigotinė TP53 beprasmė mutacija ir bialelinė inaktyvacija INPP5D (SHIP1), atspindintis sudėtingą T ląstelių piktybinių navikų genominį vaizdą.

Informacija apie ląstelių kultūrą

Jurkat ląstelės – mažas konfluencijos laipsnis

Jurkat ląstelės – didelė konfluencija

Jurkat ląstelių privalumai

Jurkat ląstelės yra ypač patikima platforma žmogaus T ląstelių biologijos tyrimams. Jos sparčiai auga suspensijoje, o jų dauginimosi laikas yra 25–35 valandos, todėl jos puikiai tinka didelio masto biocheminiams ir funkciniams tyrimams. Ši linija ekspresuoja pilną, signalizavimo funkciją atliekantį TCR–CD3 kompleksą kartu su CD4 ko-receptoriumi, tiksliai atkartodama pagrindinius pagalbinių T ląstelių biologijos aspektus. Jos tinkamumas genetiniams manipuliavimams – kurį patvirtina milžiniškas išvestinių „knockout“ ir reporterinių linijų katalogas – leidžia tyrėjams tiksliai išanalizuoti atskirus signalizavimo komponentus. Ląstelių linija buvo visiškai autentiškai patvirtinta STR profiliavimo metodu ir yra neigiamo rezultato dėl mikoplazmos bei nebūdingų virusinių užteršimų, užtikrinant eksperimentų pakartojamumą. [9][10]

Jurkat ląstelių viešai prieinamų daugiaomikos duomenų apimtis tarp T ląstelių linijų neturi sau lygių. Ši linija yra įtraukta į „Cancer Cell Line Encyclopedia“ (CCLE), LL-100 kraujo vėžio tyrimų rinkinį, ENCODE projektą ir „Cancer Dependency Map“, suteikdama tyrėjams galimybę naudotis visą genomą apimančiais genetiniais, transkriptomikos, proteomikos ir jautrumo vaistams duomenimis. [11][12][13] Šios išsamios anotacijos leidžia atlikti lyginamąsias ir integruotas analizes, kurios būtų neįmanomos naudojant pirminius T ląstelių izoliatus. Be to, gerai apibūdintas mutacijų fonas – įskaitant nustatytus PTEN/SHIP1 ir DNR nesutapimų taisymo trūkumus – daro Jurkat ląsteles patogiu modeliu, leidžiančiu vienu metu tirti PI3K-Akt signalo kelio reguliacijos sutrikimus ir genominį nestabilumą. [14][15]

Vaistų atradimo srityje auginimas suspensijoje supaprastina junginių poveikį ląstelėms ir mėginių ėmimą. Jurkat ląstelės stipriai reaguoja į TCR stimuliaciją, citokinų poveikį ir proapoptotinius dirgiklius, todėl citokinų tyrimų, srauto citometrijos ir gyvybingumo tyrimų metu gaunami atkartojami ir kiekybiškai įvertinami rezultatai. Dėl jų jautrumo tiek klasikiniams chemoterapiniams vaistams, tiek naujiems tikslinio veikimo preparatams, šios ląstelės tapo pirmosios eilės atrankos priemone kuriant vaistus nuo leukemijos. Jų panaudojimas svarbiuose farmakogenominiuose tyrimuose, pavyzdžiui, CCLE, dar labiau patvirtino jų prognostinę vertę. [16][17]

Jurkat ląstelių trūkumai

Nepaisant plačiai paplitusio jų naudojimo, Jurkat ląstelėse yra keletas gerai dokumentuotų genetinių nukrypimų, kurie gali suklaidinti eksperimentų rezultatų interpretaciją. Dėl bialeliškų rėmo poslinkio mutacijų šioje linijoje trūksta funkcinio BAX baltymo ekspresijos, todėl ji iš esmės yra atspari tam tikriems proapoptoziniams dirgikliams, kurių veikimas priklauso nuo šio efektoriaus. [15] Dvialelinė SHIP1 (INPP5D) inaktyvacija ir funkcinio PTEN praradimas lemia nuolatinę PI3K-Akt signalo perdavimo kelio aktyvaciją, o tai gali iškreipti signalizacijos tyrimų rezultatus. [14][18] Todėl tyrėjai privalo interpretuoti apoptozės ir išgyvenamumo duomenis atsižvelgdami į šiuos konkrečius trūkumus ir turėtų patvirtinti pagrindinius rezultatus pirminėse T ląstelėse arba alternatyviuose modeliuose.

Ši linija yra MSI-high dėl homozigotinių funkcijos praradimo mutacijų nesutapimo taisymo genuose MSH2 ir MSH6, dėl ko ilgai trunkančio kultivavimo metu padidėja antrinių mutacijų kaupimosi dažnis. [19][20] Šis genominis nestabilumas reiškia, kad skirtingų laboratorijų atsargų mutacijų profiliai gali skirtis, o tai pabrėžia reguliaraus ląstelių linijų autentiškumo patvirtinimo naudojant STR profiliavimą ir laikymosi mažo pasėlių skaičiaus principo svarbą. Hipotetraploidinis kariotipas, ploidiškumo heterogeniškumas ir būdinga 2p chromosomos delecija dar labiau sudėtingina genų dozės poveikio interpretavimą. [8]

Kaip transformuota vėžio ląstelių linija, Jurkat ląstelės nevisiškai atspindi normalių pirminių žmogaus T limfocitų biologiją. Pažymėtina, kad šioje linijoje yra aktyvuojančių NOTCH1 mutacijos ir heterozigotinis TP53 beprasmė mutacija, požymiai, susiję su piktybine transformacija, o ne su normaliąja T ląstelių fiziologija. [21][22] Todėl Jurkat ląstelėse gauti rezultatai – ypač susiję su citotoksine efektorine funkcija, išsekimu ar diferenciacija – turėtų būti patvirtinti pirminėse T ląstelių sistemose arba atitinkamuose in vivo modeliuose, prieš darant transliacines išvadas.

Jurkat ląstelių pritaikymas moksliniuose tyrimuose

T ląstelių receptorių signalizacija ir imuninės sistemos aktyvacija

Beveik penkis dešimtmečius Jurkat ląstelės buvo pagrindinis modelis, padėjęs iššifruoti T ląstelių receptorių signalizaciją. Istorinė Abraham ir Weiss (2004) apžvalga – dažniausiai cituojamas straipsnis, susijęs su šia ląstelių linija – išsamiai aprašė, kaip tyrimai su Jurkat ląstelėmis padėjo sukurti pagrindinį TCR signalizacijos modelį. [23] Šis darbas parodė, kad eksperimentai su Jurkat ląstelėmis leido atskleisti Lck, ZAP-70 ir LAT vaidmenis kaip esminių proksimalinių kinazų ir adapterių, veikiančių po TCR suaktyvinimo – šie atradimai iki šiol yra šiuolaikinės imunologijos pagrindas. Praktiškai kiekvienas pagrindinis TCR–NFAT/NF-κB/AP-1 signalizacijos ašies mazgas pirmą kartą buvo apibūdintas arba patvirtintas šioje ląstelių linijoje. [23]

Naujausiuose tyrimuose Jurkat ląstelės ir toliau naudojamos T ląstelių aktyvacijos tyrimams. Atliekant sulforafano imunomoduliuojančių savybių tyrimus, pasitelkus Jurkat ląsteles buvo įrodyta, kad šis natūralus izotiocianatas slopina ankstyvuosius T ląstelių aktyvacijos procesus, įskaitant IL-2 gamybą, CD25 indukciją ir citokinų sekreciją po TCR stimuliacijos. [24] Šie rezultatai nustato mechanistinį pagrindą, kuriuo remiasi maistinių kryžmažiedžių šeimos augalų junginių priešuždegiminis poveikis. Panašiai, tyrime, kuriame buvo nagrinėjami interleukino-2 indukuojamos T ląstelių kinazės (ITK) inhibitoriai, naudojant Jurkat ląsteles buvo patvirtinta, kad nauji kovalentiniai pirazolo pagrindu sukurti junginiai veiksmingai slopina paskesnę fosforilinimą ir IL-2 sekreciją po TCR stimuliacijos, o jų veiksmingumas in vivo buvo įrodytas pelių modelyje. [25]

Jurkat ląstelės taip pat buvo naudojamos tyrinėjant, kaip transkripcijos faktoriai reguliuoja T ląstelių tapatybę patologinėse sąlygose. Atliekant tyrimą dėl TCF7 trūkumo, susijusio su lėtine obstrukcine plaučių liga (LOPL) ir imuninės sistemos disfunkcija, buvo naudojamos TCF7 geną praradusios Jurkat ląstelės kartu su pirminėmis paciento T ląstelėmis, siekiant patvirtinti trijų genų ligos požymių rinkinį. TCF7 trūkumo turinčių Jurkat ląstelių, kuriose buvo atliktas genetinis atkūrimas, tyrimas „Western blotting“ metodu patvirtino TCF7 vaidmenį palaikant T ląstelių limfoidinių genų programas. [26] Be to, eksperimentuose, kuriuose buvo tiriamas STUB1 reguliuojamas transkripcijos faktoriaus Fli-1 ubikvitinavimas, Jurkat ląstelės buvo naudojamos kaip in vitro platforma, siekiant apibūdinti STUB1/Fli-1 signalizacijos ašį, susijusią su CD4⁺ T ląstelių aktyvacija uždegimo metu. [27]

Apoptozė ir ląstelių mirties mechanizmai

Jurkat ląstelės jau seniai yra standartinis modelis, naudojamas T ląstelių apoptozės signalinių kelių tyrimams, nepaisant jose esančio BAX trūkumo. Tyrimuose, skirtuose mitochondrijų autofagijos reguliavimui, buvo naudojamos CRISPR/Cas9 technologija modifikuotos Jurkat ląstelės be FADD geno, siekiant įrodyti, kad FADD reguliuoja mitochondrijų skaičių per PGC1-α priklausomus ir su autofagija susijusius mechanizmus. [28] Rapamicino sukeltos autofagijos ir chloroquino tarpininkaujamo slopinimo eksperimentai, stebėti taikant LC3B „Western blot“ ir mtCO1/β-globino qPCR metodus, patvirtino, kad FADD atlieka reguliuojamąjį vaidmenį mitofagijoje, nepriklausomai nuo jo kanoninės mirties receptoriaus funkcijos.

Atliekant mechanizmo požiūriu svarbų tyrimą, skirtą ciklinu priklausomų kinazų (CDK) inhibitoriams, buvo naudojamos Jurkat ląstelės kartu su kitais leukemijos modeliais, siekiant nustatyti, kad CDK9 ir CDK12/13 — o ne su ląstelių ciklu susijusios CDK — skatina apoptozę, slopindamos trumpalaikių antiapoptozinių baltymų Mcl-1 ir Bfl-1/A1 transkripciją. [29] Specifiniai inhibitoriai AZD4573, atuveciclib, SR4835 ir THZ531 sukėlė stiprią apoptozę Jurkat ląstelėse, taip atskleidžiant mechanistinį jų klinikinio potencialo pagrindą. Šie rezultatai paaiškina, kodėl CDK inhibitoriai, veikiantys RNR polimerazės II elongaciją, yra labiau citotoksiški nei tie, kurie veikia ląstelių ciklo CDK.

Atliekant mikroRNR reguliavimo tyrimus, naudojant Jurkat ląsteles buvo tirta, kaip LNA-anti-miR-92b ir LNA-anti-miR-181b moduliuoja BAX, BCL-2 ir MCL-1 genų ekspresiją sergant ūmia limfoblastine leukemija. [30] Buvo įrodyta, kad piperinas, natūralus alkaloidas, padidina Jurkat ląstelių jautrumą, keisdamas mikroRNR profilius ir pakreipdamas pusiausvyrą proapoptozinių BCL-2 šeimos narių naudai. Be to, apžvalginėje studijoje buvo pabrėžti in vitro duomenys, rodantys, kad dokozaheksaeno rūgštis (DHA) Jurkat ląstelėse sukelia nuo dozės ir laiko priklausančius citotoksinius poveikius per proapoptozinius kelius, o kartu su standartiniais chemoterapiniais vaistais, naudojamais vaikų ūminės limfoblastinės leukemijos (ALL) gydymui, sukelia sinergetinį poveikį. [31] Istorinis tyrimas patvirtino, kad BAX baltymo nebuvimas Jurkat ląstelėse atsiranda dėl vienos bazės delecijų koduojančiame mikrosatelite, o tai turi funkcinių pasekmių atsparumui apoptozei. [15]

Leukemijos biologija ir vaistų kūrimas

Jurkat ląstelės, kaip vaikų T-tipinės ūminės limfoblastinės leukemijos (prekursorinių T-ląstelių ALL) modelis, yra neatsiejama T-ląstelių piktybinių navikų molekulinės genetikos charakterizavimo dalis. Pirmieji tyrimai parodė, kad daugiau nei 50 % žmogaus T-ALL atvejų pasižymi aktyvuojančiomis NOTCH1 mutacijomis – šis atradimas buvo patvirtintas ir išplėstas naudojant Jurkat ląstelių liniją bei kitus T-ALL modelius. [21] Atlikus išsamias mutacijų analizes, nustatyta, kad dažnai pasitaiko pokyčiai p53, p. 16/p. 15, PTEN, taip pat DNR nesutapimų taisymo genus įvairiose T-ALL ląstelių linijose, įskaitant „Jurkat“, taip sukuriant išsamų šios ligos genominį vaizdą. [32][33][34][18]

Vaistų paskirties keitimo strategijose Jurkat ląstelės buvo naudojamos kartu su kitais leukemijos modeliais siekiant įvertinti naujus priešvėžinius preparatus. Neseniai atliktame tyrime buvo tiriamas chemiškai modifikuotų tetraciklino analogų – įskaitant COL-3, doksicikliną ir minocikliną – citotoksinis potencialas Jurkat, K562 ir KG-1a ląstelėse. [35] COL-3 pasižymėjo didžiausiu aktyvumu ir moduliavo JAK2/STAT3 signalinį kelią bei BCL-2 šeimos baltymus, taip įrodydamas Jurkat ląstelių naudingumą vaistų veikimo mechanizmų profiliavimui. Jurkat ląstelės taip pat buvo naudojamos tikslinio vaistų pristatymo sistemų vertinimui: buvo įvertintas anti-CD22-ScFv padengta β-ciklodekstrino metalo-organinio karkaso nanoplatforma, į kurią buvo įdėta daunorubicino, buvo įvertinta dėl selektyvumo CD22-teigiamose ir CD22-neigiamose (Jurkat) ląstelėse, patvirtinant tikslinės sistemos specifiškumą. [36]

Didelio masto farmakogenominėse iniciatyvose Jurkat ląstelės buvo įtrauktos į etaloninius rinkinius. „Vėžio ląstelių linijų enciklopedija“ (CCLE) ir susiję apžvalginiai farmakogenominiai tyrimai nustatė Jurkat ląstelių jautrumą šimtams vaistų junginių, susiedami genominius bruožus su terapiniu pažeidžiamumu. [11][16] Atlikus integruotas vaikų ALL ląstelių linijų, įskaitant „Jurkat“, multiomines analizes, buvo nustatytos nuo ląstelių kilmės priklausančios vaistų reakcijos koreliacijos ir nauji potencialūs terapiniai preparatai, o tai sudaro pagrindą tiksliajai medicinai vaikų leukemijos srityje. [17] Autentiškumo tyrimai patvirtino, kad ši linija ilgalaikio auginimo metu išlaiko stabilias augimo savybes ir genetinius požymius. [37]

Proteomika, glikomika ir daugiaomikos tyrimai

Jurkat ląstelės tapo etaloniniu standartu atliekant didelio masto proteomikos tyrimus ir posttransliacinių modifikacijų (PTM) profiliavimą. Istorinis kiekybinis acetilomo tyrimas, atliktas naudojant aukštos skiriamosios gebos masių spektrometriją (įskaitant Jurkat ląsteles), nustatė 3 600 lizino acetilinimo vietų 1 750 baltymuose, atskleidžiant, kad acetilinimas pirmiausia veikia didelius makromolekulių kompleksus ir bendrai reguliuoja pagrindines ląstelių funkcijas, įskaitant chromatino pertvarkymą ir ląstelių ciklo eigą. [38] Be to, taikant „UbiSite“ metodiką ir naudojant Jurkat ląsteles, buvo identifikuota daugiau nei 63 000 unikalių ubikvitinacijos vietų 9 200 baltymų, įskaitant plačiai paplitusią N-terminalinę ubikvitinaciją, o tai prisidėjo prie ubikvitino biologijos srities pažangos. [39]

Fosfoproteomikos tyrimai taip pat labai rėmėsi Jurkat ląstelėmis. „Augmented Multiple-Protease-Based Human Phosphopeptide Atlas“ (Išplėstinis, daugiaproteazinis žmogaus fosfopeptidų atlasas) įtraukė Jurkat ląstelių duomenis, siekdamas sudaryti mažiau šališką atlasą, apimantį 37 771 unikalius fosfopeptidus ir 18 430 unikalias fosforilinimo vietas, taip parodydamas tripsino šališkumą viešose duomenų bazėse ir daugiafermentinių metodų vertę. [40] Atlikus lyginamąsias proteomines analizes vienuolikoje paplitusių ląstelių linijų, įskaitant „Jurkat“, paaiškėjo, kad, nepaisant skirtingos ląstelių kilmės, proteomo aprėptis išlieka stebėtinai nuosekli, o pagrindinių signalinių baltymų ekspresijos modeliai yra būdingi konkrečiam ląstelių tipui. [41] Atlikus 949 vėžio ląstelių linijų proteominį kartografavimą, apimantį visų vėžio rūšių spektrą, „Jurkat“ buvo dar labiau įtvirtinta plačiame baltymų biomarkerių kontekste, susijusiame su jautrumu vaistams ir vėžio pažeidžiamumu. [42]

Glikomikos tyrimai leido apibūdinti Jurkat ląstelių membraninių baltymų N-glikano profilius, atskleidžiant ląstelių tipui būdingus sialinės rūgšties jungčių ir glikoziltransferazės ekspresijos modelius, kurie leidžia Jurkat ląsteles atskirti nuo B-ląstelių ir mieloidinių ląstelių linijų. [43] Atliekant išsamų kiekybinį proteomikos tyrimą, skirtą baltymų O-GlcNAciliacijai, Jurkat ląstelės buvo panaudotos kaip vienas iš trijų žmogaus ląstelių modelių, siekiant parodyti O-GlcNAc modifikacijos reakcijas, būdingas konkrečiam ląstelių tipui ir bendras visų tipų ląstelėms, esant N-glikozilinimo slopinimui; tyrimo metu buvo identifikuota daugiau nei 1 000 O-GlcNAciliuotų baltymų. [44] Dinaminis DNR metilinimo profiliavimas 82 žmogaus ląstelių linijose, įskaitant Jurkat, atskleidė ryšį tarp metilinimo modelių, genų ekspresijos ir vėžiui būdingų epigenetinių požymių. [45]

CAR-T ląstelių technologija ir imunoterapija

Jurkat ląstelės atlieka svarbų vaidmenį sparčiai besivystančioje CAR-T ląstelių technologijų ir sintetinių receptorių inžinerijos srityje. Koncepcijos patvirtinimo tyrime buvo sukurtas be žymeklių veikiantis greito optinio vaizdavimo (ROI) biosensorius su mašininio mokymosi analize, skirtas tiesioginiam CAR-T ląstelių kiekybiniam įvertinimui iš viso kraujo, naudojant Jurkat ląsteles, įmaišytas į kraujo mėginius, siekiant patvirtinti aptikimo efektyvumą. [46] Šis metodas leido patenkinti kritinę klinikinę būtinybę stebėti CAR-T ląstelių dauginimąsi realiuoju laiku, išvengiant tradicinių laboratorinių metodų sąnaudų ir vėlavimų.

Kalbant apie naujos kartos terapines receptorių platformas, Jurkat ląstelės buvo pagrindinė in vitro patvirtinimo sistema, skirta palyginti SNIPR, synNotch ir TRUCK sintetinių receptorių architektūras, pritaikytas Alzhaimerio ligai gydyti. [47] Visos trys platformos buvo ekspresuotos Jurkat ląstelėse, naudojant į amiloidą-beta nukreiptą rišimosi domeną, o receptorių reguliuojama transgeno ekspresija buvo kiekybiškai įvertinta, siekiant palyginti jų santykinį efektyvumą. Jurkat ląstelės taip pat buvo panaudotos vertinant naują hipoterminio konservavimo preparatą (SUL-138), skirtą klinikinio lygio CAR-T ląstelių produktams, kur Jurkat ląstelės tarnavo kaip modelinis T ląstelių substratas, siekiant įvertinti mitochondrijų stabilumą ir ląstelių gyvybingumą šaldymo ir atšildymo metu. [48]

Be to, Jurkat ląstelės buvo naudojamos kaip mažų ekstraląstelinės vezikulių (sEV) šaltinis nanomedicinos taikymams. Iš Jurkat ląstelių dydžio atskyrimo chromatografijos būdu išskirtos sEV buvo prisotintos kurkuminu ultragarsiniu apdorojimu, siekiant sukurti tikslinį terapinį preparatą burnos ertmės plokščialąstelinės karcinomos gydymui. [49] „In vitro“ ir „in vivo“ tyrimai parodė, kad iš Jurkat ląstelių gautos sEV sustiprino kurkumino navikų slopinamąjį poveikį, o tai iliustruoja šios ląstelių linijos universalumą kaip biologinės medžiagos šaltinio, neapsiribojant jos tradiciniu panaudojimu kaip signalizacijos modelio. Be ląstelių normoterminė blužnies perfuzijos platforma papildomai patvirtino steroidų imunosupresijos mechanizmus, naudojant ištekėjusias T ląsteles ir lyginant jas su Jurkat ląstelių transkripcijos etalonais. [50]

Išvada

Jurkat ląstelės (CVCL_0065) pelnė „aukso standarto“ žmogaus T ląstelių modelio statusą, penkis dešimtmečius teikdamos novatoriškus indėlius į imunologijos, onkologijos ir molekulinės biologijos sritis. Nuo pagrindinės TCR signalizacijos paradigmos išaiškinimo iki pažangiausių CAR-T ląstelių tyrimų vykdymo – ši iš pirmtakinės T ląstelių ūminės limfoblastinės leukemijos gauta linija ir toliau sudaro pagrindą fundamentaliems bei taikomiesiems atradimams. Jos gerai apibūdintas mutacijų profilis, išsamios multiomikos anotacijos ir tinkamumas genetinei inžinerijai daro ją nepakeičiamu įrankiu – su sąlyga, kad mokslininkai atsižvelgia į jos specifinius genetinius apribojimus. Nesvarbu, ar jūsų tyrimai susiję su T ląstelių aktyvacija, apoptoze, jautrumu leukemijos vaistams ar naujos kartos imunoterapija, Jurkato ląstelės suteikia patikrintą ir gerai pagrįstą pagrindą. Susipažinkite su visomis specifikacijomis, įskaitant Jurkat E6.1 ląstelės subklonuoti arba pateikti užsakymą adresu cytion.com.

Svarbiausi leidiniai

1. Schwenk HU, Schneider U (1975) T ląstelių žymens priklausomybė nuo limfoblastų ląstelių ciklo. „Blut“. PMID: 1103999
2. Schneider U, Schwenk HU, Bornkamm G (1977) EBV genomo neturinčių „null“ ir „T“ ląstelių linijų, gautų iš vaikų, sergančių ūmia limfoblastine leukemija ir leukeminiu transformuotu ne Hodžkino limfoma, charakteristika. „International Journal of Cancer“. PMID: 68013
3. Schneider U, Schwenk HU (1977) Iš vaikų, sergančių ūmia limfoblastine leukemija ir ne Hodžkino limfoma po leukeminės transformacijos, sukurtų „T“ ir „ne-T“ ląstelių linijų charakteristika. Hematologija ir kraujo transfuzija. PMID: 204546
4. Kaplan J, Peterson WD Jr (1976) Su T ląstelių limfoma susijusių antigenų nustatymas virkštelės kraujo limfocituose ir fitohemaglutininu stimuliuotuose blastuose. „Cancer Research“. PMID: 1086134
5. Morita S, Tsuchiya S, Fujie H (1996) c-kit receptoriai žmogaus leukemijos ląstelių linijose ir vaikų leukemijoje: selektyvus c-kit ekspresijos išsaugojimas megakarioblastinėse ląstelių linijose prisitaikant prie in vitro kultūros. „Leukemia“. PMID: 8558913
6. Burger R, Hansen-Hagge TE, Drexler HG (1999) T-akutinės limfoblastinės leukemijos (T-ALL) ląstelių linijų heterogeniškumas: pasiūlymas dėl klasifikacijos pagal imunofenotipą ir T-ląstelių receptorių tyrimus. „Leukemia Research“. PMID: 9933131
7. Sandberg Y, Verhaaf B, van Gastel-Mol EJ (2007) Žmogaus T ląstelių linijos su aiškiai apibrėžtais T ląstelių receptorių genų perstatymams kaip BIOMED-2 daugialypės polimerazės grandininės reakcijos mėgintuvėlių kontrolės. „Leukemia“. PMID: 17170727
8. LaGree KA, Lee AT, Stetten G (1988) Žmogaus Jurkat (FHCRC-11) ląstelių linija yra nevienalytė pagal ploidiškumą ir ląstelių dydį bei išskiria detergentuose tirpią DNR. „Experimental Hematology“. PMID: 3165345
9. Raimondi V, Minuzzo S, Ciminale V (2017) HTLV-1 užkrėstų ląstelių linijų STR profiliavimas. „Methods in molecular biology“ (Clifton, N.J.). PMID: 28357668
10. Uphoff CC, Pommerenke C, Denkmann SA (2019) Žmogaus ląstelių linijų patikrinimas dėl virusinių infekcijų, taikant RNR-Seq duomenų analizę. „PLoS ONE“. PMID: 30629668
11. Barretina J, Caponigro G, Stransky N (2012) „Vėžio ląstelių linijų enciklopedija“ leidžia atlikti prognostinį vėžio vaistų jautrumo modeliavimą. „Nature“. PMID: 22460905
12. Quentmeier H, Pommerenke C, Dirks WG (2019) LL-100 rinkinys: 100 ląstelių linijų kraujo vėžio tyrimams. „Scientific Reports“. PMID: 31160637
13. Ghandi M, Huang FW, Jané-Valbuena J (2019) Naujos kartos vėžio ląstelių linijų enciklopedijos charakterizavimas. „Nature“. PMID: 31068700
14. Lo TC, Barnhill LM, Kim Y (2009) SHIP1 inaktyvacija T ląstelių ūminės limfoblastinės leukemijos atveju dėl mutacijos ir išplėstinio alternatyvaus splaisingo. „Leukemia Research“. PMID: 19473701
15. Brimmell M, Mendiola R, Mangion J (1998) BAX genų rėmo poslinkio mutacijos žmogaus kraujodaros piktybinių navikų ląstelių linijose yra susijusios su atsparumu apoptozei ir mikrosatelitų nestabilumu. „Oncogene“. PMID: 9583678
16. Iorio F, Knijnenburg TA, Vis DJ (2016) Vėžio farmakogenominių sąveikų panorama. „Cell“. PMID: 27397505
17. Leo IR, Aswad L, Stahl M (2022) Vaikų ūminės limfoblastinės leukemijos ląstelių linijų integruotas daugiaomikos tyrimas ir reakcijos į vaistus profiliavimas. „Nature Communications“. PMID: 35354797
18. Sakai A, Thieblemont C, Wellmann A (1998) PTEN geno mutacijos limfoidinėse navikose. „Blood“. PMID: 9787181
19. Hosoya N, Hangaishi A, Ogawa S (1998) hMSH6 geno rėmo poslinkio mutacijos žmogaus leukemijos ląstelių linijose. Japonijos vėžio tyrimų žurnalas: „Gann“. PMID: 9510473
20. Inoue K, Kohno T, Takakura S (2000) Dažnas mikrosatelitų nestabilumas ir BAX mutacijos T ląstelių ūminės limfoblastinės leukemijos ląstelių linijose. „Leukemia Research“. PMID: 10739008
21. Weng AP, Ferrando AA, Lee W (2004) NOTCH1 genų aktyvuojančios mutacijos žmogaus T ląstelių ūmios limfoblastinės leukemijos atveju. „Science“ (Niujorkas, N.Y.). PMID: 15472075
22. Cheng J, Haas M (1990) Dažnos mutacijos p53 naviko slopinančiame gene žmogaus leukemijos T ląstelių linijose. Molekulinė ir ląstelinė biologija. PMID: 2144611
23. Abraham RT, Weiss A (2004) Jurkat T ląstelės ir T ląstelių receptorių signalizacijos paradigmos raida. „Nature Reviews: Immunology“. PMID: 15057788
24. Fu Q, Gardner EM, Rockwell CE (2026) Augalinė medžiaga sulforafanas slopina citokinų indukciją ir kitus ankstyvuosius aktyvacijos procesus Jurkat ląstelėse. Maisto papildų žurnalas. PMID: 42152521
25. Ruan Z, Pan Z (2026) Pirazolio pagrindu sukurtų selektyvių kovalentinių ITK inhibitorių, pasižyminčių in vivo aktyvumu, atradimas. „European Journal of Medicinal Chemistry“. PMID: 42224937
26. Wang Z, Yang Y, Wang L (2026) Imuninės sistemos reguliacijos sutrikimų atsiskleidimas sergant lėtine obstrukcine plaučių liga (LOPL): trijų genų žymens identifikavimas ir TCF7 funkcinis patvirtinimas žmogaus plaučių audinyje bei T limfocituose. „International Journal of Molecular Sciences“. PMID: 42196213
27. Li P, Liu L, Wu Y (2026) STUB1 reguliuojama ubikvitinacija kontroliuoja Fli-1 stabilumą ir CD4⁺ T ląstelių aktyvaciją uždegimo metu. „Molecular Medicine“ (Kembridžas, Masačusetsas). PMID: 42192504
28. Lin CZ, Zhu ZX, Zhong Q (2026) [FADD reguliuojama mitochondrijų autofagija Jurkat ląstelėse]. „Zhongguo shi yan xue ye xue za zhi“. PMID: 42227456
29. Krings KS, Hatzfeld J, Weller S (2026) RNR polimerazę II aktyvuojančių CDK9 ir CDK12/13 slopinimas, bet ne su ląstelių ciklu susijusių CDK slopinimas, sukelia apoptozę, sumažindamas trumpalaikių Bcl-2 baltymų Mcl1 ir Bfl1/A1 ekspresiją. „Cell death & disease“. PMID: 42204137
30. Torkamani M, Forghanifard MM, Zarrinpour V (2025) LNA-anti-miR-92b, miR-181b, TNF-α ir piperino poveikio genų ekspresijai ir Jurkat ląstelių gyvybingumui tyrimas: reikšmė ūminės limfoblastinės leukemijos atveju. Medicinos žurnalas „Galen“. PMID: 42038900
31. Bittencourt VB, Schveitzer MC, da Costa RF (2026) Omega-3 riebalų rūgštys vaikų ūminės limfocitinės leukemijos atveju: apžvalginė apžvalga. „Clinical Nutrition ESPEN“. PMID: 42107536
32. Kawamura M, Ohnishi H, Guo SX (1999) p53, p21, p16, p15 ir RAS genų pokyčiai vaikų T-limfocitų ūmios limfoblastinės leukemijos atveju. „Leukemia Research“. PMID: 10071127
33. Siebert R, Willers CP, Schramm A (1995) MTS1/p16 ir MTS2/p15 genų homozigotinis praradimas limfomos ir limfoblastinės leukemijos ląstelių linijose. „British Journal of Haematology“. PMID: 8547074
34. Borgonovo Brandter L, Heyman M, Rasool O (1996) p16INK4/p15INK4B geno inaktyvacija yra dažnas reiškinys piktybinėse T ląstelių linijose. „European Journal of Haematology“. PMID: 8641406
35. Hassan ZM, Mamand DR, El-Gawly HW (2026) Tetraciklino analogų skirtingas poveikis JAK/STAT3 signalizacijos keliui ir BCL-2 šeimos baltymams leukemijos modeliuose. „Pharmaceutics“. PMID: 42076067
36. Khabiri A, Rastegari B, Rafiei Dehbidi G (2026) Tikslinė daunorubicino nanoplatforma, sukurta remiantis anti-CD22-ScFv baltymu padengtais β-ciklodekstrino metalo-organiniais karkasais. Therapeutic delivery. PMID: 42183612
37. Beesley AH, Palmer ML, Ford J (2006) Autentiškumas ir atsparumas vaistams ūminės limfoblastinės leukemijos ląstelių linijų grupėje. „British Journal of Cancer“. PMID: 17117183
38. Choudhary C, Kumar C, Gnad F (2009) Lizino acetilinimas veikia baltymų kompleksus ir bendrai reguliuoja pagrindines ląstelių funkcijas. „Science“ (Niujorkas, N.Y.). PMID: 19608861
39. Akimov V, Barrio-Hernandez I, Hansen SVF (2018) „UbiSite“ metodas, skirtas išsamiam lizino ir N-terminalo ubikvitinacijos vietų žemėlapiui sudaryti. „Nature Structural & Molecular Biology“. PMID: 29967540
40. Giansanti P, Aye TT, van den Toorn H (2015) Išplėstinis žmogaus fosfopeptidų atlasas, pagrįstas kelių proteazių veikimu. „Cell Reports“. PMID: 26074081
41. Geiger T, Wehner A, Schaab C (2012) Vienuolikos paplitusių ląstelių linijų lyginamoji proteominė analizė atskleidžia, kad daugumos baltymų ekspresija yra visuotinė, tačiau kintanti. „Molecular & cellular proteomics : MCP“. PMID: 22278370
42. Gonçalves E, Poulos RC, Cai Z (2022) 949 žmogaus ląstelių linijų visų vėžio rūšių proteomikos žemėlapis. „Cancer Cell“. PMID: 35839778
43. Reinke SO, Bayer M, Berger M (2012) Žmogaus kraujodaros ląstelių linijų ląstelių membranų baltymų N-glikanų analizė atskleidžia jų struktūros skirtumus. Biologinė chemija. PMID: 22944676
44. Fu L, Yin K, Xu X (2026) Sisteminis baltymų O-GlcNAciliacijos kiekybinis įvertinimas atskleidžia bendras ir konkrečiam ląstelių tipui būdingas reakcijas į N-glikoziliacijos slopinimą žmogaus ląstelėse. Analizinė chemija. PMID: 42153620
45. Varley KE, Gertz J, Bowling KM (2013) Dinaminis DNR metilinimas įvairiose žmogaus ląstelių linijose ir audiniuose. „Genome Research“. PMID: 23325432
46. Yu N, Porter RM, Zhou X (2026) Mašininio mokymosi pagalba atliekamas greitasis optinis vaizdavimas, skirtas žymeklių nenaudojančiam CAR T-ląstelių aptikimui nesuskaidytame kraujyje. „Biosensors“. PMID: 42187436
47. Siebrand CJ, Mayeri Z, Brown I (2026) Aβ molekulę atpažįstančių SNIPR, synNotch ir TRUCK sistemų in vitro palyginimas, skirtas vaistų pristatymui į ląsteles Alzhaimerio ligos gydymui. bioRxiv: biologijos srities priešspausdinių serveris. PMID: 42146485
48. Öner A, Nooteboom N, Oosting L (2026) Nauja hipoterminio konservavimo kompozicija, kurioje yra SUL-138, leidžia ilgą laiką hipoterminiu būdu saugoti klinikinio lygio CAR-T ląsteles. „Pharmaceutics“. PMID: 42076066
49. Ludwig N, Feldmann C, Spoerl S (2026) Kurkumino pristatymas per ekstraląstelines vezikules slopina naviko progresavimą pelių burnos plokščialąstelinėje karcinomoje. „Cancers“. PMID: 42192945
50. Callais NA, Welch S, Rainwater RR (2026) Aceliulinė normoterminė blužnies perfuzija paaiškina transkripcinius ir netranskripcinius steroidų imunosupresijos mechanizmus. bioRxiv: biologijos srities priešspausdinių serveris. PMID: 42239436