Sel SVI
€800,00*
Produk dikirim dalam keadaan beku menggunakan es kering dalam tabung kriogenik. Setiap tabung kriogenik biasanya mengandung 3 × 10⁶ sel untuk garis sel yang melekat atau 5 × 10⁶ sel untuk garis sel suspensi (lihat sertifikat analisis batch untuk detailnya).
Tidak lagi tersedia
Informasi umum
| Deskripsi | Garis sel SVI telah dikloning dari pertumbuhan glomeruli yang diisolasi dari tikus transgenik H-2kb-tsA58. Tikus-tikus tersebut membawa varian yang peka terhadap suhu dari antigen T besar SV40 yang berada di bawah kendali promotor H-2kb yang dapat diinduksi IFN-g. Sel berkembang biak pada suhu 33 derajat Celcius, dan berdiferensiasi pada suhu 37 derajat Celcius. Saat ini, sel telah berhasil dikultur selama lebih dari 40 kali tanpa mencatat perubahan fenotipik. SVI sangat mirip dengan E11 dalam hal morfologi dan ekspresi beberapa penanda. Misalnya, podocin dan WT1 diekspresikan pada tingkat yang lebih rendah dibandingkan dengan E11. Diferensiasi: Mulailah proses diferensiasi dengan menempatkan labu yang tidak mengalir ke dalam inkubator pada suhu 38 derajat Celcius / 5% CO2 selama minimal 14 hari untuk menyelesaikan diferensiasi. Penambahan interferon-gamma (INF-gamma) tidak diperlukan. |
|---|---|
| Organisme | Mouse |
| Jaringan | Ginjal |
Karakteristik
| Jenis/Subspesies | (CBA/Ca x C57BL/10) Tg (H2KbtsA58) Immort |
|---|---|
| Usia | Dewasa |
| Jenis Kelamin | Tidak ditentukan |
| Jenis sel | Podocyte |
| Sifat pertumbuhan | Patuh |
Data Peraturan
| Kutipan | SVI (nomor katalog Cytion 400495) |
|---|---|
| Tingkat keamanan hayati | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| Aksesi Cellosaurus | CVCL_5943 |
| Status transgenik | GMO-S1: Garis sel podosit murin (SVI) ini mengandung transgen SV40 Large T-Antigen yang aktif secara kondisional sebagai bagian dari model ImmortoMouse, yang mendukung pengawetan yang peka terhadap suhu. Konstruk ini secara stabil hadir dalam sel turunan podosit. Klasifikasi ini hanya berlaku di Jerman dan mungkin berbeda di tempat lain. |
Data Biomolekuler
| Ekspresi protein | WT1, Lmx1b, nephrin, NEPHI, FAT, P-cadherin, CD2AP, ZO-I, podocalyxin, podoplanin, synpo, podocin, TRPC6, dan GAPDH. |
|---|
Penanganan
| Media Kultur | RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a) |
|---|---|
| Suplemen | Tambahkan media dengan 10% FBS |
| Reagen Disosiasi | Accutase |
| Subkultur | Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar. |
| Rasio pemisahan | Rasio yang disarankan adalah 1:3 hingga 1:5. Dalam kondisi diferensiasi, yaitu inkubasi kultur sel yang belum padat hingga mencapai kepadatan maksimum pada suhu 38 derajat Celcius, proliferasi sel akan berhenti dalam dua minggu pertama dan berhenti sepenuhnya setelah sekitar empat minggu |
| Kepadatan penyemaian | Inokulasikan flask kultur sel T75 dengan 1x 10⁴ sel/cm² (sekitar 60.000 sel/ml, 12 ml medium dalam satu flask T75) untuk proses proliferasi. Jaga sel pada suhu 33 derajat Celsius / 5% CO₂, hingga flask mencapai sekitar 75% konfluen. |
| Pembaruan cairan | 3 kali per minggu |
| Media pembekuan | Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi. |
| Pencairan dan Kultur Sel |
|
| Suasana Inkubasi | 33°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan. |
| Pelapisan Labu | Tidak ada |
| Prosedur Pembekuan | Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai. |
| Ketentuan Pengiriman | Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai. |
| Kondisi Penyimpanan | Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair. |
Kontrol kualitas / Profil genetik / HLA
| Kemandulan | Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran. Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari. |
|---|---|
| Profil STR |
Amelogenin: x,x
|
Sertifikat Analisis (CoA)
| Nomor Lot | Jenis Sertifikat | Tanggal | Nomor Katalog |
|---|---|---|---|
| 400495-1221 | Sertifikat Analisis | 23. May. 2025 | 400495 |