Sel HaCaT

Freeze Medium CM-1 dari Cytion adalah media kriopreservasi mutakhir yang dirancang untuk memastikan tingkat viabilitas dan fungsionalitas sel tertinggi setelah pencairan. Media serbaguna ini cocok untuk spektrum luas jenis sel, termasuk sel manusia dan hewan, menjadikannya alat penting untuk beragam aplikasi penelitian. Diformulasikan dengan kombinasi krioprotektan dan nutrisi esensial yang seimbang dan cermat, Freeze Medium CM-1 meminimalkan pembentukan kristal es dan stres seluler selama proses pembekuan, sehingga menjaga integritas sel.
Fitur utama dari Freeze Medium CM-1 meliputi:

Kompatibilitas Luas: Efektif untuk berbagai jenis sel, termasuk sel primer, sel punca, dan garis sel yang sudah mapan.
Viabilitas Tinggi: Dioptimalkan untuk memaksimalkan pemulihan dan viabilitas sel pasca-pencairan, memastikan hasil eksperimental yang andal.
Siap Digunakan: Disiapkan dan disterilkan dengan mudah untuk aplikasi langsung, mengurangi waktu persiapan dan risiko kontaminasi.
Stabilitas yang Ditingkatkan: Mempertahankan kinerja yang konsisten dalam kondisi kriopreservasi standar, memastikan hasil yang dapat direproduksi.
Umur simpan yangpanjang: CM-1 adalah media kriopreservasi siap pakai yang mengandung serum dan siap pakai yang dapat disimpan di lemari es hingga satu tahun.


Menggunakan CM-1 untuk Membekukan Sel

Untuk menggunakan CM-1 untuk membekukan sel yang melekat dan suspensi, ikuti langkah-langkah berikut

Untuk sel yang melekat, cuci dan pisahkan dari substrat kultur. Untuk sel suspensi, lanjutkan langsung ke langkah berikutnya.
Hitung sel untuk memastikan mereka berada pada konsentrasi yang tepat.
Sentrifus sel untuk membuat pelet, lalu resuspensi dalam media beku CM-1.
Pindahkan sel yang telah diresuspensi ke dalam kriovial.
Gunakan metode pembekuan lambat sebelum memindahkan sel ke penyimpanan jangka panjang





Metode
Deskripsi
Langkah-langkah





❄️
Pembekuan Manual

Metode langkah demi langkah yang melibatkan penurunan suhu secara bertahap untuk memastikan kelangsungan hidup sel

1️⃣ Tempatkan sel dalam media pembekuan di dalam freezer 4°C selama 40 menit.
2️⃣ Pindahkan ke dalam freezer -80°C selama 24 jam.
3️⃣ Simpan sel dalam nitrogen cair untuk pengawetan jangka panjang



❄️
Menggunakan Tn. Frosty

Alat yang nyaman yang memungkinkan laju pembekuan terkontrol tanpa daya listrik

1️⃣ Siapkan sel dalam kriovial dengan media pembekuan.
2️⃣ Tempatkan cryovial dalam wadah Mr.
3️⃣ Simpan pada suhu -80°C selama 24 jam sebelum dipindahkan ke nitrogen cair



❄️
Pembeku Laju Terkendali

Pembeku presisi tinggi dari Thermo Fisher atau produsen lain yang dirancang untuk penurunan suhu terkontrol

1️⃣ Memprogram perangkat untuk menurunkan suhu secara bertahap.
2️⃣ Tempatkan sel yang telah disiapkan di dalam freezer.
3️⃣ Setelah siklus pembekuan, pindahkan sel ke nitrogen cair









Simpan kriovial pada suhu di bawah -130°C atau dalam nitrogen cair untuk pengawetan jangka panjang.


Bahan

Mengandung FBS, DMSO, Glukosa, Garam
Kapasitas penyangga: pH = 7,2 hingga 7,6


Freeze Medium CM-1 dari Cytion menawarkan solusi yang dapat diandalkan untuk kriopreservasi, memastikan kelangsungan hidup sel yang tinggi dan fungsionalitas pasca-pencairan untuk berbagai aplikasi penelitian.

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) adalah media basal yang sangat serbaguna dan digunakan secara luas yang dirancang untuk mendukung pertumbuhan berbagai macam sel mamalia dalam penelitian biologi. Media ini berfungsi sebagai media yang ideal untuk menumbuhkan fibroblas primer, neuron, sel glial, HUVEC, sel otot polos, serta garis sel populer seperti HeLa, 293, Cos-7, dan PC-12.
Yang membedakan DMEM dari media lain adalah komposisinya yang unik. Media ini mengandung peningkatan empat kali lipat yang mengesankan dalam konsentrasi asam amino dan vitamin dibandingkan dengan Eagle's Minimal Essential Medium yang asli. Awalnya dikembangkan dengan glukosa rendah (1 g/L) dan natrium piruvat, DMEM sering digunakan dengan kadar glukosa yang lebih tinggi, baik dengan atau tanpa natrium piruvat. Khususnya, DMEM tidak mengandung protein, lipid, atau faktor pertumbuhan, sehingga memerlukan suplementasi. Untuk mencapai pertumbuhan yang optimal, pendekatan yang umum dilakukan adalah melengkapi DMEM dengan 10% Fetal Bovine Serum (FBS). Selain itu, DMEM menggunakan sistem penyangga natrium bikarbonat, yang membutuhkan lingkungan 5-10% CO2 untuk mempertahankan pH fisiologis.
Modified Eagle Medium (DMEM) dari Dulbecco sangat dihargai di antara media yang ditentukan untuk kultur sel dan jaringan, yang memenuhi kebutuhan pertumbuhan berbagai fenotipe sel yang sesuai. Media ini melampaui Eagle's Medium asli, yang dikembangkan pada tahun 1950-an untuk membudidayakan sel ayam, melalui formulasi tambahan yang disempurnakan yang dikenal sebagai modifikasi Dulbecco. Modifikasi ini secara signifikan meningkatkan kandungan asam amino dan vitamin tertentu hingga empat kali lipat dibandingkan dengan medium aslinya.
Dalam bidang kultur sel, DMEM memainkan peran penting sebagai media pertumbuhan untuk berbagai jenis sel, termasuk sel primer, sel punca, dan sel yang ditransformasi. Para peneliti juga menggunakan versi modifikasi DMEM untuk beragam aplikasi penelitian, seperti penemuan obat, rekayasa jaringan, dan studi tentang jalur pensinyalan sel.

Kontrol Kualitas

Disaring steril


Penyimpanan dan Umur Simpan

Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C, terlindung dari cahaya.
Setelah dibuka, simpan pada suhu 4°C dan gunakan dalam waktu 6-8 minggu.


Ketentuan Pengiriman

Suhu lingkungan


Pemeliharaan

Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan yang terlalu sering hingga +37°C, karena dapat mengurangi kualitas produk.
Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti peralatan microwave.
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah yang diperlukan dan hangatkan ke suhu kamar sebelum digunakan.


Komposisi



Kategori
Komponen
Konsentrasi (mg/L)


Asam Amino
Glisin
30.00



L-Arginin HCl
84.00



L-Sistin 2 HCl
62.57



L-Glutamin
584.00



L-Histidin HClH2O
42.00



L-Isoleusin
105.00



L-Leusin
105.00



L-Lisin HCl
146.00



L-Metionin
30.00



L-Fenilalanin
66.00



L-Serin
42.00



L-Treonin
95.00



L-Tryptophan
16.00



L-Tirosin 2 Na 2H2O
103.79



L-Valine
94.00


Vitamin
Kolin klorida
4.00



D-Kalsium Pantotenat
4.00



Asam Folat
4.00



myo-Inositol
7.20



Nikotinamida
4.00



Pyridoxal HCl
4.00



Riboflavin
0.40



Tiamin HCl
4.00


Garam Anorganik
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Komponen Lainnya
D-Glukosa
4500.00



Garam Natrium Fenol Merah
15.90



Natrium Piruvat
110.00

Larutan Pemisah Sel Accutase dengan EDTA dan Fenol Merah – 100 ml

Accutase adalah larutan pelepasan sel siap pakai yang telah disaring secara steril, dirancang sebagai alternatif yang lembut untuk trypsin/EDTA dalam memisahkan sel mamalia yang melekat dari peralatan kultur jaringan plastik standar dan permukaan yang dilapisi adhesi. Larutan ini menggabungkan aktivitas enzim proteolitik dan kolagenolitik dalam larutan garam seimbang untuk memberikan pemisahan yang efektif namun terkendali, menjaga protein permukaan sel, serta mendukung viabilitas tinggi setelah pemindahan dan re-adhesi yang cepat.

Formulasi Accutase didasarkan pada larutan garam fosfat Dulbecco (DPBS) dengan EDTA dan fenol merah sebagai indikator pH visual. Enzim-enzim ini berasal dari sumber non-mamalia dan non-bakteri, sehingga Accutase sangat cocok untuk penelitian sel punca, alur kerja vaksin, dan aplikasi apa pun di mana kontaminan yang berasal dari hewan atau mikroba harus diminimalkan. Larutan ini mengalami auto-inhibisi pada 37 °C, sehingga tidak diperlukan reagen penetralisir atau media yang mengandung serum setelah pelepasan – sel dapat dipindahkan langsung ke media segar.

Fitur Utama

Cairan 1x yang sudah disaring steril dan siap pakai – tidak perlu pengenceran atau rekonstitusi
Aktivitas enzim proteolitik dan kolagenolitik yang digabungkan untuk disosiasi yang lembut
Setiap batch distandarisasi ke aktivitas pemisahan yang ditentukan untuk konsistensi antar-lot
Asal enzim non-mamalia dan non-bakteri
Menghambat sendiri pada 37 °C – tidak memerlukan larutan penetralisir
Diformulasikan dalam PBS Dulbecco dengan EDTA
Phenol red disertakan sebagai indikator pH visual
pH 6,8 – 7,8


Aplikasi Umum
Accutase dengan lembut memisahkan berbagai jenis sel yang melekat dan sensitif, termasuk sel induk embrionik manusia (hESCs), sel induk pluripotent yang diinduksi manusia (iPSCs), sel induk saraf, neuron primer, dan garis sel yang melekat yang dibudidayakan secara rutin seperti HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21, dan A549. Contoh penggunaan meliputi:

Subkultur rutin dan pemindahan sel mamalia yang melekat
Disosiasi sel tunggal yang lembut pada hESCs, iPSCs, dan garis sel sensitif lainnya
Persiapan sampel untuk analisis sitometri aliran dan FACS
Analisis penanda permukaan sel di mana integritas epitop sangat penting
Uji migrasi sel, proliferasi, dan apoptosis
Uji ketenangan sel melalui studi kelaparan serum dan transfeksi onkogen
Uji migrasi sel tumor dan sel krest saraf
Peningkatan skala produksi dalam alur kerja bioreaktor

Untuk pekerjaan rutin, gunakan sekitar 10 ml Accutase per 75 cm2 permukaan kultur dan inkubasi selama 5–10 menit pada suhu kamar. Waktu inkubasi yang optimal harus ditentukan untuk setiap lini sel dan tidak boleh melebihi satu jam. Sebelum penambahan, bilas lapisan sel dengan larutan garam bebas Ca2+/Mg2+ seperti DPBS tanpa kalsium dan magnesium untuk menghilangkan sisa serum dan kation divalen.

Penanganan & Penyimpanan
Simpan botol yang belum dibuka dalam keadaan beku pada suhu -15 °C atau lebih rendah. Lelehkan pada suhu ruang atau semalaman pada suhu +2 °C hingga +8 °C. Jangan melelehkan Accutase dalam bak air bersuhu 37 °C, karena suhu tinggi dapat mengurangi aktivitas enzim. Setelah dilelehkan, larutan dapat disimpan hingga 2 bulan pada suhu +2 °C hingga +8 °C; jangan disimpan pada suhu ruang. Jangan memanaskan reagen terlebih dahulu hingga 37 °C sebelum digunakan – tambahkan langsung ke sel yang telah dicuci pada suhu kamar. Untuk masa simpan yang lama, disarankan untuk membagi reagen menjadi beberapa bagian sekali pakai untuk menghindari siklus pencairan berulang. Selalu lakukan pekerjaan dalam kondisi aseptik.

Kualitas
Diproduksi di bawah standar kualitas yang ketat. Setiap batch Accutase disaring secara steril dan diuji sterilitas, pH, penampilan, dan aktivitas disosiasi untuk memastikan kinerja yang konsisten dan dapat direproduksi dari lot ke lot.

Spesifikasi Produk



Spesifikasi
Detail



Jenis produkReagen pelepasan sel / disosiasi
FormatCairan yang telah disaring secara steril, siap pakai
Volume100 ml
Konsentrasi kerja1x (siap pakai)
Aktivitas enzimKombinasi proteolitik dan kolagenolitik
Asal enzimNon-mamalia dan non-bakteri
Sistem bufferPBS Dulbecco dengan EDTA
Indikator pHMerah fenol
Rentang pH6,8 – 7,8
PenampilanLarutan bening, berwarna merah pucat hingga oranye
Suhu penyimpanan-15 °C atau lebih rendah
Stabilitas setelah dicairkanHingga 2 bulan pada suhu +2 °C hingga +8 °C
Volume penggunaan yang disarankan~10 ml per 75 cm² permukaan kultur
Waktu inkubasi tipikal5 – 10 menit pada suhu kamar
Kondisi pengirimanDibekukan dengan es kering
Tujuan penggunaanHanya untuk penggunaan penelitian dan produksi lebih lanjut



Formulasi (Komposisi per Liter)



Komponen
Konsentrasi (mg/L)




Garam Anorganik

Natrium klorida (NaCl)8000,00
Disodium hidrogen fosfat (Na₂HPO₄)1150,00
Klorida kalium (KCl)200,0
Kalium dihidrogen fosfat (KH₂PO₄)200,00

Komponen Lain

EDTA · 4Na (EDTA tetrasodium)220,00
Fenol merah3,00
Campuran enzim eksklusif (aktivitas proteolitik dan kolagenolitik)1x



Accutase adalah merek dagang terdaftar milik Innovative Cell Technologies, Inc.

Ikhtisar Produk
Volume: 100 ml Penyimpanan: ≤-15°C Kemandulan: Disaring dengan steril
Larutan Antibiotik / Antimikotik (100x ) adalah konsentrat steril dan siap pakai yang dirancang untuk mengurangi risiko kontaminasi mikroba dalam kultur sel dan aplikasi laboratorium terkait. Larutan 100x ini mengandung kombinasi penisilin, streptomisin, dan amfoterisin B yang telah teruji dengan baik
- memberikan aktivitas antimikroba spektrum luas terhadap bakteri Gram positif dan Gram negatif, ragi, dan jamur berserabut. Formulasi ini cocok untuk digunakan dalam kultur sel eukariotik, media bakteri, dan sistem yang sensitif terhadap kontaminasi lainnya, yang mendukung operasi laboratorium yang bersih dan konsisten.
Aplikasi dan Manfaat Dioptimalkan untuk protokol penelitian rutin, solusi ini banyak digunakan untuk menjaga kondisi aseptik dalam alur kerja kultur sel. Solusi ini menawarkan kinerja yang andal di lingkungan yang sensitif terhadap kontaminasi, membantu peneliti mengurangi risiko pertumbuhan mikroba yang berlebihan tanpa mengorbankan kesehatan sel atau kemampuan reproduksi eksperimental. Formulasi yang disaring steril menghilangkan kebutuhan akan langkah-langkah pelarutan tambahan, mendukung persiapan media yang efisien dan mengurangi variabilitas dalam prosedur laboratorium sehari-hari.
Penggunaan dan Kompatibilitas Untuk mencapai konsentrasi kerja standar, encerkan larutan 1:100 ke dalam media kultur lengkap Anda. Produk ini kompatibel dengan berbagai macam garis sel mamalia dan media basal. Dengan ketersediaan stok yang konsisten, para peneliti mendapat manfaat dari kontinuitas pasokan yang dapat diandalkan dan perencanaan logistik yang disederhanakan. Larutan harus disimpan pada suhu ≤ -15 ° C dan terlindung dari siklus pembekuan-pencairan berulang untuk menjaga stabilitas. Hanya untuk penggunaan penelitian. Tidak untuk digunakan dalam prosedur diagnostik atau terapeutik. Tidak untuk digunakan pada manusia atau hewan.

Larutan Garam Penyangga Fosfat (PBS)
Phosphate-buffered saline (PBS) adalah larutan penyangga yang banyak digunakan dalam penelitian biologi dan kimia. Larutan ini memainkan peran penting dalam menjaga keseimbangan pH dan osmolaritas selama berbagai prosedur eksperimental, termasuk pemrosesan jaringan dan kultur sel. Larutan PBS kami diformulasikan secara cermat dengan bahan-bahan dengan kemurnian tinggi untuk memastikan stabilitas dan keandalan dalam setiap percobaan. Osmolaritas dan konsentrasi ion PBS kami sangat mirip dengan tubuh manusia, membuatnya isotonik dan tidak beracun bagi sebagian besar sel.

Komposisi Larutan PBS Kami
Larutan PBS kami adalah campuran yang disesuaikan dengan pH dari buffer fosfat tingkat ultra murni dan larutan garam. Pada konsentrasi kerja 1X, larutan ini mengandung:

8000 mg/L Natrium klorida (NaCl)
200 mg/L Kalium klorida (KCl)
1150 mg/L Natrium fosfat dibasa anhidrat (Na2HPO4)
200 mg/L Kalium fosfat monobasa anhidrat (KH2PO4)

Komposisi ini memastikan pH dan keseimbangan ionik yang optimal, cocok untuk berbagai aplikasi biologis.

Aplikasi Solusi PBS Kami
Larutan PBS kami ideal untuk berbagai aplikasi dalam penelitian biologi. Sifatnya yang isotonik dan tidak beracun membuatnya cocok untuk pengenceran zat dan pembilasan wadah sel. Larutan PBS yang mengandung EDTA efektif untuk melepaskan sel yang melekat dan menggumpal. Namun, logam divalen seperti seng tidak boleh ditambahkan ke dalam PBS, karena dapat menyebabkan pengendapan. Dalam kasus seperti itu, buffer Good direkomendasikan. Selain itu, larutan PBS kami merupakan alternatif yang dapat diterima untuk media transpor virus untuk transpor dan penyimpanan virus RNA, termasuk SARS-CoV-2.

Kontrol Kualitas

Disaring dengan steril


Penyimpanan dan Umur Simpan

Simpan pada suhu +2°C hingga +25°C, terlindung dari cahaya.
Setelah dibuka, simpan pada suhu 2°C hingga 25°C dan gunakan dalam waktu 24 bulan.


Ketentuan Pengiriman

Suhu lingkungan


Pemeliharaan

Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan yang sering hingga +37°C, karena dapat mengurangi kualitas produk.
Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti peralatan microwave.
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah yang diperlukan dan hangatkan ke suhu kamar sebelum digunakan.

Komposisi



Kategori
Komponen
Konsentrasi (mg/L)


Garam
Kalium klorida
200



Kalium fosfat monobasa anhidrat
200



Natrium klorida
8000



Natrium fosfat dibasa anhidrat anhidrat
1150

Organisme	Manusia
Jaringan	Kulup